Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Загальна біотехнологія / ОТРИМАННЯ ШТАМІВ BREVIBACTERIUM.doc
Скачиваний:
50
Добавлен:
13.12.2017
Размер:
6.88 Mб
Скачать

Вплив ростових факторів на синтез треоніну

суміші

Концентрація у суміші внесених речовин, г/дм3

Концентрація треоніну в середовищі, г/дм3

Пролін

Тіамін HCl,

110-3

Біотин,

110-6

Дріжджовий екстракт

1

0,4

1,0

100

0,5

8,100,09

2

0,8

2,0

200

1,0

11,200,13

3

1,2

3,0

300

1,5

10,000,12

4

1,6

4,0

400

2,0

10,000,10

5

2,0

5,0

500

2,5

9,800,09

Таблиця 5.2

Синтез треоніну на середовищі з різним вмістом амінокислот

№ суміші

Концентрація г/дм3

Біомаса, г/дм3

Концентрація треоніну в середовищі, г/дм3

Ізолейцину

Метіоніну

1

0,1

0,1

25,30,5

10,20,3

2

0,2

0,2

25,80,5

10,20,1

3

0,3

0,3

26,10,5

10,40,1

4

0,4

0,4

28,30,6

11,90,2

5

0,5

0,5

35,80,6

9,90,1

Було знайдено оптимальні концентрації ростових речовин (г/дм3): проліну – 0,8; тіаміну – 0,002; біотину – 2,0.10-4; дріжджового екстракту – 1,0; суміші ізолейцину та метіоніну (0,4 г/дм3 кожної амінокислоти).

Досліджено вплив альтернативних джерел вуглецю (бурякової меляси, молочної сироватки, синтетичного середовища) на синтез треоніну. Вищі показники синтезу були на комплексному мелясному середовищі в порівнянні з синтетичним та сироватковим. Процес культивування отриманого мутантного штаму за умов визначених оптимальних параметрів проводили на мелясному середовищі з додаванням ростових речовин (табл. 5.3).

Таблиця 5.3

Синтез треоніну штамом b. Flavum iмв в-7446

Продуценти

Показники культуральної рідини

рН

ОГ (1:10), λ440

Концентрація сахарози, %

Концентрація треоніну, г/дм3

Конверсія цукру в цільову амінокислоту, %

Вихідне середовище (без продуценту)

7,9±0,1

0,2±0,1

8,2±0,5

0,9±0,1

-

B. flavum ТН 7

6,6±0,1

1,1±0,1

5,4±0,2

2,0±0,2

3,92±0,1

B. flavum IМВ В-7446

6,7±0,1

1,4±0,1

1,4±0,3

11,9±0,3

16,2±0,2

Вихідний штам мав низький рівень синтезу треоніну на мелясному середовищі і в незначній кількості споживав цукор (конверсія – 3,92%) (табл. 5.3). Мутантний штам при культивуванні продукував у 6 разів більше треоніну на мелясних середовищах ніж вихідний штам та інтенсивно споживав цукор (конверсія – 16,2 %).

Проведено оптимізацію середовища для культивування продуцента та визначено оптимальні параметри культивування (температура, рН, кількість розчиненого кисню, кількість внесеного інокуляту, ростові речовини, різні джерела вуглецю). В оптимізованих умовах культивування мутантний штам продукував треонін у кількості 11,9 г/дм3.

Таким чином, можна зробити висновок, що підвищення накопичення лізину та треоніну штамами-продуцентами (Brevibacterium sp. IМВ В-7447 та B. flavum IМВ В-7446 (C. glutamicum), відповідно), пов’язане з дією УФ опромінення на штами.

Основні результати даного розділу опубліковані в наукових роботах [184, 189].