3.4.3. Влияние SkQ1 на поведение годовалых крыс oxys и Вистар

Если предыдущий раздел работы был посвящен исследованию эффективности профилактического приёма антиоксиданта, то в настоящем разделе работы мы оценивали влияние SkQ1 на поведение годовалых крыс Вистар и OXYS с уже выраженными возрастными изменениями поведения. Животные получали SkQ1 с возраста 12 мес. с кормом по 250 нмоль/кг массы тела в день. Тестирование поведения было начато на фоне приёма препарата в возрасте 14 мес. Контролем служили одновозрастные интактные животные, а также интактные молодые крысы Вистар и OXYS в возрасте 3 мес.

В тесте «открытое поле» к возрасту 14 мес. двигательная и исследовательская активность животных закономерно снижалась: количество пересеченных квадратов (F_1,26=46, p<0,00) и вертикальных стоек (F_1,26=55, p<0,00) у крыс OXYS и Вистар было меньше, чем в 3 мес. (рис. 14а, б). Генотип влиял на горизонтальную (F_1,30=8, p<0,004 и F_1,56=96, p<0,00, соответственно) и вертикальную активность (F_1,30=51, p<0,00 и F_1,56=81, p<0,00, соответственно), которая была значительно ниже у крыс OXYS. Латентный период выхода в центр «открытого поля» зависел от возраста (F_1,48=6, p=0,01), и факторы «возраст» и «генотип» взаимодействовали (F_1,48=8, p=0,01): у молодых крыс OXYS показатель был достоверно выше, а, следовательно, и тревожность, чем у крыс Вистар.

SkQ1 влиял на горизонтальную активность животных (F_1,56=5, p<0,03): значительно увеличил количество пересеченных квадратов у крыс OXYS (p<0,03), его эффект у крыс Вистар был выражен на уровне тенденции (рис.14а). Препарат влиял и на вертикальную активность 14-месячных животных (F_1,56=7, p<0,01): увеличил количество вертикальных стоек у крыс OXYS (p<0,001) (рис.14б). В результате между 3-х месячными и принимавшими SkQ1 14-месячными животными не было достоверных различий, однако различия между крысами Вистар и OXYS сохранялись. На латентный период выхода в центр «открытого поля» влияли факторы «препарат» (F_1,56=6, p<0,02) и генотип (F_1,56=14, p<0,00), при этом факторы взаимодействовали (F_1,56=5, p<0,02). Это было обусловлено тем, что, согласно post hoc сравнениям, SkQ1 снизил показатель у крыс Вистар (p=0,002) и не влиял на уровень тревожности крыс OXYS.

Рис. 14. Влияние 2-х месячного приема SkQ1 (250 нмоль/кг) с возраста 12 мес. на горизонтальную (а) и вертикальную (б) активность крыс Вистар и ОХYS и сравнение с 3-х месячными животными в тесте «открытое поле».

# - p<0,05 по сравнению с крысами Вистар одного возраста, ^ - p<0,05 по сравнению с 3 мес. крысами одной линии. * - эффект препарата (p<0,05).

В приподнятом крестообразном лабиринте в возрасте 14 мес. крысы Вистар и OXYS значительно меньше проводили времени в открытых рукавах (p<0,00 и p<0,02, соответственно), чем в 3 мес., а в закрытых рукавах – больше (p<0,01 и p<0,00, соответственно), что свидетельствует об увеличении уровня тревожности животных с возрастом. К возрасту 14 мес. количество переходов в закрытые рукава снижалось у крыс Вистар, оставаясь существенно выше, чем у крыс OXYS (F_1,56=6, p<0,02).

Прием SkQ1 существенно снизил тревожность крыс обеих линий: количество выходов в открытые рукава (F_1,56=54, p<0,00) у крыс OXYS и Вистар увеличилось в 32,2 и 9,2 раза, соответственно, а время, проведенное в них (F_1,56=33, p<0,00) в 5,4 и 23 раза, соответственно (рис.15а, б). Поэтому время, проведенное в закрытых рукавах (F_1,56=20, p<0,00), соответственно, уменьшалась. Однако количество переходов в закрытые рукава, которое было меньше у контрольных крыс OXYS, под влиянием SkQ1 выросло (F_1,56=8, p<0,005) до уровня молодых животных.

SkQ1 увеличил и такой компонент исследовательского поведения, как количество выглядываний (F_1,56=9, p<0,003): у крыс OXYS оно возросло более чем вдвое, но оставалось меньше, чем у крыс Вистар (F_1,56=46, p<0,00). В возрасте 14 мес. количество вертикальных стоек у крыс OXYS было меньше, чем в 3 мес. (p<0,00), в то время как у крыс Вистар показатель не снижался (p<0,06). Поэтому, межлинейные различия (F_1,56=173, p<0,00) в 3 мес. (p<0,00) с возрастом росли (p<0,00). SkQ1 увеличил показатель у животных обеих линий (F_1,56=25, p<0,00): у крыс OXYS до уровня молодых животных, однако у крыс Вистар показатель был выше, чем у молодых животных (p<0,01).

Рис. 15. Влияние 2-х месячного приема SkQ1 (250 нмоль/кг) с возраста 12 мес. на число выходов в открытые (а) рукава и время, проведенное в них (б) крыс Вистар и ОХYS и сравнение с 3-х месячными животными в приподнятом крестообразном лабиринте. # - p<0,05 по сравнению с крысами Вистар одного возраста,

^ - p<0,05 по сравнению с 3 мес. крысами одной линии. * - эффект препарата (p<0,05).

В водном лабиринте Морриса латентный период нахождения невидимой платформы животными в возрасте 14,5 мес. снижался в течение всех пяти дней обучения, как у контрольных крыс Вистар и OXYS, так и у принимавших SkQ1 (рис. 16 а, б). Однако у крыс OXYS способность к обучению была ниже, чем у крыс Вистар (F_1,140=5, p<0,01).

Согласно ANOVA-анализу, SkQ1 повлиял на способность к обучению животных (F_1,140=3, p<0,01). Однако post hoc сравнения показали, что достоверным влияние антиоксиданта было только у крыс Вистар. SkQ1 увеличил латентный период нахождения платформы. В результате у получавших его крыс Вистар он был длительнее, чем у контрольных в каждый из пяти дней обучения, включая первый (F_1,70=6, p<0,02, F_1,70=7, p<0,01, F_1,70 =12, p<0,001, F_1,70=5, p<0,03, F_1,70=7, p<0,01, соответственно).

На крыс OXYS SkQ1 значимо не повлиял (F_1,70=1, p<0,03). У крыс контрольной группы время нахождения невидимой платформы было меньше, чем у контрольных крыс Вистар только в первые 2 дня тестирования (p<0,02 и p<0,01, соответственно).

Рис. 16. Влияние приема SkQ1 (250 нмоль/кг) с возраста 12 мес. на способность к обучению крыс Вистар (а) и ОХYS (б) в лабиринте Морриса. Исследование в возрасте 14,5 мес. * - достоверный эффект препарата, # - значимые межлинейные различия.

Таким образом, мы показали, что антиоксиданты способны влиять на поведение. Их эффекты зависят от генотипа животных, их возраста, длительности применения, дозы и специфики самого антиоксиданта. Так, приём экстракта черники и MitoQ с возраста 1,5 мес. в течение 45 дней предупредили развитие характерных для крыс OXYS поведенческих признаков в критический период их развития. Витамин Е существенно не повлиял на них, а SkQ1 повысил тревожность крыс OXYS. Все исследованные антиоксиданты, особенно витамин Е, значительно увеличили тревожность молодых крыс Вистар и не влияли на их двигательную активность. Длительный прием различных доз SkQ1, также начатый с возраста 1,5 мес., предупредил снижение двигательной и исследовательской активности у крыс Вистар к возрасту 12 мес. и не повлиял на неё у крыс OXYS. При этом SkQ1 предупредил у крыс OXYS снижение способности к обучению в лабиринте Морриса, повысил их тревожность, не изменив её у крыс Вистар. Приём SkQ1 крысами обеих линий в зрелом возрасте существенно активизировал их поисково-исследовательскую активность и снизил тревожность, приблизив показатели к свойственным молодым животным. Выявленное при этом у крыс Вистар снижение способности к обучению в лабиринте Морриса, возможно, связано с критическим снижением уровня их тревожности, которое может ослаблять внимание и, как следствие, обучаемость [Дубровина Н.И., Савостьянова Д.А., 2003; Кравченко Е.В., Синкевич Н.М., 2008].