Биотехнологии 2015 Сборник материалов международного конгресса

SECTION | | “BIOTECHNOLOGY AND MEDICINE”

УДК 577.15.

APPLICATION OF MAGNETIC NANOPARTICLES FOR CONTROLLED DELIVERY OF DRUGS

Vlasova K.Yu,Abakumov M.A., Wishwarsao H., Sokolsky M., Nukolova N.V., MajougaA.G., Golovin Y.I., Klyachko N.L., KabanovA.V.

Lomonosov Moscow State University, Moscow, Russia 119991, Moscow, Leninskie goru 1/3

e-mail: [e-mail]

Nanocomplexes and liposomes/micelles with magnetic nanoparticles (MNPs), containing drugs molecules (superoxiddismutase 1 and doxorubicin), were obtained. Under low frequencyAC magnetic field exposure MNPs mechanically rotate and destroy the nanosystem, that can be used for control drug release.

Keywords: magnetic nanoparticles; low frequency magnetic field, nanomedicine, drug delivery and control release.

In this work we try to develop a new method to improve drug release from MNPs under super low frequency MF. We suppose that under low frequency MF exposures the Brown’s relaxation dominates and MNPs rotation could occur leading to conformation changes and release of bioactive molecules immobilized on MNPs surface.

We have synthesized MNPs of magnetite with magnetic core diameter 7-12 nm . The MNPs were coated with block-copolymer of polylysine and polyethylene glycol. Superoxide dismutase 1 (SOD1) was electrostatically adsorbed on the surface of the clusters. Liposomes were prepared as follow: MNPs, phosphatidylcholine was dispersed in chloroform, dried to get film, then dispersed in distillated water, sonicated and doxorubicin was loaded. Enzyme coated MNPs formed nanosized clusters with intensity average diameter of 112±5 nm and zeta potential 12±3 mV. After low frequency AC MF exposure we observed change of immobilized enzyme activity and hydrodynamic size of clusters. Centrifugation of the nanosuspension after AC MF exposures resulted in increase of positive charge of clusters and change in enzyme concentration in comparison with control sample without MF, thus confirming desorption of negatively charged enzyme from the positively charged surface of MNPs. Dox loaded magnetic liposomes had average diameter of 160±10 nm and polydispersity index (PDI) 0.25±0.07. Liposomes were stable in DW and PBS at pH=7.4 at 37°C during a week. After MF application (10 min of exposure, 50 Hz, 230 mT) diameter of liposomes raised to 190±6 nm and PDI was 0.38±0.05. We explain this by destroying and/or reorganization of lipid bilayer, that leads to changes in release of drug in comparison with control without MF exposure. Investigation was supported by RSF-14-13-00731 grant, K1-2014-022 grant.

СТРУКТУРНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ЛИЗОЦИМА С КАППА КАРРАГИНАНОМ Журавлева И.Л.1, Антонов Ю.А.

Институт Биохимической Физики им. Н.М. Эмануэля, Российской Академии Наук. Ул. Косыгина 4. 119334 Москва, Российская Федерация

Белки взаимодействуют с природными и синтетическими полиэлектролитами, приводя к об- разованию растворимых комплексов и комплексных коацерватов. Практическая значимость этих взаимодействий состоит в возможной иммобилизации и стабилизации ферментов в поли-

Congress “BIOTECHNOLOGY: STATE OF THE ART AND PROSPECTS OF DEVELOPMENT” March 17-20, 2015	99

СЕКЦИЯ | | «БИОТЕХНОЛОГИЯ И МЕДИЦИНА»

электролитных комплексах, и модификации сродства белок-субстрат. В данной работе методами турбодиметрии, динамического светорассеяния, оптической, конфокальной и электронной микроскопии, кругового дихроизма и флуоресцентной спектроскопии изучено взаимодействие основного белка-лизоцима (молекулярная масса »14.4 kDa) с отрицательно заряженным сульфатированным полисахаридом-каппа каррагинаном (kCG). Лизоцим образует интерполимерные комплексы сkCG в буферных растворах при рН 7.0 и ионной силе 0.05. Взаимодействие приводит к образованию больших (несколько микрон в диаметре) анизотропных комплексных частиц с максимальным выходом при весовом соотношении kCG/лизоцим, q = 0.25-0.36, в зависимости от ионной силы смеси. Установлено, что независимо от величины q, молекулы ли - зоцима распределяются внутри комплексных частиц неравномерно. Фиксация лизоциман аkCG происходит с образованием бляшки между биополимерами. Взаимодействие имеет преимущественно электростатический характер, приводя к значительному возрастанию спиральности kCG и заметной пертурбации локальной третичной структуры лизоцима.

STRUCTURALINVESTIGATION OFTHE INTERACTION OF LYSOZYME WITH KAPPA CARRAGEENAN

I.L.Zhuravleva, Y.A.Antonov,

N.M. Emanuel Institute of Biochemical Physics, RussianAcademy of Sciences, Kosigin Str. 4. 119334Moscow, Russia

Proteins interact strongly with natural and synthetic polyelectrolytes lead to theformation of soluble complexes and complexcoacervates. The practical consequences of these interactions may include immobilizationor stabilization of enzymes in polyelectrolytecomplexes and the modification of pro- tein-substrate affinity.This work studies interactions between lysozyme, a globular basic protein characterized by MW of approx.14.4 kDa, and the negatively charged sulfatedkappa carrageenan (kCG) using turbidimetry, dynamic light scattering, optical, confocal and Cryo-SEM microscopy, circular dichroism, and fluorescence, spectroscopies. Lysozyme forms interpolymeric complexes with kCG in the buffer solutions (pH 7.0, ionic strength 0.05). Interaction leads to formation of large (few μm in size) anisotropic complex particles with the maximal yield at the kCG/lysozyme weight ratio, q = 0.25-0.36 depending on the ionic strength. It was established that independently on the q values lysozymes molecules distributes inside complex particles non-uniformly. Fixation of lysozyme molecules with the kCG body takes place with formation of plaque between biopolymers. Interaction is mainly electrostatic leading to significant increase in content of the helix structure of kCG and an appreciable perturbation the local tertiary structure of lysozyme.

100	Конгресс «БИОТЕХНОЛОГИЯ: СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ» 17-20 марта 2015

SECTION | | “BIOTECHNOLOGY AND MEDICINE”

ПУБЛИКАЦИИ

PUBLICATIONS

УДК 577.112, 577.181

ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО АНАЛОГА БЕТА-ШПИЛЕЧНОГО АНТИМИКРОБНОГО ПЕПТИДА ТАНАТИНА Баландин С.В.1, Пантелеев П.В., Шереметьева Э.В., Овчинникова Т.В.

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук

117997, Российская Федеpация, Москва, ГСП-7, улица Миклухо-Маклая, 16/10

[e-mail]

Разработана система гетерологической экспрессии и технология очистки бета-шпилечно- го пептида танатина – потенциального антимикробного и противоопухолевого лекарственного средства.

Ключевые слова: антимикробные пептиды, противоопухолевые пептиды, танатин, беташпилечная структура, гетерологическая экспрессия.

Среди нескольких тысяч известных природных антимикробных пептидов сравнительно немногие способны проявлять свою активность в наномолярных и низких микромолярных концентрациях. К их числу относятся катионные амфифильные пептиды, имеющие структуру бета-шпильки и стабилизированные 1–4 внутримолекулярными дисульфидными связями. В настоящее время, в связи с нарастанием проблемы лекарственной резистентности по отношению к конвенциальным лекарственным средствам, активно исследуется возможность использования антмикробных пептидов для противоинфекционной и противоопухолевой терапии. Танатин – бета-шпилечный антимикробный пептид, содержащий одну дисульфидную связь, выделенный из клопа Podisus maculiventris и подавляющий рост широкого спектра микроорганизмов, в том числе, ряда мультирезистентных штаммов. Пептид не имеет значительной гомологии с другими защитными пептидами насекомых, однако близок по первичной и пространственной струк - туре к антимикробным пептидам из кожных секретов лягушек рода Rana. Танатин не проявляет гемолитической активности в концентрациях, которые на порядок превышают минимальные ингибирующие в отношении бактерий, что свидетельствует о высокой селективности действия. Отсутствие существенной цитотоксической активности в отношении нормальных клеток человека и удовлетворительные показатели стабильности в плазме крови позволяют рассматривать этот пептид в качестве прототипа для разработки новых лекарственных препаратов.

С целью проведения структурно-функциональных исследований танатина и создания его аналогов с повышенным терапевтическим индексом и устойчивостью к протеолизу нами был создан набор генно-инженерных конструкций, позволяющих получать данный пептид как в клетках E. coli, так и в бесклеточной среде. В работе использована система экспрессии под контролем промотора бактериофага Т7. Разработанный способ очистки обеспечивает возмож- ность быстрого получения и скрининга мутантных вариантов исследуемого пептида.

Работа поддержана грантом Президента Российской Федерации для государственной под- держки молодых российских ученых (МК-6023.2014.4).

Congress “BIOTECHNOLOGY: STATE OF THE ART AND PROSPECTS OF DEVELOPMENT” March 17-20, 2015	101

СЕКЦИЯ | | «БИОТЕХНОЛОГИЯ И МЕДИЦИНА»

UDC 577.112, 577.181

PRODUCTION OFTHE RECOMBINANTANALOG OF BETA-HAIRPINANTIMICROBIAL PEPTIDE THANATIN

Balandin S.V.*, Panteleev P.V., Sheremeteva E.V., Ovchinnikova T.V.

Shemyakin and Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of Sciences Miklukho-Maklaya str., 16/10, 117997, Moscow, Russia

*[e-mail]

Heterologous gene expression system and purification method have been developed for production of beta-hairpin peptide thanatin – a potential antimicrobial and antitumor drug.

Keywords: antimicrobial peptides, antitumor peptides, thanatin, beta-haipin structure, heterologous expression.

Among several thousand known natural antimicrobial peptides only a minor part demonstrates biological activity in nanomolar and low micromolar concentration range. These include cationic amphiphilic peptides having beta-hairpin structure stabilized by 1–4 intramolecular disulfide bonds. Due to the growing problem of drug resistance to conventional drugs, the perspectives of use of antimicrobial peptides for anti-infective and antitumor therapy are being investigated actively. Thanatin is a beta-hairpin antimicrobial peptide isolated from hemipteran Podisus maculiventris. It was shown to contain one disulfide bond and inhibit the growth of a broad spectrum of microorganisms including several multiresistant strains. The peptide has no significant homology with other host defense peptides of insects, but its primary and spatial structures are close to those of antimicrobial peptides found in skin secretion of frogs of the genus Rana. Thanatin displays no hemolytic activity at concentrations which are ten times higher than its minimal inhibitory concentrations against bacteria, indicating a high selectivity of action. The absence of significant cytotoxicity against normal human cells along with a satisfactory stability in plasma allow us to consider this peptide as a prototype for development of novel drugs.

For the purpose of structural and functional studies of thanatin and in order to create new analogs with enhanced therapeutic indices and proteolytic stability we have designed a set of genetic constructs allowing to synthesize this peptide in E. coli cells as well as in cell-free environment. In our work we have used the bacteriophage T7 promoter-based expression system. The developed expression and purification method allows rapid preparation and activity screening of mutant variants of investigated peptide.

The work was supported by the President grant for young Russian scientists (МК-6023.2014.4).

577.114

ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ЛИПОСОМ, МОДИФИЦИРОВАННЫХ РАЗВЕТВЛЁННЫМИ

ГЛИКОКОНЪЮГАТАМИ

Буданова У.А., Стрижевская Д.А., Гурьева Л.Ю., Щелик И.С., Себякин Ю.Л.

Московский государственный университет тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова,

Москва, Россия, 119571, Москва, пр. Вернадского, д. 86

e-mail: с[e-mail]

Липосомы, средства доставки БАС, гликоконъюгаты

Известно, что клетки печени, а также некоторые виды опухолей отличаются повышенным уровнем экспрессии белков, обладающих способностью связываться с высокой степенью аф-

102 Конгресс «БИОТЕХНОЛОГИЯ: СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ» 17-20 марта 2015

SECTION | | “BIOTECHNOLOGY AND MEDICINE”

финности с терминальными остатками D-галактозы в составе различных конъюгатов и комплексов. К числу таких специфичных белков относятся асиалогликопротеиновые рецепторы и галектины. Модификация средств доставки БАС олигосахаридами и их производными, содержащими концевые галактозильные фрагменты, способствует приданию им адресных свойств и позволяет создавать на их основе перспективные средства диагностики и лечения различных заболеваний.

Изучены физико-химические свойства смешанных липидных дисперсий; исследована специфичность взаимодействия везикул, модифицированных углеводами, с галактозосвязывающим лектином клещевины RCA1. Для липосом, модифицированных разветвлённым гликокнъюгатом с терминальными остатками D-галактозы, определена зависимость степени связывания с рецептором от содержания гликолипида в частицах. Показано, что оптимальное содержание синтезированных веществ в композиции составило 5%.

Средний размер липидных дисперсий, содержащих мультивалентные гликоконъюгаты после обработки ультразвуком составляет 150 нм.

Методом спектрофотометрии была изучена стабильность новых углеводсодержащих липидных дисперсий во времени. Показано, что смешанные везикулы на основе липотрипептидов стабильны на протяжении недели.

Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (грант № 13-04-00841).

577.114

STUDY PROPERTIES OF LIPOSOME MODIFIED WITH BRANCHED GLYCOCONJUGATES

Budanova U.A., Strijevskaja D.A., Gur’eva L.Yu, Shchelik I.S., Sebyakin Yu.L.

Lomonosov Moscow University of Fine Chemical Technology, 119571 Moscow, Russia, prospect Vernadskogo 86

e-mail: с[e-mail]

Liposomes, drug delivery systems, glycoconjugates

It is known that the liver cells, as well as some of the types of tumors are notable for increased level of proteins expression, having the ability to bind to the terminal D-galactose residues in the various conjugates and complexes with high affinity. These include specific proteins, which are asialoglycoprotein receptors and galectin. Modification of drug delivery systems with oligosaccharides and their derivatives, containing terminal galactosyl moieties gives targeted properties and it allows to create advanced tools for diagnostic and treatment of various diseases.

Physico-chemical properties of the mixed lipid dispersions have been explored; the specific- ity of the vesicles interaction, modified of the carbohydrates, with galactose-binding castor lectin RCA 1 has been investigated. For liposomes modified with branched glycoconjugate with terminal D-galactose residues, it has been defined the dependence of the degree of binding to a receptor on the content of the glycolipid in the particles. It is shown that the optimum amount of the synthesized com- pounds in the composition was 5%.

The average size of lipid dispersions containing multivalent glycoconjugates after sonication is 150 nm. The stability of the new carbohydrate lipid dispersions was studied in time using spectrometry method. It is shown that the mixed vesicles based on lipotripeptides is stability for a week. This work was supported by the Russian Foundation for Basic Research (grant № № 13-04-00841)

Congress “BIOTECHNOLOGY: STATE OF THE ART AND PROSPECTS OF DEVELOPMENT” March 17-20, 2015	103

СЕКЦИЯ | | «БИОТЕХНОЛОГИЯ И МЕДИЦИНА»

УДК 615.38:616.37

УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ПРОЦЕДУРЫ ГЕМОДИАЛИЗА ДЛЯ ПАЦИЕНТОВ С ИНСУЛИНОЗАВИСИМЫМ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ Быковская Е.Ю., Жуковская В.А., Жуковский Ю.Г., Кузнецова Л.П., Никитина Е.Р., Сочилина Е.Е.

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН Санкт-Петербург. E-mail: [e-mail]

В последние годы для лечения хронической почечной недостаточности всё более широко стали использовать гемодиализ. Автоматические гемодиализаторы выпускаются во многих странах мира. В стационарных условиях пациента укладывают на специальную медицинскую кровать и через фистулу подключают к гемодиализатору. Длительность гемодиализа обычно составляет 4-5 часов, процесс ведётся непрерывно. Циркулирующая кровь пациента в приборе отделена от диализирующего раствора полупроницаемой мембраной, через микро - поры которой из крови пациента в диализирующий раствор переходят низкомолекулярные вещества-шлаки (мочевина и др.) и низкомолекулярные вещества полезные для организма (глюкоза и др.), высокомолекулярные вещества (белки и др.) остаются в крови. У пациентов, с инсулинозависимым сахарным диабетом, после введения им инсулина концентрация глюко - зы в крови низкая, а в процессе гемодиализа она становится ещё меньше и может достигнуть нижнего порога. В таких случаях происходит обильное потоотделение, наступают обмороки, потери равновесия при ходьбе и при сидении и другие более серьёзные осложнения. Для предупреждения таких нежелательных последствий мы рекомендуем давать пить по 2 глотка крепкого сладкого чая через каждый час гемодиализа. Такая процедура повышает безопас - ность диализа и позволяет пациенту самостоятельно покинуть стационар без потерь равно - весия или падений.

UDC 615.38:616.37

IMPROVEMENT OF PROCEDURE OFTHE HEMODIALYSIS FOR PATIENTS WITH THE ACHRESTIC DIABETES

Bykovskaja E.Yu., Zhukovskaya V.A., Zhukovskij Yu.G., Kuznetsova L.P., Nikitina E.R., Sochilina E.E.

Sechenov Institute of Evolutionary Physiology and Biochemistryof the Russian Academy of Sciences, St. Petersburg; e-mail: [e-mail]

Last years for the treatment of chronic nephritic insufficiency more and more widely began to use a hemodialysis. Automatic hemodialyzers are manufacture in many countries of the world. In station- ary conditions of the patient lay down on a special medical bed and through a fistula connect to he- modialyzer. Duration of a hemodialysis usually makes 4-5 hours, process is conducted continuously. Circulating blood of the patient in the device is insulated from a dialysis solution by a semi permeable membrane through micro pores which from the patient blood in a dialysis solution pass low-molecular substances-slags (urea, etc.) and low-molecular substances useful to an organism (glucose, etc.), but high-molecular substances (fibers, etc.) remain in blood. At patients, with an achrestic diabetes, after introduction of insulin by it, concentration of glucose in blood low, and in the course of a hemodi- alysis it becomes even less and can reach the bottom threshold. In such cases an abundant sweating occurs, faints come, balance losses at walking and at sitting and other more serious complications. For the prevention of such undesirable consequences we recommend to allow to drink on 2 drinks

104	Конгресс «БИОТЕХНОЛОГИЯ: СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ» 17-20 марта 2015

SECTION | | “BIOTECHNOLOGY AND MEDICINE”

of strong sweet tea in each hour of hemodialysis. Such procedure raises safety of a dialysis and allows the patient to leave independently a hospital lost-free balance or falling.

УДК 617-3

ВОССТАНОВИТЕЛЬНАЯ ТЕРАПИЯ АРТРОСКОПИИ КОЛЕННОГО СУСТАВА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГИМНАСТИЧЕСКИХ БРУСЬЕВ Быковская Е.Ю., Жуковская В.А., Жуковский Ю.Г., Кузнецова Л.П., Никитина Е.Р., Сочилина Е.Е.

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН Санкт-Петербург. E-mail: [e-mail]

Восстановительная терапия артроскопии коленного сустава с помощью параллельных брусьев, на которых дополнительно закреплено кресло.

Ключевые слова: артроскопия, коленный сустав, восстановительная терапия, параллельные брусья, закреплённое кресло

Причиной боли и дискомфорта в коленном суставе могут стать повреждения, изнашивание, слабость или возрастные изменения. Артроскопия является эффективным способом диагностики и определения лечения коленного сустава, позволяет вернуться к нормальному и активному образу жизни без особого дискомфорта.

Двигательная реабилитация после артроскопии коленного сустава может быть разделена на три этапа: восстановление контроля мышц ноги и отказ от костылей, восстановление двига - тельной функции колена и силы и возвращение к нормальной деятельности. Время, отведенное на каждый этап, зависит от конкретного пациента, его общего состояния и процесса реабили - тации после операции. В течение первого этапа упражнения в параллельных брусьях с опорой на руки помогают пациенту восстановить баланс и координацию и являются важной частью программы физиотерапии после артроскопии. Пациенты должны ходить с опорой на руки, пока у них не появится хороший контроль мускулатуры ноги, и они смогут переносить вес на колено без особого дискомфорта.

В связи с особенностями, обучение хождению должно проводиться строго индивидуально. Во время занятий боязнь падения является причиной развития сильного утомления, которое бывает непропорционально усилию. Усталость, возникающая во время занятий, приводит к вынужденнымостановкамдляпациента.Недостаткамипараллельныхбрусьевявляетсясложность перехода пациента от упражнений на брусьях к сиденью для отдыха: самостоятельно пройти от брусьев к сиденью для отдыха он не может и поэтому для пациента приходится оказывать

физическую помощь со стороны одного или двух физиотерапевтов (по его сопровождению или переносу на руках). Мы предлагаем использовать устройство, которое выполнено на основе параллельных бру- сьев, на которых дополнительно закреплено кресло, предназначенное для отдыха пациента в перерывах между циклами физиотерапии на брусьях. При использовании устройства пациент начинает выполнять на параллельных брусьях заданные упражнения в ходьбе с поддержкой за брусья, при необходимости отдыха пациент перемещается внутри брусьев к креслу-сиде-

нью, садиться в него и пристёгивается к нему страховочным ремнём. В отличие от известных устройств, предлагаемый способ позволяет намного облегчить переход пациента от упраж- нений на брусьях к сиденью (креслу) для отдыха, сохранить больше сил на тренировочные упражнения в ходьбе, повысить эффективность, безопасность и комфортность, а также умень-

Congress “BIOTECHNOLOGY: STATE OF THE ART AND PROSPECTS OF DEVELOPMENT” March 17-20, 2015	105

СЕКЦИЯ | | «БИОТЕХНОЛОГИЯ И МЕДИЦИНА»

шить трудоёмкость и сложность физиотерапии. Для проведения физиотерапевтических процедур с использованием предлагаемого комбинированного устройства необходим лишь один тренер-терапевт, а не более, как в способах аналогах. При этом безопасность для пациента не уменьшается, а возрастает (при выполнении простой страховки со стороны тренера, исключены случаи падения и ударов пациента об пол или о брусья). Пациент чувствует себя не только более безопасно, но и более комфортно, эффективность обучения и/или реабилитации возрас - тает, т.е. они достигаются в более короткие сроки (обычно в несколько раз, в зависимости от тяжести заболевания).

UDC 617-3

REGENERATIVE THERAPY OFARTHROSСOPIAAKNEE JOINT WITH USE OF GYMNASTIC BARS

Zhukovskaya V.A., Zhukovskiy Yu.G., Kuznetsova L.P., Nikitina E.R., Sochilina E.E., Bykovskaya E.Yu.

Sechenov Institute of Evolutionary physiology and biochemistry of RAS, St-Petersburg. E-mail: [e-mail]

Тhе regenerative therapy of the arthrosсopia a knee joint by means of parallel bars on which the armchair is in addition fixed.

Keywords: the arthrosсopia, a knee joint, the regenerative therapy, the parallel bars, the fixed armchair

Damages, wear process, weakness or age changes can become the pain and discomfort reason in a knee joint. The arthrosсopia is effective way of diagnostics and definition of treatment of a knee joint, allows to return to a normal and active way of life without special discomfort.

Impellent rehabilitation after the arthrosсopia a knee joint can be divided into three stages: restoration of the control of muscles of a foot and refusal of crutches, restoration of impellent function of a knee and force and returning to normal activity. Time which has been taken away on each stage, depends on the concrete patient, its general condition and process of rehabilitation after operation. During the first stage of exercise in parallel bars with a support on hands help the patient to restore balance and coordination and are the important part of the program of physiotherapy after the arthrosсopia. Patients should go with a support on hands while they will not have a good control of muscles of a foot, and they can transfer weight on a knee without special discomfort.

In connection with features, training to circulation should be spent strictly individually. During employment fear falling is the reason of development of strong exhaustion which happens is dispro- portionate to effort. The weariness arising during employment, leads to the compelled stops for the patient. Lacks of parallel bars is complexity of transition of the patient from exercises on bars to a seat for rest: Independently pass from bars to a seat for rest it cannot and consequently for the patient it is necessary to render the physical help from one or two physiatrists (on its support or carrying over

on hands).

We offer to use the device which is executed on the basis of parallel bars on which the armchair

intended for rest of the patient in breaks between cycles of physiotherapy on bars is in addition fixed.

At use of the device the patient starts to carry out on parallel bars the set exercises in walking with

support for bars, in need of rest the patient moves in bars to an armchair-seat, sits down in it and is fastened to it by a safety belt.

106	Конгресс «БИОТЕХНОЛОГИЯ: СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ» 17-20 марта 2015

SECTION | | “BIOTECHNOLOGY AND MEDICINE”

Unlike the known devices, the offered way allows to facilitate much more transition of the patient from exercises on bars to a seat (armchair) for rest, to keep more forces on training exercises in walking, to raise efficiency, safety and comfort, and also to reduce labour input and complexity of physiotherapy. One trainer-therapist is necessary for carrying out of physiotherapeutic procedures with use of the offered combined device, instead of more, as in ways analogues only. Thus safety for the patient does not decrease, and increases (at performance of the simple insurance from the trainer, cases of falling and blows of the patient about a floor or about bars) are excluded. The patient feels not only it is more safe, but also is more comfortable, the learning efficiency and-or rehabilitations increases, i.e. they are reached in shorter terms (usually several times, depending on weight of disease).

УДК 617.3:159.9

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ДЦП-ДЕТЕЙ ПУТЕМ УЛУЧШЕНИЯ ПСИХОЭМОЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ИХ РОДИТЕЛЕЙ И ВОСПИТАТЕЛЕЙ Быковская Е.Ю., Кузнецова Л.П., Никитина Е.Р., Сочилина Е.Е.

Институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М. Сеченова РАН,

Санкт-Петербург. E-mail: [e-mail]

Эффективность реабилитационных мероприятий по восстановлению ДЦП-ребёнка зависит не только от компенсаторных возможностей его организма, комплекса лечебных и педагоги - ческих мероприятий с участием специалистов, но и от точности выполнения рекомендаций и степени адекватности участия в этом процессе родителей или опекунов.

В последнее время существенно возрос уровень пассивной агрессии среди родственников таких детей. Воспитание в семье ДЦП-ребёнка провоцирует защитные, приспособительные перестройки поведения среди его окружения. Можно выделить несколько факторов, которые спо - собствуют развитию пассивно-агрессивного поведения: один из самых важных факторов – это степень тяжести заболевания ребенка, перспективы выздоровления которого туманны; не менее важный фактор уход из семьи отца или матери; а так же вынужденная потеря любимой работы; отчуждение друзей; сужение или полная потеря сферы личных интересов (хобби, чтения, заня - тий спортом, развлечений); компьютерная и другие виды зависимости. Пассивно-агрессивное поведение в своем развитии так же проходит несколько этапов и связано с приятием или неприятием ДЦП-ребенка.

Родители ДЦП-детей с негативным отношением к квалификации и авторитету врачей могут, некоторое время, скрывать свой гнев. Но возникает период, когда остальные – здоровые дети уже научились сидеть и ходить, а их ребенок нет, и становится очевидным их сильное отставание в психическом и двигательном развитии. Запас подсознательного гнева все более нарас-

тает, поскольку общение с другими родителями, имеющими и больных и здоровых детей, так и специалистами, активно участвующими в реабилитации ребенка, всегда сопровождается для них неприятными и раздражающими моментами. С течением времени у людей с пассивно-агрессивными чертами находятся причины для гне- ва, настоящие или воображаемые. Обычно подавлять свой гнев они могут не более двух лет, но затем гнев начинает находить подсознательные способы для своего выражения, не отдавая себе отчета в том, что делают. На смену вежливости приходит раздражительность, желание наказать всех тех, кто на протяжении всего периода жизни ребенка участвовал в его судьбе, лечении,

реабилитации, обучении. С такими людьми становится трудно общаться. В конце концов, они становятся настолько некоммуникабельными, что многие специалисты отказываются с ними работать, а это плохо сказывается на здоровье и развитии их детей.

Congress “BIOTECHNOLOGY: STATE OF THE ART AND PROSPECTS OF DEVELOPMENT” March 17-20, 2015	107

СЕКЦИЯ | | «БИОТЕХНОЛОГИЯ И МЕДИЦИНА»

Мы предлагаем дополнительно проводить в рамках «Онтогенетической системы формирования двигательных действий при детском церебральном параличе» комплекс мероприятий на улучшение психоэмоционального состояния родителей или опекунов ДЦП-детей, который включает в себя следующие этапы.

1.Исследование специфики мотивационно-потребностной сферы личности по мотивационной индукции Ж.Нюттена [1] и методике «20 ответов на вопрос «Кто Я?» М.Куна [2].

2.  Мероприятия по созданию Собственного «Круга удовольствий», которые включают лекции и практические занятия.

3.  Обучение (проведение чтений, бесед, лекций).

4.  Оздоровительно-физкультурные занятия, направленные на снятие эмоционального и мышечного напряжения, включающие в себя элементы танца, растяжки, йоги, аутотренинга, общения.

5.  Текущий (1 раз в три месяца) и итоговый (через год) контроль психоэмоционального состояния.

6.  При необходимости консультации специалистов: психологов, неврологов, терапевтов, психиатров и др..

Для исследования были отобраны 12 женщин (в возрасте от 23 до 38 лет) осуществляющих уход и воспитание ДЦП-детей (в возрасте от 5 до 36 месяцев). Группы были сформированы методом «парного дизайна» так, чтобы контрольная и экспериментальная группы были похожими по составу испытуемых. В каждой группе было по 6 женщин, имеющих одного ДЦП –ребен- ка. В контрольной и экспериментальной группах проводили индивидуальные занятия с ДЦПдетьми, применяли фиксационный массаж и онтогенетическую гимнастику.

Вэкспериментальной группе, дополнительно, предложили мамам участвовать в комплексе мероприятий по улучшению психоэмоционального состояния. Через две недели в экспериментальной группе: отмечалось улучшение настроения и состояния здоровья у 5 женщин (83,3%) и 6 детей (100%), желание заниматься с ребенком дома у 6 женщин (100%), двигательная активность повысилась у 6 детей (100%), положительно изменилось отношение к болезни ребенка

у6 женщин (100%).

Вконтрольной группе отмечалось улучшение настроения и состояния здоровья у 1 женщины (16,67%) и 4 детей (66,67%), желание заниматься с ребенком дома у 2 женщин (33,33%), двигательная активность повысилась у 4 детей (66,67%), положительно изменилось отношение к болезни ребенка у 2 женщин (33,33%).

Таким образом, предлагаемый нами комплекс мероприятий для родителей или опекунов ДЦП-детей не только способствует улучшению их психоэмоционального состояния (улучшает настроение и состояние психосоматического здоровья, положительно влияет на их отношение к болезни ребенка), но и сдерживает развитие агрессивного поведения. Способствует внедре-

нию, через родителя или опекуна, физических и других упражнений, массажа в обычный ре-

жим дня ДЦП-ребенка, улучшая комфортность его жизни и тем самым способствуя повышению эффективности лечения ДЦП-детей.

1.  Нюттен Ж. Мотивация, действие и перспектива будущего // Под ред. Д.А. Леонтьева. –

М.: Смысл, 2004. – 608 с.

2.  Кун М., Макпартленд Т. Эмпирические исследования установок личности на себя // Современная зарубежная социальная психология. Тексты. М.: Изд-во МГУ, 1984. С. 180-187.

108	Конгресс «БИОТЕХНОЛОГИЯ: СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ» 17-20 марта 2015