13) Принцип окраски бактерийпо граму.Отличие клеточной стенки грамоположительных бактерийот грамотрицательных.

Принцип окраски по Граму основан на том, что положительно красящиеся по Граму микробы имеют в своем поверхностном слое вещества (рибонуклеат магния с белками), которые при окрашивании парарозанилиновыми красками (генцианвиолет, кристаллвиолет, метилвиолет, викторияблау) в присутствии иода дают прочные соединения, не разрушающиеся спиртом. Микробы, отрицательно красящиеся по Граму, в своем составе не имеют таких веществ и потому при окрашивании этими красками в присутствии иода не дают прочных соединений, и при действии спирта обесцвечиваются. Выяснено, что окрашенный комплекс образуется на протопласте , но его удерживание клеткой или вымывание из нее при последующей обработке спиртом определяются особенностями строения клеточной стенки.

14)В КАКИХ СЛУЧАЯХ ИМСПОЛЬЗУЮТСЯ ТЕМИНЫ : «БАКТЕРИИ», «БАЦИЛЛЫ», «КЛОСТРИДИИ»

Термин «Бактерии» используется для прокариотических микрооганизмов, чаще всего одноклеточных.

Термин «Бациллы» используется для грамположительных палочковидных бактерий,образующих внутриклеточные споры.

Темин «клостридии» используется для обозначения рода грамположительных облигатно-анаэробных бактерий способных продуцировать эндоспоры.

15)ЧТО ТАКОЕ L ФОРМЫ БАКТЕРИЙ ,В КАКИХ СЛУЧАЯХ ОНИ ВОЗНИКАЮТ

L-формы — бактерии, частично или полностью лишённые клеточной стенки, но сохранившие способность к развитию. Было показано, что L-формы возникают спонтанно или индуцировано - под воздействием агентов, блокирующих синтез клеточной стенки: антибиотиков (пенициллины циклосерин, цефалоспорины, ванкомицин), ферментов (лизоцим, амидаза, эндопептидаза) ультрафиолетовых и рентгеновских лучей, аминокислоты глицина.

L-формы образуются в результате несбалансированного роста нормальных бактериальных клеток в длину и в толщину и поэтому полиморфны. В культурах L-форм обнаруживаются шаровидные, нитевидные или вовсе бесструктурные клетки размером от 0,2 до 50 мкм. Они спокойно проходят через бактериальные фильтры и легко разрушаются при механических воздействиях. В отличие от нормальных клеток L-формы часто содержат крупные вакуоли. Их метаболическая активность очень низкая. Клеточное деление происходит нестандартно, за счёт образования элементарных тел путём отпочкования от поверхности клетки или от мембраны вакуоли.

16)МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ СПОР У БАКТЕРИЙ

Обнаружение спор.

Благодаря толщине свое оболочки и плотности содержимого, споры остаются неокрашенными при обработке препарата анилиновыми красителями простым методом или сложным по Граму.

При окраске по Граму или по Леффлеру спора внутри окрашенной цитоплазмы микробной клетки выглядит как зернышко круглой или овальной формы, сильно преломляющее свет.

Существует несколько методов окраски спор (по Циль – Нильсену, по Ганзену, по Ожешко и др.) позволяющих достигнуть контрастной окраски спор в цитоплазме.

Методика окраски микропрепарата:

1) На фиксированный препарат накладывается полоска фильтровальной бумаги (для защиты препарата от оседающих кристаллов красителя) и на нее наливается карболовый фуксин Циля. Препарат осторожно прогревается в течение 3 – 4 минут над пламенем горелки. По мере испарения жидкости краситель добавляется.

2) Фильтровальная бумага снимается и на мазок наносится 2 – 3 капли 5% раствора кислоты (серной, соляной, азотной или уксусной) на 30 секунд.

3) Препарат тщательно промывается струей холодной воды и высушивается.

4) Докрашивается раствором метиленовой сини Леффлера в течение 1 – 2 минут.

5) Препарат промывается струей воды, высушивается и микроскопируется. На голубом фоне цитоплазмы видны сиренево – красные споры.

Этот метод позволяет обнаружить споры не только в процессе их формирования внутри клетки, но и после того как сформированная спора высыпалась из разрушившейся микробной клетки.

Приготовление карболового фуксина Циля:10 мл. насыщенного спиртового раствора фуксина растворяют в 100 мл 5% раствора карболовой кислоты.

17)ЧТО ТАКОЕ НУМЕРИЧЕСКАЯ ТАКСОНОМИЯ

Таксономия нумерическая

метод феносистематики, состоящий в получении максимальной информации об иссл. микробе. Проводится в несколько этапов: 1) отбор иссл. к-р и типовых штаммов; 2) выбор признаков и их кодирование; 3) определение признаков; 4) компьютерный анализ результатов; 5) интерпретация результатов на основе степени сходства и различий. При кодировании все признаки уравниваются или располагаются иерархически.

Нумерическая (численная) таксономия основывается на использовании максимального количества сопоставляемых признаков и математическом учете степени соответствия. Больщое число сравниваемых фенотипических признаков и принцип их равной значимости затрудняло классификацию.

18)ЧТО ТАКОЕ КОНСТИТУТИВНЫЕ,ИНДУЦИБЕЛЬНЫЕ, РЕПРЕСИБЕЛЬНЫЕ ФЕРМЕНТЫ

1. конститутивные - синтез которых происходит с определенным постоянством и не зависит от субстрата и конечного продукта

2. индуцибельные- синтез которых усиливается при наличии в окружающей среде субстрата для этих ферментов

3.репресибельные- синтез которых подавляется при наличии конечного продукта реакции в окружающей среде

19)ОТЛИЧАЕ МЕЖДУ ЯДЕРНЫМ АППАРАТОМ ПРОКАРИОТ И ЭУКАРИОТ

Принципиальное и наиболее заметное различие между этими двумя группами организмов заключается в том, что эукариоты имеют особый органоид – ядро, т. е. генетический материал обособлен и отделен от цитоплазмы ядерной оболочкой. Наследственная информация заключена в хромосомах, содержащих ДНК и особые белки. Деление происходит в результате сложного процесса, называемого митозом. Однако неправильно будет сказать, что прокариоты не имеют ядра, так как у них есть ядроподобные структуры – нуклеоиды. Более корректное выражение: прокариоты не имеют оформленного ядра, так как нукле-оиды имеют более простое строение и не отделены от цитоплазмы мембраной. Наследственную информацию несет одна хромосома, представляющая собой длинную молекулу ДНК.