- •Кафедра химии
- •Содержание
- •Общие правила работы в лаборатории
- •Правила техники безопасности
- •Оказание первой помощи
- •Порядок оформления работ
- •Тема 1. Растворы
- •Работа 1. Приготовление рабочего 0,1n раствора hCl
- •Плотность растворов соляной кислоты
- •Работа 2. Определение нормальности рабочего раствора hCl по 0,1n раствору NaOh
- •Работа 3. Древовидные образования
- •Работа 4. Рост искусственной «клетки» Траубе
- •Тема 2. Гетерогенные равновесия и процессы
- •Работа 5. Определение хлоридов мочи по Мору
- •Тема 3. Комплексонометрия
- •Работа 6. Определение общей жесткости воды трилонометрическим методом.
- •Тема 4. Протолитические равновесия и процессы
- •Работа 7. Приготовление буферных растворов
- •Тема 5. Электрохимия
- •Работа 10. Потенциометрический метод определения рН растворов при помощи стеклянного электрода
- •Тема 6. Поверхностные явления. Хроматография
- •Работа 11. Разделение минеральных солей на колонках с твердым адсорбентом
- •Работа 12. Радиальная распределительная хроматография
- •Тема 7. Дисперсные системы
- •Работа 13. Метод замены растворителя
- •Работа 14. Получение золя гидроксида железа (III)
- •Работа 15. Получение золя гексацианоферрата (II) меди
- •Работа 16. Изучение процесса коагуляции коллоидных растворов
- •Тема 8. Растворы вмс
- •Работа 17. Изучение процесса денатурации белка
- •Работа 18. Изучение процесса высаливания белка
- •Литература
Тема 8. Растворы вмс
В этом разделе представлены работы по изучению свойств растворов ВМС, в частности белков. Рассмотрены общие и клинические реакции осаждения и высаливания белков.
Работа 17. Изучение процесса денатурации белка
Задача работы: изучить пути денатурации белка и выработать навыки проведения реакций осаждения белка, в том числе клинических.
Оборудование, материалы: яичный белок, 5%-ный раствор ацетата свинца, насыщенный раствор сульфата меди, 20%-ный раствор сульфосалициловой кислоты, концентрированная азотная кислота, пипетки, пробирки, спиртовка.
Выполнение работы:
а) Осаждение белка ацетатом свинца. В пробирку наливают 10 капель яичного белка и прибавляют 4 капли 5%-ного раствора (CH3COO)2Pb. Образуется нерастворимый в воде осадок (при добавлении избытка ацетата свинца осадок легко растворяется).
б) Осаждение белка сульфатом меди. В пробирку наливают 1 мл раствора белка и прибавляют по каплям 2%-ный раствор сульфата меди. Выпадает осадок белка.
Аминокислоты и белков способны связывать ионы тяжелых металлов, поэтому используется в медицинской практике как противоядия при отравлении солями ртути, меди, свинца и др.
в)Осаждение белка нагреванием. В 5 пробирок наливают по 5 капель 1%-ного раствора яичного белка.
1. В первой пробирке нейтральный раствор белка нагревают до кипения. Жидкость мутнеет, происходит укрупнение частиц, но мицеллы белка несут заряд и удерживаются во взвешенном состоянии.
2. Во второй пробирке раствор белка нагревают до кипения и прибавляют 1 каплю 1%-ного раствора уксусной кислоты. Частицы белка теряют заряд, выпадает хлопьевидный осадок денатурированного белка.
3. В третью пробирку добавляют 5-10 капель 1%-ного раствора уксусной кислоты для получения сильнокислой реакции среды. Белковые молекулы перезаряжаются, приобретают положительный заряд, это повышает их устойчивость и при кипячении осадка не образуется.
4. В четвертую пробирку добавляют 2 капли 10%-ного раствора едкого натра, создавая щелочную среду. При кипячении жидкости осадка не образуется, поскольку в щелочной среде заряд белка увеличивается.
5. В пятую пробирку приливают 5 капель 1%-ного раствора уксусной кислоты и 2 капли насыщенного раствора хлорида натрия и нагревают. Выпадает хлопьевидный осадок, так как частицы белка теряют заряд вследствие взаимодействия белка с разноименно заряженными ионами хлорида натрия. Проба используется в клинике для обнаружения белка.
г) Осаждение белка сульфосалициловой кислотой. В пробирку с 5 каплями раствора белка добавляют 2 капли 20%-ного раствора сульфосалициловой кислоты. Выпадает осадок белка. Объяснить наблюдаемое явление. Сульфосалициловая кислота обладает высокой чувствительностью по отношению к белку (чувствительность реакции 1:50000).
Используется для обнаружения малых количеств белка в различных биологических жидкостях (моче, экссудатах и пр.)
д)Осаждение белка концентрированной азотной кислотой (проба Геллера). В пробирку наливают 1 мл концентрированной азотной кислоты и осторожно по стенке, слегка наклонив пробирку, приливают равный объем раствора белка так, чтобы жидкости не смешивались. На границе двух жидкостей образуется осадок в виде белого кольца. При встряхивании и добавлении избытка азотной кислоты осадок не растворяется, постепенно окрашиваясь в желтый цвет. Объяснить наблюдаемое явление. Реакция Геллера используется при клинических исследованиях мочи на белок.