Контрольні запитання

• Роль мікроорганізмів у перетворенні вуглецевмісних речовин у природі.

• Розщеплення целюлози мікроорганізмами. Аеробні бактерії, що розщеплюють клітковину.

• Отримання міксобактерій за методом ґрунтових пластинок.

Тема 10. Бактерії, які розщеплюють клітковину в анаеробних умовах

В анаеробних умовах целюлоза розщеплюється переважно мезофільними і термофільними бактеріями роду Сlostridium з утворенням різних кінцевих продуктів: етилового спирту, оцтової, молочної, мурашиної кислоти, вуглекислого газу та водню. Анаеробні целюлозолітичні бактерії можна виявити у ґрунті, компості, стічних водах, вони є складовою частиною мікробіоценозу рубця жуйних тварин.

ЛАБОРАТОРНА РОБОТА

Мета роботи: виявити і вивчити анаеробні форми мезофільних і термофільних мікроорганізмів, які розщеплюють клітковину.

Завдання

1. Отримати накопичувальну культуру анаеробних бактерій, що розщеплюють целюлозу.

2. Описати характер росту накопичувальної культури анаеробних бактерій та вивчити їх морфологію.

Матеріали та обладнання

1. Мікроскоп МБІ-1, предметні скельця, імерсійна олія, бактеріологічна петля, смужки фільтрувального паперу розміром 5х1 см, ваги.

2. Стерильні пробірки і піпетки на 1 мл, зразки ґрунту.

3. Середовище Імшенецького (г/л): фосфат амонію – 1,5, однозаміщений фосфат калію – 0,5, двозаміщений фосфат калію – 0,5, сульфат магнію – 0,4, хлорид натрію – 0,1, сульфат мангану та сульфат заліза – сліди; пептон – 5,0, вода з водопроводу.

4. Фуксин, карбонат кальцію.

Хід роботи

Для отримання накопичувальних культур мезофільних і термофільних бактерій, що розщеплюють целюлозу, використовують середовище Імшенецького.

Середовище розливають у високі пробірки на 2/3 їх висоти. У кожну пробірку вносять 4–5 смужок фільтрувального паперу розміром 5х1 см і карбонат кальцію по 0,5 г для мезофілів і по 1 г для термофілів.

Середовище стерилізують за 1 атм 30 хв. Посіви здійснюють з ґрунтової витяжки по 1 мл. Пробірки з посівами для мезофілів витримують за 30°С 18–20 діб, середовище для термофілів – за 60°С 10–14 діб. Основною ознакою розвитку бактерій є характерна зміна кольору фільтрувального паперу. Він злегка жовтіє, покривається слизом і поступово перетворюється на пухку масу, яка складається з окремих волокон. Середовище мутніє, спостерігається газовиділення. Матеріал для препаратів відбирають з волокнами целюлози. Визначають особливості морфології клітин, звертають увагу на рухомість бактерій, наявність і тип спороутворення. Результати спостережень заносять до табл.10.

Таблиця 10

Ознаки розвитку бактерій, які розщеплюють клітковину в анаеробних умовах

Температура культивування	Строки змін, що спостерігаються, доба	Розщеплення клітковини	Помутніння середовища	Газовиділення
30°С 60°С

Контрольні запитання

• Цикл сполук вуглецю у природі.

• Розщеплення целюлози мікроорганізмами. Анаеробні мезофільні і термофільні бактерії, що розщеплюють клітковину.