Друге заняття

План роботи

1. Відділення забродженого розчину від плівки.

2. Визначення в забродженому розчині загальної титруємої кислотності й визначення кислоти г/м² за добу.

3. Визначення лимонної, щавлевої й глюконової кислот й їхній розрахунок.

4. Визначення сухої маси міцелію й розрахунок його продукуючої здатності по лимонній кислоті.

5. Визначення в середовищі залишкового цукру.

6. Розрахунок спожитого цукру.

7. Розрахунок виходу лимонної кислоти в % від спожитого цукру середовища.

Для реєстрації результатів роботи формується нижчеподаний журнал спостереження

Таблиця 3

Волога

Загальна кислотні-сть

рН середо-вища

% РВ

Концен-трація лимон- ної кислоти

Концен-трація щавеле-вої кислоти

Концен-трація глюконо- вої кислоти

Маса пустого бюкса

Маса бюкса з наважкою

Маса після висушуван-ня

Культивування здійснюється у кілька етапів. Спочатку на 0,5 – 1 добу з'являється тоненька плівка гриба, крізь яку проглядає подекуди середовище, потім вона товщає й здобуває різко виражену складчастість. Субстратний міцелій світло-жовтого кольору. Зверху в перші 2 – 4 доби покрита білувато-сіруватим пушком, на 6 – 7 добу спостерігається спочатку осередкове спороношення, потім воно покриває всю зовнішню поверхню чорним нальотом (колір конідій у гриба – чорний).

За цей час майже весь цукор із середовища зникає, частково перетворюючись у лимонну кислоту. Вихід лимонної кислоти становить від цукру 58 – 60%. Через 7 - 8 діб заброджений розчин піддається аналізу.

1. Відділення збродженого розчину від плівки

Знімають зі склянки ватномарлеву серветку й, обережно, нахиляючи склянку, зливають з-під плівки весь зброджений розчин у мірний циліндр на 500 мл. Наприкінці зливу плівку підтримують паличкою. Потім плівку перекидають субстратним міцелієм нагору й промивають його киплячою водою два рази по 30 – 35 мл. Промивні води приєднують до збродженого розчину й замірять весь обсяг культуральної рідини й промивних вод (V_{заг.к.р.}). Цей розчин після перемішування (його варто просто вилити в склянку) служить вихідним матеріалом для подальших визначень.

2. Визначення в збродженому розчині загальної титруємої кислотності й знімання кислоти г/м2 за добу

Відбирають 5 мл аналізованого розчину (зброджений розчин і промивні води), розбавляють дистильованою водою до 150 мл, додають 3 – 4 краплі фенолфталеїну й титрують 0,25 н розчином лугу.

Вміст лимонної кислоти (X) в % обчислюють за формулою:

де А – кількість лугу, який витратився на титрування, у мл; F – фактор лугу по лимонній кислоті (1 мл 0,1н розчину NaОН відповідає 0,007 г лимонної кислоти).

При використанні 0,025н розчину NaОН перераховують фактор лугу по лимонній кислоті

1 мл 0,1 нNaOН – F_0,1 = 0,007 лимонної кислоти;

1 мл 0,025н NaОН – F_0,025 = X .

Тоді F_{0,025H NaOH} = 0,00175 г.

1 мл 0,025н NaОН еквівалентний 0,00175 г лимонної кислоти.

Розрахунки здійснюються аналогічно наведеним у лабораторній роботі 1.

Знаючи кількість кислоти в збродженому розчині можна розрахувати кількість кислоти в грамах з 1 м² площі грибної плівки за добу процесу.