3. Визначення лимонної, щавлевої й глюконової кислот й їхній розрахунок

Роздільне визначення кислот засноване на різній розчинності їхніх кальцієвих солей у воді й слабокислому розчині. Лимоннокислий кальцій дуже слабко розчинний у гарячій воді й добре розчинний у розведеній соляній кислоті. Щавлевокислий кальцій практично не розчинний ні у воді, ні в слабкому розчині соляної кислоти. Глюконовокислий кальцій добре розчинний у воді.

3.1. Визначення суми лимонної й щавлевої кислот.

При нейтралізації культуральної рідини хлористим кальцієм у присутності аміаку цитрат й оксалат кальцію випадають в осад, а глюконат залишається в розчині:

2С₆Н₈0₇ + 3СаСl₂ + 6NН₄OН = Са₃(С₃Н₅O₇)₂ + 6NН₄С1 +6Н₂O;

C₂Н₂O₄ + СаС1₂ + 2NН₄OН = СаС₂O₄| + 2NН₄С1 + 2Н₂O;

2С₆Н₁₂O₇ + СаС1₂ + 2NН₄OН = Са(C₆Н₁₁O₇)₂ + 2NН₄С1 + 2Н₂O.

Устаткування й посуд: Конічні колби на 250 мл, 1 л. Плитка, фільтрувальний папір (синя стрічка), водяна баня, лійка, мірний циліндр на 500 мл, мірна колба на 1 л, бюретка.

Реактиви: 11,1% СаС1₂, 10% NH₃, 1% AgNО₃, 10% НС1, (NH₄)₂C₂O₄ насичений розчин, 0,1% фенолфталеїну, 10% H₂SО₄, 0,1 N KMnО₄, СаСО₃ хімічно чистий.

Хід роботи

На визначення беруть у конічну колбу на 250 мл таку кількість розчину, щоб у ньому містилося не менш 0,1 і не більше 0,2 г кислоти.

Таблиця 4.

Реактиви, обробка	Кількість, час	Примітка
11,1% р-н хлористого кальцію	На 0,1 г орг. кислоти 9 мл
Нагрівання	До кипіння
0,1% р-н фенолфталеїну	1-2 краплі
10% р-н аміаку	До нейтралізації по фенолфталеїну	Повільно до рожевого кольору р-ну
Кип'ятіння	10 хвилин
Витримка на водяній бані	30 хвилин
Гаряче фільтрування (синя стрічка)
Н2О , t = 80 – 90°С	Промивання
1% р-н AgNО3 у НNО3	1 – 2 краплі в пробірку з аліквотою промивних вод	До негативної реакції на хлор
	Фіксація обсягу промивної води	Поправочний коефіцієнт розчинності цитрату кальцію в перерахуванні на лимонну кислоту становить 0,0055%.
10% р-н НС1	Розчинення осаду на фільтрі (20 – 25 мл)	Розчин кількісно переносять у мірну колбу на 1000 мл
Н2О	До мітки 1000 мл	перемішування
відбір 100 мл
Нагрівання	До кипіння
Насичений киплячий р-н	10 – 15 мл
0,1% р-н фенолфталеїну	1 – 2 краплі
10% р-н аміаку	До нейтралізації по фенолфталеїну	Повільно до рожевого кольору р-ну
Кип'ятіння	10 хв.
Охолодження, фільтрування (синя стрічка)
Н2О, t = 20 – 30°С	Промивання осаду на фільтрі
1% р-н AgNО3 у НNО3	1 – 2 краплі в пробірку з аліквотою промивних вод	До негативної реакції на хлор
10% р-н H2SО4	20 – 25 мл	Порціями до розчинення осаду на фільтрі
Нагрівання	До 80°С	До кипіння не доводити
0,1 N KMnО4	Титрування	До слабо-рожевого забарвлення

Суму лимонної й щавлевої кислот (Х₁) у відсотках обчислюють за формулою:

де n₁ – обсяг розчину перманганату, витраченого на титрування, мл; 0,007 – кількість лимонної кислоти, що відповідає 1 мл 0,1 н розчину перманганату калію, г; V₁ - обсяг фільтрату й промивних вод, мл; а₁ - обсяг розчину, узятого на аналіз, мл.