Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
29-32.doc
Скачиваний:
121
Добавлен:
22.02.2015
Размер:
668.16 Кб
Скачать

Качественное определение

Для того, чтобы определить имеются ли алкалоиды в сырье, их нужно извлечь и провести ряд реакций.

Извлечение алкалоидов из сырья проводится обычно 1% уксусной кислотой в соотношении 1:10, при кипячении в течение 5 минут. Затем извлечение фильтруют и с фильтратом проводят качественные реакции. при этом могут быть использованы 3 типа реакций.

- общие (осадочные) реакции на алкалоиды, позволяющие установить наличие алкалоидов в ЛРС

- цветные (специфические) реакции – для обнаружения определенной группы или отдельных алкалоидов

- хроматографический, люминесцентный и спектроскопический – для идентификации отдельных алкалоидов

Общие осадочные реакции

Название реактива

Состав реактива

Эффект реакции

Майера

раствор дихлорида ртути и йодида калия

белый или желтоватый осадок

Вагнера-Бушарда

раствор йода в иодиде калия

бурый осадок

Драгендорфа

раствор нитрата висмута основого и иодида калия с добавлением уксусной кислоты

оранжево-красный или кирпично-красный осадки

Марме

раствор иодида кадмия в растворе иодида калия

белые или желтоватые осадки, растворимые в избытке реактива

раствор кремневольфрамовой кислоты

беловатые осадки

раствор фосфорномолибденовой кислоты

желтоватые осадки, через некоторое время синеют или зеленеют

раствор фосфорновольфрамовой кислоты

беловатые осадки

раствор пикриновой кислоты

осадки желтого цвета

Все эти реакции мало специфичны и позволяют лишь ориентировочно делать выводы о присутствии алкалоидов.

Специфическая реакция: реакция Витали Морена. При действии на остаток после выпаривания спиртовым раствором гидроксида калия и ацетона образуется фиолетовое окрашивание

Количественное определение

Определяется содержание суммы алкалои­дов (атропина, гиосциамина). Определение проводится титрометрическим методом (обратное титрование).

После извлечения алкалоидов из растительно сырья. Сухой остаток содержащий основания алкалоидов растворяют в 0,02 н. Растворе хлороводородной кислоты и отттитровывают избыток последней 0,02 н. Раствором гидроксида натрия до появления желтой окраски (индикатор метиловый красный).

6. В процессе ферментации:

Проанализируйте общие закономерности ферментационного процесса при синтезе антибиотиков.

Фазы роста микроорганизмов.

1. Фаза приспособления, или так называемая фаза адаптации микроорганизмов, или лаг-фаза. В этой фазе нет деления и соответственно роста микроорганизмов, но есть увеличение количества белков, как ответная реакция на новые условия их существования.

2. Фаза ускоренного роста (переходная фаза). В этой фазе повышается содержание белков, РНК, нуклеиновых кислот, происходит уже деление клетки.

3. Эта фаза называется логарифмической фазой роста (экспоненциальная кривая), когда компонентов питания достаточно и биообъект полностью адаптирован к условиям в ферментере. Идет аэрация.

4. Фаза замедленного роста клеток. В этой фазе число клеток сокращается, так как и число делений сокращается. Уменьшается скорость роста микроорганизмов, так как по мере наращивания биомассы уменьшаются компоненты питательной среды. Клектки лизируются, происходит автолиз клетки и они начинают уничтожать своих соседей (одни клетки съедают другие).

5. Фаза стационарная, когда количество живых клеток сохраняется за счет умерших и не происходит роста биомассы.

6. Фаза гибели клеток, когда число погибших клеток больше, чем живых.

Однако, если в «лагфазе» добавить источник углерода (например, лактозу), то все повториться. Поэтому можно использовать несколько источников питания, но добавление это делать в логарифмической фазе роста клеток. Если ферментационная среда не очень отличается от посевной среды, то обычно берут 5-10% питательной среды во избежание появления слишком большого количества метаболитов – отработанных веществ, засоряющих эту среду.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]