Коноплева 2013

Схема 12 Поэтапная схема количественного определения АП

в коре крушины

Подготовка ЛРС (измельчение, просеивание, взятие навески)

Кислотный гидролиз (ледяная уксусная кислота)

Экстракция агликонов хлороформом

Перевод агликонов в щелочно-аммиачную смесь в виде фенолятов

(определенный объем колбы - 250 мл)

Стабилизация окраски Окисление восстановленных форм (tº + О2)

Определение оптической плотности

Расчет результатов

При определении необходимо учитывать, что производные антрацена могут быть представлены С-гликозидами, как у алоэ и сенны. В этих соединениях углеводные компоненты не отщепляются ни при кислотном, ни при щелочном гидролизах. Для их гидролиза должны использоваться более жесткие условия (конц. кислоты серная или хлористоводородная). Таким образом, этот метод не позволяет с достаточной точностью определять сумму антраценпроизводных или содержание отдельных антрахинонов.

203

2. Спектрофотометрический метод Определение АП в коре крушины ГФ РБ, Т. 2 (с 357) (схема

13).

1.Экстракция суммы АП 70% метанолом.

2.Фильтрация. 5 мл фильтрата разбавляют водой (50 мл), подкисляют HCl (0,1 мл) и агликоны экстрагируют петролейным эфиром, который затем отбрасывают.

3.Водный слой помещают в мерную колбу (V-100 мл) прибавляют 5 мл р-ра Na2CO3 (50 г/л) и доводят до 100 мл водой.

4.К 40 мл водного р-ра прибавляют р-р FeCl3 (200 г/л), нагревают на водяной бане 20 мин (окисление восстановленных форм), прибавляют 2 мл HCl, продолжают нагревание еще 20 мин (происходит гидролиз гликозидов).

5.Полученные агликоны экстрагируют эфиром, который помещают в мерную колбу на 100 мл.

6.20 мл эфирного извлечения выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 10 мл р-ра магния ацетата (5 г/л) в метаноле (получение окрашенного р-ра).

7.Измеряют оптическую плотность (на спектрофотометре) при 515 нм, используя метанол в качестве компенсационного р-ра.

8.Определение процентного содержания глюкофрангулинов в пересчете на глюкофрангулин А.

Таким образом определяют количественное содержание восстановленных и окисленных форм агликонов, образовавшихся после кислотного гидролиза антрагликозидов.

3.Хромато-спектрофотометрический метод.

4.Денситофлуориметрический метод.

5.Кислотно-основное титрование в неводных растворите-

лях.

6. Полярографический метод и др.

204

Схема 13 Схема определения АП в коре крушины (ГФ РБ)

Подготовка ЛРС: измельчение, просеивание, взятие навески

Экстракция АП 70% метанолом

Фильтрация

сырьенавыброс

Фильтрат + вода + HCl имеющиеся агликоны, экстрагируют петролейным эфиром

эфирный слой отбрасывают

Водный слой + р-р Na2CO3 + вода для перевода в соли

Окисление восстановленных форм: водный р-р + р-р FeCl3

нагревание в теч. 20 мин

Кислотный гидролиз (HCl)

нагревание в теч. 20 мин

Экстракция полученных агликонов эфиром (V 100 мл)

часть извлечения выпаривают досуха

Получение окрашенного р-ра:

сухой остаток + р-р магния ацетата в метаноле

Измерение оптической плотности

Расчет результатов

205

ЗАГОТОВКА, СУШКА И ХРАНЕНИЕ ЛРС

Кору крушины заготавливают весной, в период набухания почек, до начала цветения. В местах, отведенных лесничеством, крушину срубают топором или срезают ножовкой, оставляя пеньки высотой 10-15 см для порослевого возобновления. На срубленных стволах и толстых ветвях делают кольцевые надрезы на расстоянии 25-30 см друг от друга, которые соединяют продольными надрезами. Снимают кору в виде желобоватых или трубчатых кусков. Нельзя состругивать ее ножом, так как куски коры получаются узкими и содержат остатки древесины. Кору очищают от лишайников. Заготовку проводят с растений не моложе 8 лет и высотой не менее 3 м.

Плоды жостера заготавливают после полного их созревания, вручную. Их предварительно подвяливают и сушат.

Подземные органы (ревеня, щавеля, марены красильной) заготавливают ранней весной или осенью.

Корни ревеня тангутского заготавливают на третьем году жизни. Выкопанное сырье отряхивают от почвы, обрезают надземную часть растения, промывают в холодной воде, крупные корни режут на куски, толстые корни разрезают вдоль.

Траву зверобоя заготавливают в период цветения до появления незрелых плодов, срезая ножами или серпами облиственные верхушки длиной до 25-30 см, без грубых оснований стеблей. Недопустимо вырывание растения с корнями.

Заготовке подлежат хорошо развитые нижние и средние листья алоэ. Сбор ведется путем их отделения вместе с малосочными влагалищами, охватывающими стебель. Не допускается отламывание и срезка листьев во избежание потерь сока. Сбор урожая проводится 2-3 раза в течение вегетации, причем собирают сначала нижние листья, затем средние и частично верхушечные. Молодые листья на верхушке растения (их 5-7, не считая трех недоразвитых листьев у верхушки роста) оставляют. Последний сбор листьев при пересадочной культуре проводят в конце октября.

Кроме листьев заготовке подлежат побеги алоэ с толщиной стебля до 12 мм, их срезают длиной 3-15 см.

Сырье после заготовки не должно храниться более 3-4 ч.

Для получения сырья " Алоэ древовидного листья сухие" собранные листья консервируют по методу В.П. Филатова, выдерживая их в темноте при температуре 4-8°С в течение 12 суток, а затем сушат в вакуум-сушильных шкафах при температуре 75-80°С до остаточной влажности не более 10%.

Сушат сырье на чердаках с хорошей вентиляцией или под навесами, разложив тонким слоем, периодически переворачивая. Можно

206

сушить в сушилках. Например, сырье жостера, ревеня, щавеля, зверобоя сушат при температуре 50-60° С; марены красильной – около 45 °С.

Сырье хранят на подтоварниках в сухом, хорошо проветриваемом помещении.

ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ И ПРИМЕНЕНИЕ В МЕДИЦИНЕ

При всей близости химической структуры антраценпроизводных они резко отличаются друг от друга по фармакологическим свойствам. Например, разница в структуре хризацина и ализарина состоит в расположении одной -ОН группы: у хризацина она в положении С8,

ау ализарина - в положении С2 ядра антрацена.

Сырье, содержащее производные хризацина (кассия остролистная, крушина ольховидная, ревень тангутский, щавель конский, жостер слабительный), применяется как слабительное средство. Слабительный эффект наступает через 8 - 10 часов после приема препаратов. Это связано с тем, что сами по себе антрагликозиды не активны. Они медленно гидролизуются ферментами и бактериальной флорой толстых кишок в щелочной среде с высвобождением агликонов. Последние раздражают рецепторы нижнего отдела толстого кишечника, в результате чего усиливается перистальтика - проявляется слабительное действие.

Лекарственные средства слабительного действия: Рамнил (из крушины), Кафиол, Регулакс, Глаксена, Сенаде, Пурсенид (из сенны) и др.

Препараты антрагликозидов не рекомендуется длительно назначать во избежание нарушений водно-солевого обмена и нарушения питания организма. Кроме того, они противопоказаны при воспалительных процессах в брюшной полости и острых лихорадочных состояниях.

Сырье, содержащее производные ализарина (марена красильная), оказывает спазмолитическое и мочегонное действие, способствует растворению и выведению из организма фосфатов, уратов и оксалатов. Применяется Цистенал, Марелин, экстракт марены красильной.

Конденсированные производные антрацена обуславливают антибактериальную активность препаратов зверобоя. Настойка, Новоиманин применяются при инфицированных ранах, ожогах, язвах. Психотонин, Негрустин – антидепрессивные средства.

Лекарственные средства алоэ назначают в качестве биоген-

ных стимуляторов.

207

Таблица 16 Химический состав фармакологическая активность

и использование ЛРС, содержащего антраценпроизводные

Наименование	Биологически	Лекарст-	Фармаколо-
растительногосырья,	активные	венные	гическое
растенийисемейства	вещества	средства	действие
	Производныехризацина
Крушины кора –	Франгуларозид,	Отвар, экс-	Слабитель-
Frangulae cortex,	глюкофрангу-	тракты сухой	ное,
Крушина ольховид-	лин, франгулин,	(в таб.) и
ная (К. ломкая) –	франгула-эмо-	жидкий,
Frangula alnus Mill.	дин, хризофанол	Рамнил,	противовос-
(RhamnusfrangulaL.),		Викалин,	палительное
Крушиновые –		Викаир,
Rhamnaceae		Кофранал
Жостера плоды –	Глюкофрангу-	Отвар	Слабитель-
Rhamni catharticae	лин, франгулин		ное
fructus,	(рамнокатар-
Жостер слабитель-	нин), франгула-
ный (Крушина сла-	эмодин, жосте-
бительная) –	рин; флавонои-
Rhamnus catharticaL.,	ды, орг. к-ты
Крушиновые –
Rhamnaceae
Сенны листья –	Димеры: сенно-	Отвар, сухой	Слабитель-
Sennae folia, Сенны	зиды А, В, С, D;	экстракт лис-	ное
листья с плодами –	мономеры: глю-	тьев сенны в
Sennae folia cum	кореин, глюко-	таб.,
fructus, Сенны ост-	алоэ-эмодин,	Сенадексин,
ролистной плоды –	хризофанол;	Кафиол,
Sennae acutifoliae	флавоноиды,	Антрасен-
fructus, Сенны	смолы	нин, Сенаде,
узколтстной плоды-		Глаксена,
Sennae angustifoliae		Регулакс
fructus,
Сенна (Кассия)
остролистная–Cassia
acutifolia Delile,
Сенна узколтстная-
Cassia angustifolia
Vahl.
Бобовые - Fabaceae
	208

Ревеня корни –		Реум-эмодин,	Отвар, поро-	Слабительное
Rhei radices,		хризофанол,	шок, таблет-	в больших
Ревень тангутский –		реин и их гли-	ки ревеня,	дозах; вяжу-
Rheum palmatum L.,		козиды; ди-	экстракт су-	щее в малых
Гречишные –		антроны (дире-	хой, сироп,	дозах (0,05-
Polygonaceae		ин, пальмидин);	Витаплант,	2 г),
		дуб. в-ва	Валоседан,	седативное,
			Холафлукс	желчегонное
Щавеля конскогокор-		Реум-эмодин,	Отвар,	Слабитель-
ни- Rumicis conferti		хризофанол и их	порошок	ное в боль-
radices,		гликозиды (глю-		ших дозах,
Щавельконский –		кореум-эмодин,		вяжущее в
Rumex confertusWilld.,		хризофанеин),		малых дозах,
Гречишные –		дуб.в-ва, кате-		противовос-
Polygonaceae		хины и лейко-		палительное
		антоцианидины
Алоэ древовидного		С-гликозиды:	Сок алоэ,	Биостимули-
листья свежие –		барбалоин, изо-	экстракты,	рующее, об-
Aloёs arborescentis		барбалоин,	таблетки,	щетонизиру-
folia recentia,		алоин, алоино-	линимент,	ющее, реге-
Алоэ древовидного		зиды А и В,	сироп,	нерирующее,
листья сухие –		наталоин, алоэ -	Алором	слабите-
Aloёs arborescentis		эмодин; смоли-		льное
folia sicca,		стые в-ва, по-
Алоэ древовидного		лисахариды
побеги боковые
свежие – Aloёs
arborescentis cormi
lateralis recentes,
Алоэ древовидное
(Столетник) – Aloё
arborescens Mill.,
Лилейные- Liliaceae
	Производные ализарина
Марены корневища		Рубэритриновая	Экстракт су-	Литолитиче-
и корни –Rubiae		к-та, ализарин,	хой в таб.,	ское, спазмо-
rhizomata et radices,		рубиадин, лу-	Цистенал,	литическое,
Марена красильная–		цидин; флаво-	Марелин,	мочегонное,
Rubia tinctorum L.,		ноиды, иридо-	АнтиЛит,	противовос-
Марена грузинская –		иды, орг. к-ты	Спазмоци-	палительное
Rubia iberica (Fisch.			стенал
	209

Ex DC.) C. Koch.,

Мареновые –

Rubiaceae

Конденсированные антраценпроизводные

Зверобоя трава –	Гиперицин,	Настой,	Фотосенси-
Hyperici herba,	псевдогипери-	Диагиперон	билизирую-
Зверобой	цин; флавонои-	(настойка),	щее, вяжу-
продырявленный,	ды: гликозиды	зверобойное	щее, анти-
(З.обыкновенный) –	кверцетина (ги-	масло,	микробное,
Hypericum	перозид, рутин,	Новоиманин,	противовос-
perforatum L.,	кверцитрин) и	Фитолит,	палительное,
Зверобой пятнистый	апигенина, лей-	Фитулвент,	желчегон-
(З.четырехгранный) –	коантоцианы;	Гербогастрин,	ное, спазмо-
Hypericum macula-	конденс. дуб.	Гастритол,	литическое,
tum Crantz	в-ва, эф. масло,	Армон,	антидепрес-
(H. quadrangulumL.),	гиперфорин	Полифитол,	сивное,
Зверобойные – Hy-		Психотонин,
pericaceae		Седавит,
		Ново-пассит,
		сборы:	гипоглике-
		Арфазетин,	мическое
		Мирфазин

210

ТЕМА 14. ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВА

Дубильными веществами, или таннидами, называется комплекс высокомолекулярных природных полифенольных соединений, обладающих вяжущим вкусом и способных образовывать прочные связи с белками и алкалоидами, осаждая их

Термин "дубильные вещества" был впервые использован французским исследователем Сегеном в 1796 г.

Дубильные вещества получили свое название из-за способности превращать сырые шкуры животных в прочный, неподдающийся гниению продукт - кожу. Обычно для этой цели использовали кору дуба, отсюда и процесс назвали дублением, а вещества - дубильными.

Дубление - сложный физико-химический процесс образования устойчивой структуры за счет возникновения водородных, ковалентных и электровалентных связей между молекулами коллагена и фенольными группами дубильных веществ. Но такие связи могут образовываться в том случае, когда молекулы достаточно велики. В процессе дубления участвуют вещества с молекулярной массой от 500 до 3000. Низкомолекулярные соединения имеют только вяжущий вкус, но не способны к дублению.

КЛАССИФИКАЦИЯ

Согласно классификации К. Фрейденберга, дубильные вещества подразделяют на две большие группы:

I. Гидролизуемые ДВ при действии кислоты или ферментов подвергаются гидролизу на составные части.

К ним относят:

1.галлотаннины;

2.эллаготаннины;

3.несахаридные эфиры карбоновых кислот или депсиды.

II. Конденсированные ДВ при действии кислот подвергаются дальнейшему уплотнению и конденсации, а образующиеся краснокоричневые продукты конденсации называют флобафенами.

Они представлены полимерами:

1.катехинов (флаван-3-олов);

2.лейкоантоцианидинов (флаван-3,4-диолов);

3.гидроксистильбенов.

1.Галлотаннины - сложные эфиры гексоз (обычно D-глюкозы)

игалловой кислоты. Встречаются моно-, ди-, три-, тетра-, пента- и полигаллоильные эфиры.

211

Представителем этой группы является китайский таннин. Впервые структура китайского таннина была описана в 1914 - 1919 гг. Э. Фишером и К. Фрейденбергом, которые предложили для него строение β-пента-м-дигаллоил-D-глюкозы. Только в 1961 - 1963 гг. В. Хэуорсом была установлена структура:

CH2OR5

H

O

OR1

H

H

OR3

R1 = R3 - галловая кислота,

H

R2 = R4 - м-дигалловая кислота,

R4O

R5 = H - м-тригалловая кислота.

OR2

H

КИТАЙСКИЙ ТАННИН

COOH

COOH

HO

O

OH

O

OH

C

HO

OH

HO

OH

OH

ГАЛЛОВАЯКИСЛОТА

М-ДИГАЛЛОВАЯКИСЛОТА

Китайский таннин получают из листьев сумаха полукрылатого.

2. Эллаготаннины - сложные эфиры D-глюкозы и гексагидроксидифеновой, хебуловой и других кислот, имеющих биогенетическое родство с эллаговой кислотой.

Эллаготаннины найдены в корке плодов гранатника, кожуре грецкого ореха, коре дуба, соплодиях ольхи.

	O			COOH	OH OH
	O	OH
HO			OH	HO	OH
HO	O			HO OH	COOH
		O
ЭЛЛАГОВАЯ КИСЛОТА				ГЕКСАГИДРОКСИДИФЕНОВАЯ
				КИСЛОТА
				212