Внимание!!! ничего не нажимайте!!!

Потому что мы ещё не ввели пробу в хроматограф.

Ввод пробы происходит в два этапа. Сначала мы вводим пробу в «петлю», встроенную в поворотный кран хроматографа (6 на рис. 1). Петля имеет определенный объем и нам не нужно самим отмерять объем вводимой пробы, необходимо лишь полностью заполнить петлю. Объем шприца, которым мы будем вводить пробу в петлю — 50 мкл, он больше объема петли и излишек пробы выльется в специальный сосуд. Необходимо лишь следить, чтобы в шприце не было пузырьков воздуха. Это требует некоторой сноровки, но преподаватель покажет вам, как это правильно сделать. Перед набором пробы шприц необходимо не менее трех раз промыть бидистиллированной водой и анализируемой пробой.

После заполнения «петли» поворотный кран необходимо повернуть быстро, но плавно вниз до упора (силу не прикладывать!!!).

Хроматограф начнёт анализ.

В окне регистрации данных после запуска идет запись хроматограммы. Ее можно масштабировать, выделяя при нажатой левой кнопки мыши, интересующие участки. Вернуться к начальной картинке и масштабу можно, нажав на правую кнопку мыши и выбрав «Начальный масштаб» в появившемся меню (Рис. 10):

Можно масштабировать, нажимая на + или – справа от окна записи хроматограммы , что увеличивает или уменьшает масштаб.

Рис. 11

Внимательно рассмотрите окно рис. 11. Надписи Time (время) и Inten. (интесивность) показывают время выхода и интенсивность того хроматографического пика (или базовой линии), на который вы наведёте курсор. По времени выхода вы будете определять, какое вещество выходит из хроматографической колонки, а по интенсивности — его количество.

Вы готовы к выполнению задачи студенческого практикума по ионной хроматографии.

На хроматографе можно определять катионы и анионы. Но хроматографические колонки для этих анализов и подвижные фазы разные. И потому перед началом выполнения задачи вместе с преподавателем откройте термостат и убедитесь, что колонка та, которая нужна для вашего определения.

Определение анионов. Определение нитратов и нитритов в плодах, овощах и плодоовощных товарах.

Определение анионов выполняют на хроматографической колонке и IC-A1S с предколонкой IC-GA1S (предколонка — это колонка небольшой длины, служащая для защиты основной колонки).

Подвижная фаза, используемая для определения анионов — раствор 410.4мг/л фталевой кислоты и 290.74 мг/л трис(гидроксиметил)аминометана. Все растворы готовят на бидистиллированной воде.

Для приготовления подвижной фазы указанные навески взвешивают на аналитических весах в бюксах или стаканчиках для взвешивания, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1литр и раствор доводят до метки бидистиллированной водой. Колбу помещают в ультразвуковую баню до растворения веществ и затем раствор фильтруют через мембранный фильтр под вакуумом (под наблюдением преподавателя).

При современных интенсивных методах земледелия использование азотных и фосфорных удобрений неизбежно. Так как растения очень быстро откликаются на внесение в почву азотных удобрений, возникает соблазн повысить урожайность и, следовательно, доход производителя, за счёт внесения излишних количеств удобрений. Однако повышенное содержание азотных удобрений в плодоовощной продукции может быть и результатом их неправильного применения — отсутствием должного баланса между азотными, фосфорными и калийными удобрениями. Плоды и овощи, содержащие излишки азотных удобрений (чаще всего, нитратов) вредны — кроме того, что нитраты вредны сами по себе, в организме человека они превращаются в токсичные нитриты и канцерогенные нитрозамины. К тому же плодоовощная продукция с повышенным содержанием нитратов не может долго храниться.

Поэтому содержание нитратов и нитритов в плодоовощной продукции не должно превышать установленных «Едиными требованиями» уровней.

Ионная жидкостная хроматография позволяет определять в одной пробе в течение 15 минут нитраты, нитриты, хлориды, бромиды, сульфаты, фосфаты и фториды.

При определении анионов в маринованных овощах пробоподготовка минимальна — между рассолом и овощами существует равновесие и потому перед вводом пробы в хроматограф мы должны только отфильтровать маринад.

При определении анионов в плодах и овощах их необходимо измельчить, отжать сок и профильтровать его. Содержащиеся в выжимках анионы необходимо извлечь экстракцией бидистиллированной водой. Так как время лабораторной работы ограничено, мы, для сокращения времени пробоподготовки, сделаем приемлемое допущение — определим анионы в соке и допустим, что это равновесное содержание, которое можно отнести ко всей пробе.

Так как любой анализ начинается с определения параметров градуировочной функции, сначала необходимо приготовить серию градуировочных растворов. Для построения градуировки необходимо минимум три точки. Время анализа — 15 минут. Для нахождения градуировочной функции необходимо использовать ГСО (государственные стандартные образцы). В нашем случае это немецкий СО, содержащий смесь анионов (нитраты, нитриты, хлориды, бромиды, сульфаты, фосфаты и фториды). Для определения времен выхода нитратов и нитритов мы должны приготовить растворы, содержащие только нитраты и только нитриты. Так как это предварительные данные, для приготовления растворов можно использовать реактивы — нитрит калия и нитрат калия.

Концентрация этих растворов  10мг/л (по нитрат- и нитрит-иону).