- •7.092901 «Промислова біотехнологія» та
- •Культури клітин людини та тварин
- •Клітина
- •Клітинна активність
- •Поділ клітини
- •Типи клітин та тканин
- •Техніка, що використовується для первинного культивування клітин та тканин
- •Клітина та зовнішнє середовище
- •Температура
- •Осмотичний тиск
- •Концентрація водневих іонів
- •Інші неорганічні речовини
- •Необхідні метаболіти
- •Додаткові метаболіти
- •Природні середовища для культур клітин та тканин
- •Тканинні екстракти
- •Сироватка
- •Запобігання інфікування культур
- •Попередження інфікування культур
- •Фізіологічний стан культивованих клітин
- •Адгезія клітин до субстрату і біоматрикс
- •Диференцировка клітин
- •Вибір матеріалу
- •Кінетика росту клітин
- •Старіння клітинних культур
- •Крупномасштабне культивування
- •Адаптація до суспензійної культури
- •Широкомасштабне культивування суспензійних культур
- •Перехід від скляних посудин до посудин з нержавіючої сталі;
- •Більш складна система контролю середовища у зв’язку зі збільшеними потребами до переносу маси.
- •Клітини нерухомі, середовище перемішується (наприклад, реактор зі скляним намистом);
- •Гетерогенне перемішування (наприклад, реактор зі стопою пластин);
- •Гомогенне перемішування (наприклад, мікроносії).
- •Фактори, що визначають процес нарощування клітин
- •Типи культуральних систем
- •Проточні культури
- •Вибір між непроточною і проточною культурами
- •Дифузія крізь мембрани
- •Перфузія середовища
- •Потрапляння з газової фази
- •Нарощування культур клітин
- •Редокс-потенціал
- •Збереження і оцінка якості клітин
- •Створення банку клітинних ліній
- •Заморожування клітин і оцінка виходу
- •Обладнання
- •Підготовка до заморожування
- •Розморожування і оцінка виходу клітин
- •Проліферація у масовій культурі
- •Визначення якості клітинних ліній
- •Культури тканин та клітин вищих рослин
- •Контрольні запитання
- •Методи одержання первинних культур. Техніка, що використовується для первинного культивування клітин та тканин.
- •Збереження і оцінка якості клітин. Банки культур клітин. Запас для розсіву і запас для розподілу.
- •Література Основна
- •Додаткова
Типи клітин та тканин
Велике число різних типів клітин в організмі відрізняються за морфологічними та метаболічними ознаками. В тканинних культурах більша частина цих відмінностей зникає, але при цьому майже завжди суттєві ознаки залишаються.
Загалом всі клітини організму походять від однієї клітини – заплідненої яйцеклітини. В ранній стадії розвитку зародковий диск складається з трьох типів клітин – ектодерми, мезодерми та ендодерми. Мезодерма на дуже ранній стадії диференціюється, частина її стає мезенхімою. З неї розвиваються усі клітини дорослої тварини.
З ектодерми розвивається весь епітелій, що вкриває зовнішню поверхню тіла, ротову порожнину та носові шляхи. Практично вся нервова система також ектодермального походження. З цих же джерел виникають гладенькі м’язи радужної оболонки ока і більша частина інших дрібних структур, таких, як передня доля гіпофізу.
З мезодерми розвиваються усі м’язи тіла. Після диференціації і утворення вільної мезенхіми з неї розвиваються всі з’єднувальні тканини, кров та ендотеліальний покрів порожнин тіла.
Ендодерма дає розвиток всій епітеліальній оболонці шлунково-кишкового тракту, дихальним шляхам та нижній частині сечостатевих шляхів там, де вони зустрічаються з клітинами ектодермальної природи. З ендодерми розвиваються також паренхіматозні клітини печінки та підшлункової залози.
Тканини тварин зазвичай підрозділяються на такі п’ять груп: 1) епітеліальна тканина; 2) з’єднувальна тканина; 3) м’язова тканина; 4) нервова тканина; 5) кров і лімфа.
Епітеліальні тканини – це ті тканини, що утворюють шари клітин укриваючи органи та внутрішню поверхню порожнин. Таким чином, шкіра та покрови харчового тракту і легенів є типовими епітеліальними тканинами. Вони класифікуються у відповідності зі своєю морфологією як плаский, кубічний, циліндричний, мерцальний і секреторний епітелій. Злоякісні пухлини, що виникають з цих тканин, як правило називають карциномами. Якщо пухлина зберігає деякі вихідні структурні ознаки, вона може отримати більш точне найменування, наприклад аденокарцинома або епітеліома.
Головна функція з’єднувальних тканин може бути охарактеризована, як структурна. До таких тканин відносяться кістки, фіброзна тканина, хрящі, сухожилля. Вони звичайно характеризуються утворенням специфічної міжклітинної речовини. Злоякісні пухлини, що виникають з цих тканин, називаються саркомами і вони також можуть мати багато специфічних найменувань, які звичайно включають слово “саркома”.
До м’язевої тканини відносяться звичайні скелетні м’язи, гладенькі м’язи, наприклад кишечнику, і серцевий м’яз. Пухлини, виникаючі з цих тканин, зустрічаються рідко і класифікуються як саркоми.
Нервові тканини включають головний мозок, спинний мозок, периферійні нерви і нервові вузли (ганглії). Ці тканини надзвичайно складні за своєю організацією і, окрім нервових клітин, мають багато опорних клітин, що називаються клітинами глії, наприклад астроглія, мікроглія, олігодендроглія. Злоякісний ріст рідко відмічається у власне нервових клітин (виключення складають діти); утворення часто розвиваються з клітин глії і у відповідності з природою цих клітин називаються, наприклад, гліомою, або астроцитомою.
Тканини крові і лімфи включають усі клітини периферичної крові та їх представників у кістковому мозку і лімфатичних вузлах. Злоякісний ріст цих тканин звичайно називають лейкемією. У порівняно рідких випадках виникають саркоми.
Ретикуло-ендотеліальна система часто розглядається разом з кров’ю. Ця система не всіма спеціалістами вважається тканиною, але являє особливий інтерес для культури тканин, оскільки клітини ретикуло-ендотеліальної системи зустрічаються у кожному органі і відтворюються в культурі тканин. Характерним для всіх клітин цієї системи є те, що вони здатні до міграції і володіють фагоцитарною активністю, тобто здатні поглинати часточки чужорідних речовин.