43.Куриные эмбрионы и их использование в вирусологии. Методы заражения.

(Цели, требования, индикация – шпора№42).Методы заражения.Подготовка: овоскопия (жизнеспособность, подвижность плода, отмечают границы пуги, участок бессосудистой зоны, подлежание плода); заражают в асептич. условиях в кювете с мерлев. салфеской с дезр-ром; стерилиз. инструменты ставят в спирт и фломбируют при повторн. использовании. 1.В аллантоисную полость (вирус гриппа, ринопневмонии лошадей, везикул. стоматита). 1)овоскопия; 2)положение яйца пугой верх; 3)дезинфекция со стороны пуги; 4) крестообр. надпил со стороны пуги; 5)вируссод. материал ввести иглой на 2-3 мм ниже границы пуги в объеме 0,1-0,2 мл; 6)отверстие закрыть парафином; 6)метка, термостат. 2. На ХАО (оспа, чума, болезнь Ауэски). Через естеств. пугу: 1)-3)то же; 4)кавдр. отверстие со стороны пуги, снять подскорлуп. оболочку; 5)вируссод. материал ввести на ХАО шприцем или пипеткой; 6)-7) то же. Через искусств. пугу: 1) овоскопия; 2)положение горизонт. пугой вправо, плод –сверху; 3)дезинфекция на пуге и плоде; 4)со стороны пуги –кругл. отверстие, плода –квадр. отверстие, удалить подскорл. оболочку; отсосать грушей воздух из пуги, плод переместится, обазуется новая пуга сверху; 5)вируссод. материал ввести пипеткой на ХАО; 6)-7) тоже. 3.В желточн. мешок ( ринопневмония лошадей, болезнь Марека). 1)овоскопия; 2)положение либо горизонт., пугой вправо, плод вверху, либо верт., плод-внизу; 3)дезинфекция; 4)крестообр. надпил в первом случае над пугой, во втором – у желтка; 5) вируссод. материал ввести на 2-3 мм. 6)-7)то же. 4. В тело зародыша: 1)-4)то же, что и на ХАО; 5)раздвинуть ХАО пинцетом и вытащить зародыша, ввести вируссод. материал в него, опустить; 6)-7)то же.

10. генетические взаимодействия вирусов. Обмен ген материалом у вир происх путём генетических рекомбинаций, при этом в ген аппарат одного вир – реципиента – передаются фрагменты ген аппарата др вируса – донора, в результ формируются рекомбинанты, обл свойствами обоих вирксов. Разл 5 форм генетической рекомбинации:1)г.р.,при кот происх обмен отдельными генами между 2 и более вирусами, в результ образуются рекомбинанты, содержащие гены 2 или более родителей. 2) генетическая, или множественная, репликация – перераспределение генов у 2х родственных генов, у кот инактивированы разнгенв, при скрещивании обр полноценные вирионы. 3) реактивация клеткой-хозяином – это результат восстановления лучевых повреждений вируса внутри кл – хозяина. 4)гетерозиготность - при одноврразмннескразнородн вирусов в кл могут сформироваться вирионы с полн геномом одного родительского вируса. 5)транскапсидация – часть чужеродного генома способна переноситься в стабильной форме в чувствительные к основному вирусу клетки. 11. не генетические взаимодействия вирусов Эта форма носит назвмодификационной. Так изменения обусловлены особенностями клетки хозяина, в кот происходит их репродукция. У вир позвоночных модификации связаны со строение внешней оболочки вириона. Сложноорганизованные вирусы внешн оболочку преобретают на цитоплазмотической мембране клетки хозяина. В образовании этой оболочки включаются липиды, белки, углнводы, входящие в состав клеточных гликолипидов. Модифицированные вир преобретают способность заражать клетки, в кот они модифицировались, с более выс эффективностью. Комплекация – когда белки, кодируемые геном одного вируса, способствуют репродукции другого, при это один вир доставляет генный продукт, кот отсутств у другого. Обмен между молекулами двух вирусных нукл кислот не происходит, комплементация приводит к формированию полноценного вириона. Фенотипическое смешивание - при смешенном заражении генетически схожими вир, при эт в потомстве появляются вирионы, кот содержат антигены обоих родителей. Стимуляция - при смешенной инфекции 2мя генетически разл вирусами, один их кот не способен вызывать индукцию какого-либо фермента, необходимого для синтеза нукл кислоты или белков оболочки вириона. 12. Мутации у вир и их механизмы Наследственная необратимая изменчивость возникает в результатет мутации или различных генетических рекомбинаций генетического кода. Мутация – это скачкообр изменение наследственности, изменение гена, приводящее к появлению измененного признака. Механизм этого процесса состоит в изменении нуклеотидной последовательности гена, т.е. в перемещении азотистых оснований в нуклеотидах. Различают точечные мутации, когда происходят изменения только в одном нуклеотиде в результате его замены другим, или доп вставкой, или утраты, при эт мутация возник без вмешательства человека. Механизм их возникновения заключается в слкчайных ошибках при включении нуклеотидов во время репликации нукл кислот вирусов, они затрагивают разл свойства вирусов. Инициированные мутации вирусов вызываются воздействием на них физ и хим факторов, кот наз мутагенными веществами (уф лучи,, красители, азотистая кислота. Одни воздействуют на внекл вирус, др – на внутрикл. Мех действия – под воздействием мутвеществ во время репликации вир нукл кислоты азотистые основания спариваются с неправильными партнерами, что ведет к замене одного нуклеотида другим или же к изменению самих азот оснований. Иницииров мутации используют для получ вакцин вирусов методом селекции (выделение клонов вируса из одиночных пустул на хорион-аллантоизной оболочке к\э, селекция клонов из бляшек на к\к,селекция пассажами предельных разведений вирусов, сел методом пассажей приразн темпер). 14. принцип систематики вирусов животных Совр систематика классификации вирусов представлена с учетом 6 доклада междунар комитета по таксономенклатуре вирусов в 2000г. Вир представленые классификации сгрупированны в систему восходящих таксонов, соответствующих порядку, семейству, подсем, роду и виду. В основу классификации положены следующие свойства вириона: тип нуклкислоты,количество спиралей, наличие пеплоса, морфология вириона, способ репликации,место и механизм сборки вириона,антигенные свойства, круг хозяев для кот патогенен вир,тропизм вируса и способность образовывать телец – включений, механизмы переачи вируса. Порядки – это принципиально нов таксоны высшего царства мира, объединяющие близк семейства вирусов. Их представители обладают гомологичными, полимиразными белками, одинак распределением генов и аналогичными генными продуктами. В наст вр выделяют 2 порядка: 1.mononegviralis. в него вход семейства: paramixoviridae,rhabdoviridae,philoviridae,bornoviridae. 2.Nidoviralis: coronoviridae,arteriviridae. Не все вирусы входят в порядки Семейства – это группы подсемейств или группа родов с общими характеристиками, отличот др семейств. Осн критерии используемые для деления на семейства включают следующие свойства вирионов: тип и структура нуклкислоты,строениегенома,наличиеоболочки,размер и морфология вириона. Род – это группа видас определенными общими характеристиками и отличающиеся от вирусов др родов: феномены ген взаимодействий, круг восприимч хозяев, геогр распределение, способ передачи, пнтиген свойства. Вид-группы штамов обладающих набором стаб свойств , кроме типичного вида определены еще 3 катигории представителей вида. Др виды – это вир.кот.относятся точно к дан.семейству или роду.

Возможные виды-это вир изученные и опублекованные ,инфекция о кот.являетсяосновоняем для вкл.их в данный род или семейство. Вероятн.виды – это вир.сведения о кот.пока не пока не значительны для вкл.их в род или семейство. Возможные и вероятные виды вирусы размещ.в графе не клас-е вирусы.