Иммуноферментный анализ (ИФА)

Принцип метода следующий: антиген фиксируется на твердофазном носителе (сенсибилизация твердофазного носителя), после чего инкубируется с испытуемой сывороткой. Затем следует инкубация с мечеными ферментами антителами к иммуноглобулинам человека, поли- и моноклональным. Взаимодействие фермента с субстратом дает цветную реакцию, интенсивность которой зависит от количества связанных сывороточных антител. Тест-ловушка, использующий в качестве антигена очищенные патогенные трепонемы.

Диагностика рвс

(Приказ №291 от 30.07.2001г.)

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Заключается в обработке взвеси убитых патогенных трепонем, разведенный исследуемой сывороткой и меченым флюоресцином античеловеческими иммуноглобулинами.

Диагностика РВС.

Модификации РИФ: FTA - 200

Разведение исследуемой сыворотки в 200 раз

Диагностика РВС.

РИФ-абс

Для элиминации антител используется сорбент, антигеном служат цельные клетки патогенных трепонем.

Диагностика РВС.

19S(IgM)FTA-ABC

Во второй фазе реакции используются меченые флюоресцином антитела к IgM человека с выделением 19S фракции.

Как подтверждающий тест при диагностике РВС.

IgM – (Captia syphilis-M)

Тест для определения сывороточных IgM. Твердофазный носитель сенсибилизируется антителами к IgM человека. В качестве антигена используются очищенные патогенные трепонемы, которые обрабатываются моноклональными антителами к Tr. Pallidum.

Диагностика РВС.

IgM ELISA

• тест более чувствителен, чем 19S (IgM) FTA-ABC;

• антитела против IgM определяются в сыворотке новорожденного при условии, что в его тканях находятся бледные трепонемы;

• IgM-антитела выявляются в организме больного уже через две недели после инфицирования;

• антитела не проникают через плаценту от матери к плоду;

• образование специфических IgM-антител в крови ребенка указывает на наличие инфекции у новорожденного.

IgG(IgM) – тест-ловушка

Используются в качестве антигена очищенные патогенные трепонемы.

Применяется для ранней диагностики РВС.

Метод иммуноблотинга для определения IgG или IgM

Tr. Pallidum подвергается электрофорезу, происходит разделение белковых иммунодетерминант и обработка разделенных «точек» исследуемой сывороткой и антигенами к IgG или IgM.

Диагностический тест для РВС.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Метод ПЦР включает в себя три основных стадии:

1. расплетение спирали ДНК и расхождение нитей (денатурация);

2. присоединение праймера;

3. достраивание цепи дочерней нити и выявление специфической ДНК.

Диагностика РВС.

*Поражения нервной системы при ранних и поздних формах сифилиса

Поздний нейросифилис

Ранний нейросифилис

Поражения мезенхимы (мозговых оболочек и

сосудов)

Поражения мозговой паренхимы (нервных клеток, нервных волокон и глии)

Скрытый (латентный) менингит

Поздний скрытый

менингит

Поздний диффузный менинговаскулярный сифилис

Острый

генерализованный

менингит

Васкулярный сифилис

Подострый базальный менингит

Прогрессивный паралич

Сифилитическая

гидроцефалия

Спинная сухотка (табес)

Табопаралич

Ранний

менинговаскулярный сифилис

Гумма мозга

Подразделение нейросифилиса на ранние и поздние формы условно. К ранним относятся случаи развития сифилиса нервной системы до 5 лет от начала заболевания. Однако возможны случаи ранних форм нейросифилиса спустя 5 лет с момента заболевания и, наоборот, развития спинной сухотки и прогрессивного паралича в относительно раннем периоде. В основе обеих форм лежит единый динамический процесс. Нередко наблюдаются переходные и смешанные формы.