Лабораторная работа №8

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИТАМИНА Е

Цель работы: ознакомиться с количественным определением витамина Е фотометрическим методом.

Взаимодействие α-токоферола с концентри­рованной азотной кислотой приводит к окрашиванию реакционной смеси в красный цвет. Это обусловлено тем, что продукт окисления α-токоферола имеет хиноидную структуру. При взаимодействии с хлорным железом (III) α-токоферол окисляется до α-токоферилхинона — соединения, окрашенного в красный цвет.

Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации витамина Е и может быть определена с помощью фотоэлектроколориметра.

Исследуемый материал: 0,1% спиртовый раствор витамина Е.

Реактивы: 70 % раствор азотной кислоты, абсолютный этиловый спирт.

Оборудование: штатив с пробирками, колбы, пипетки, водяная баня, фотоэлектроколориметр.

Ход работы. В две пробирки наливают по 2,5 мл спиртового раствора витамина Е, добавляют по 0,5 мл раствора азотной кисло­ты и выдерживают в кипящей водяной бане 3 мин. Затем пробирки охлаждают и ставят в темное место на 15 мин. Объем жидкости в каждой пробирке доводят абсолютным этанолом до 5 мл, переме­шивают и фотометрируют при длине волны 470 нм (синий светофильтр).

Указания к составлению отчета.

Концентрацию витамина Е в исследуемом растворе определяют по калибровочному графику, где каждому значению найденной экстинкции соответствует определенное содержание витамина Е в 1 мл раствора. Для построения калибровочного графика используют спиртовый препарат, содержащий в 1 мл 100 мг α-токоферола. С этой целью 0,5 мл такого препарата растворяют абсолютным этанолом в колбе емкостью 50 мл (в 1 мл будет содержаться 1 мг препарата). Отсюда в четыре пробирки наливают по 0,5, 1,0, 1,5, 2,0 мл спиртового раствора и доводят общий объем жидкости абсолютным спиртом до 2,5 мл в каждой пробирке.

На основании данных оптической плотности растворов, содер­жащих разное количество витамина Е, строят калибровочный гра­фик. На оси ординат наносят значение экстинкции, на ось абсцисс — соответствующие концентрации витамина Е в 1 мл.

Контрольные вопросы к разделу Витамины:

1. Какие вещества называют витаминами?

2. Установите связь ферментов и витаминов.

3.Назовите основные типы классификации витаминов.

4.Lactobacillus cacei – представители семейства бактерий, используемых для получения таких продуктов брожения, как йогурт, квашеная капуста и соленья, не способны синтезировать рибофлавин. Характерное свойство этих бактерий заключается в том, что они получают энергию за счет расщепления глюкозы до молочной кислоты (рК′ 3,5). Какой метод качественного определения рибофлавина вы предложили бы, исходя из этой информации?

5.Заполните таблицу:

№ п/п	Название витамина	Название кофермен-та	Активная форма кофермен-та	Тип катализи-руемой реакции	Пример авитами-ноза	Источник витамина	В каком обмене участвует

6.Дайте полную характеристику витамина С. Опишите химическую структуру, приведите структурную формулу, укажите биологическую роль витамина в организме.

7. Каковы принципы количественного определения витамина С?

8. Производители пищевых продуктов, богатых витаминами, утверждают, в частности, что витамины, получаемые из природных источников, полезнее для здоровья, чем синтезированные искусственным путем. Считается, что чистая L-аскорбиновая кислота из плодов шиповника полезнее L-аскорбиновой кислоты, синтезированной на химическом заводе. Различаются ли витамины из этих двух источников? Может ли организм различать витамины из разных источников?

9. Дайте полную характеристику витаминов Р, В, Е – опишите химические структуры, приведите структурные формулы, укажите биологическую роль витаминов в организме.

10. Каковы принципы количественного определения витаминов Р, В, Е?