- •На правах рукописи
- •Глава 2. Материалы и методы исследования………………………………….58
- •Глава 3. Результаты исследования……………………………………………...62
- •Глава 4. Обсуждение результатов……………………………………………….88
- •Список сокращений
- •Введение
- •Глава 1. Обзор литературы
- •1.1. Изменения поведения как проявление старения мозга
- •1.1.1. Изменения поведения в онтогенезе
- •1.1.2. Изменения поведения при физиологическом старении и нейродегенеративных расстройствах
- •1.2. Возможные механизмы возрастных изменений
- •1.3. Окислительный стресс и старение мозга
- •1.3.1.Роль активных форм кислорода в физиологических процессах
- •1.3.2. Окислительный стресс в механизмах старения и патогенезе связанных с ним нейродегенеративных заболеваний
- •1.4. Антиоксиданты как геропротекторы
- •1.4.1. Адресованные в митохондрии антиоксиданты -
- •1.5. Крысы oxys – модель преждевременного старения и
- •Заключение
- •Глава 2. Материалы и методы исследования
- •2.1.Животные и методы воздействия на них
- •2.1.1. Оценка возрастных изменений поведения крыс oxys и Вистар
- •2.1.2. Магнитно-резонансная томография
- •2.1.3. Офтальмологические осмотры
- •2.1.4. Влияние антиоксидантов на поведение
- •2.2. Статистический анализ
- •Глава 3. Результаты исследования
- •3.1. Изменения поведения крыс oxys и Вистар с возрастом
- •3.1.1. Тест «открытое поле»
- •3.1.2. Приподнятый крестообразный лабиринт
- •3.1.3. Водный лабиринт Морриса
- •3.2. Поведение крыс oxys и развитие катаракты и ретинопатии
- •3.3. Магнитно-резонансная томография мозга
- •3.4. Влияние антиоксидантов на поведение крыс oxys и Вистар
- •3.4.1. Влияние антиоксидантов на поведение
- •3.4.2. Влияние длительного приёма SkQ1 на поведение крыс oxys и Вистар
- •3.4.3. Влияние SkQ1 на поведение годовалых крыс oxys и Вистар
- •Глава 4. Обсуждение результатов
- •Список литературы
3.1.1. Тест «открытое поле»
Согласно результатам факторного ANOVA анализа, в тесте «открытое поле» поведение крыс обеих линий с возрастом менялось: с его увеличением уменьшалось количество пересеченных квадратов (F2,152=53, p<0,00) и вертикальных стоек (F2,152=13, p<0,00), указывая на снижение двигательной и исследовательской активности (табл. 1). Генотип влиял на горизонтальную и вертикальную активность животных (F1,152=56, p<0,00 и F1,152=20, p<0,00, соответственно), которая была меньше у крыс OXYS. Факторы «возраст» и «генотип» взаимодействовали, что было обусловлено межлинейными различиями возрастных изменений горизонтальной (F2,152=12, p<0,00) и вертикальной (F2,152=4, p<0,01) активности. Так, к возрасту 3 мес. горизонтальная активность у крыс OXYS становилась на 77% меньше, чем у месячных (p<0,05), в то время как у крыс Вистар за этот период она не менялась и только к 12 мес. снижалась вдвое (p<0,05). В результате, если в возрасте 1 мес. межлинейные различия отсутствовали, то в 3 и 12 мес. этот показатель у крыс OXYS был на 75% и 66%, меньше, чем у крыс Вистар, что указывает на более высокий темп снижения двигательной активности крыс OXYS с возрастом. Вертикальная активность у крыс OXYS в возрасте 3 и 12 мес. была на 68% ниже, чем в 1 мес. (p<0,05), у крыс Вистар с возрастом достоверно не менялась, поэтому исследовательская активность крыс OXYS уже в возрасте 3 мес. была снижена по сравнению с крысами Вистар.
Таблица 1
Показатели возрастных изменений поведения
крыс OXYS и Вистар в тесте «открытое поле»
Возраст (мес.) |
Вистар |
OXYS | ||||
1(n=20) |
3(n=30) |
12(n=26) |
1(n=20) |
3(n=30) |
12(n=26) | |
Латентный период выхода в центр, сек. |
201±21,4 |
228±14,9 |
241±16,6 |
259±15,8# |
291±6,6# |
268±13,7 |
Пересеченные квадраты, n |
133±14,5 |
108±8,9 |
60±5,2^* |
117±12,4 |
27±3,05#* |
20±3,4#^ |
Вертикальные стойки, n |
11,2±1,4 |
11,3±0,9 |
8,6±0,7 |
10,9±1,6 |
3,5±0,4# * |
3,5±0,5# ^ |
Дефекации, n |
2,2±0,3 |
2,3±0,3 |
2,3±0,2 |
3,4±0,5 |
2,4±0,3 |
3,1±0,4 |
Груминг, n |
2,9±0,4 |
3,4±0,3 |
4,3±0,3^ |
3,4±0,5 |
3,9±0,5 |
3,6±0,3 |
Примечание: * - p<0,05 по сравнению с предыдущим возрастом, ^ - p<0,05 по сравнению с 1 мес. крысами одной линии, # - p<0,05 по сравнению с крысами Вистар одного возраста.
Показатели тревожности в тесте «открытое поле»: латентный период выхода в центр и количество дефекаций – зависели только от генотипа животных и были больше у крыс OXYS (F1,152=14, p<0,00 и F2,152=5, p<0,02, соответственно).
Количество груминговых реакций – показатель неспецифического поведения животных в установке. С одной стороны, его традиционно рассматривают как показатель уровня тревожности или стресса. С другой стороны, он может становиться, в зависимости от характера, и показателем комфортного поведения [Aguilar R. et al., 2002; Kalueff A.V., Tuohimaa P., 2004]. Количество груминговых реакций не зависело ни от генотипа, ни от возраста (p>0,05).
Роль груминга в поведении животных в условиях эмоционального стресса, реакции на новизну или тревожности до сих пор крайне неясна. Однако, несмотря на отнесение груминга к довольно «безликому» неспецифическому поведению, он представляет собой, достаточно автономный поведенческий показатель, который может быть специфически активирован в определенных условиях опытов, иногда на фоне отсутствия каких-либо других поведенческих эффектов.