РНК-содержащие вирусы. Вирусы полиомиелита, Пикорнавирусы. Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций.

Ортомиксовирусы. Лабораторная диагностика гриппа.

Парамиксовирусы. Лабораторная диагностика парагриппа, кори, эпидемического паротита, RS-инфекции.

Пикорнавирусы

 

Семейство пикорнавирусов (pico — маленький, RNA — РНК) включает в себя наиболее просто организованные вирусы, многие из которых патогенны для человека. Они относятся к пяти родам (Enterovirus, Rinovirus, Cardiovirus, Aphtovirus, Hepatovirus), имеющим ряд общих признаков: мелкие размеры (около 28 нм), положительный РНК-содержащий геном, который функционирует в качестве иРНК. и обладает инфекционным началом, отсутствием внешней оболочки, кубическим типом симметрии капсида и сходными механизмами репродукции.

Данное семейство включает более 200 вирусов, которые объединены в 6 родов: энтеро-, афто-, кардно-, рино-, гепато- и парэховирусы. Вирусы, вызывающие заболевания человека, входят в 4 рода, а вызывающие заболевания животных - в 6 родов. Важным признаком дифференцирующим родовую принадлежность является стабильность при низком рН. Афтовирусы нестабильны при рН ниже 7,0; риновирусы — при рН ниже 5,0; энтеро-, гепато-, кардио- и парэховирусы стабильны при рН=3,0. 5'-нетранслируемая область генома кардио- и афтовирусов содержит длинный поли (С) участок, отсутствующий у представителей других родов. Афтовирусы уникальны по наличию в геноме трех подобных, но не идентичных участков, кодирующих белок VPg.

Вирионы представляют собой безоболочечные частицы, округлой формы с гладкой поверхностью диаметром 27 нм.

Геном представлен одной молекулой одноцепочечной (+)РНК размером 7,2—8,4 тн. Геномная РНК полиаденилирована на З'-конце и имеет белок VPg, связанный ковалентно с 5'-концом. Геномная РНК обладает инфекционностью, т.е. функционирует как мРНК, имеет одну открытую рамку считывания и транслируется в полипротеин, который затем расщепляется на 11 индивидуальных белков. Пикорнавирусы содержат 60 копий каждого из 4 капсидных белков: VP1, VP2 и VP3 (м.м. каждого 30000) и VP4 (м.м. 7000-8000) и 1 копию небольшого белка VPg (м.м. варьирует; афтовирусы кодируют 3 варианта VPg). Кроме того, в вирионах многих пикорнавирусов были обнаружены минорные белки, функция которых неизвестна. В вирионах полио- и риновирусов, VP1, VP2 и VP3, упакованные вместе, образуют «каньон», обрамляющий 5-гранник. Аминокислоты внутри каньона и особенно в основании, являются вариабельными. Консервативные аминокислоты, расположенные в основании каньона, вероятно, формируют точки прикрепления вирусов к рецепторам на поверхности клетки и, предположительно, защищают их от иммунных механизмов.

 

В этом отношении риновирусы подобны вирусу ящура, который имеет относительно гладкую поверхность без структуры каньона; места прикрепления к клеточным рецепторам локализованы на верхушке выступов поверхности вириона. Эти участки являются весьма антигенными и определяют серотиповую специфичность вируса ящура. Установлены общие закономерности в антигенной структуре пикорнавирусов. Инфекция или иммунизация (146 S-частицами, но не 12-14 S-субъединицами) сопровождаются образованием вируснейтрализующих антител (ВНА). Главный иммуногенный сайт локализован в VP1, хотя нейтрализующие эпитопы локализованы в двух других капсидных белках - VP2 и VP3. Обнаружена многокомпонентность эпитопов, учавствующих в нейтрализации вируса. Замена только одной аминокислоты в эпитопе в процессе мутации может привести к изменению антигенной структуры пикорнавирусов. Ренгеноструктурный анализ позволил локализовать нейтрализующие антигенные участки энтеровирусов. У вируса полиомиелита идентифицировано три основных нейтрализующих участка: первый находится в VP1 и включает область аминокислот 89-100; второй - аминокислот 220-222 полипептида VP1 и аминокислот 270 или 164—172 полипептида VP2; третий — области аминокислот 58—60 и 70—74 полипептида VP3 или аминокислот 286—290 полипептида VP1 и 58-59 полипепттида VP3. таким образом, вирус полиомиелита содержит три основных антигенных участка, в которые вовлечены три капсидных белка. Первый нейтрализующий участок - непрерывный (области 89-100 аминокислот VP1), второй и третий — нейтрализующие состоят из двух областей: второй - из участков аминокислот белков VP1, VP2, третий - из участков аминокислот полипептида VP3 или VP1 и VP3.

Антигенные участки, связывающие антитела, не участвуют во взаимодействии полиовируса с клеточными рецепторами. У антигенных вариантов полиовируса устойчивость к нейтрализующим антителам сопровождалась аминокислотными заменами во всех трех наружных капсидных белках. На VP1 полиовируса типа 1 идентифицирован антигенный участок нейтрализации 1В. Он представлен эпитопом, который формируется двумя петлями VP1, а также включает аминокислотные остатки 69—104 и 141 — 152. Моноклональные антитела, реагирующие с VP1 полиовируса типа 1, связывались с областью аминокислот 93—104 указанного полипептида. Антигенные сайты сохраняли иммуногенную активность в инвактивированной вакцине. Протеолитическая активизация VP1 полиовируса повышала его антигенность для мышей. Вирус гепетита А, в отличие от полиовируса, по-видимому, обладает одним доминантным нейтрализующим участком. Хотя у энтеровирусов отсутствует групповой антиген, тем не менее, выявлены перекрестные реакции с антисыворотками на денатурированные антигены.

 

У энтеровирусов парнокопытных животных, кроме того, обнаружены общие эпитопы в полипептидах VP1. Вирус везикулярной болезни свиней содержит три белка: VP1, VP2 и VP3 с молекулярной массой соответственно - 33, 29 и 32 кД. Белки VP1 и VP2 ответственны за индукцию ВН-антител. Энтеровирусы энцефаломиелита и нефрита птиц антигенно не связаны между собой.

 

У вируса ящура VP1 является иммунодоминантным полипептидом. Он ответственен за индукцию ВНА, а Т- и В-клеточные эпитопы находятся, вероятно, в целой вирусной частице. Кроме VP1, важные антигенные области находятся в структуре VP2 и VP3. Три капсидных белка, экспонированных на поверхности вируса ящура, формируют четыре антигенных участка. Первый из них представлен аминокислотными остатками 140-160 белка VP1, второй, третий и четвертый соответственно — VP1, VP2 и VP3. На поверхности вируса ящура обнаружено три участка нейтрализации. Один выявлен только на интактных вирионах (140S), второй — на инактивированных вирионах и субединицах (12 S) и третий на 140S, 12S — структурах и полипептиде VP1. Главный антигенный сайт вируса ящура - это участок соответствующий 141 — 160 аминокислотным остаткам белка VP1, образующий петлю G-P, выступающую на поверхности вириона. За антигенную специфичность вируса ответственны два вариабельных участка, включающие аминокислотные остатки 42—60 и 134—158. Основным результатом «иммунологических» мутаций вируса ящура во время эпизоотических вспышек (антигенный дрейф) является изменение аминокислотной последовательности в VP1.

 

Эпитопы, расположенные в VP1, в отличие от эпитопов, расположенных в VP2, чувствительны к трипсину.

 

Субвирусные частицы 12S вируса ящура содержат высококонсервативный белок, который выявляется моноклональными антителами одной специфичности у шести из семи известных типов вируса. Однако иммунизация ими не сопровождалась образованием ВН-антител. Возможно, в создании специфической защиты существенную роль играют Т-хелперы и антителозависимые факторы иммунитета. Введение инактивированной противоящурной вакцины крупному рогатому скоту сопровождается образованием антител к капсидным белкам и полимеразе ЗД, тогда как при репликации инфекционного вируса дополнительно образуются антитела к неструктурным вирусным белкам (2В, 2С, ЗАВ 1 и/или ЗС). Репликация инфекционного вируса вызывает синтез последних независимо от предварительной вакцинации или клинического проявления заболевания. Данное явление дает возможность выявлять репликацию вируса ящура и различать иммунных и инфицированных животных.

 

Нейтрализующий эпитоп риновируса человека типа 2 включает аминокислотные остатки 153-164 2Р2. Зрелые вирионы пикорнавирусов по антигенности значительно превосходят собственные субвирусные частицы, образуемые как в процессе синтеза и морфогенеза вирионов, так и при их дезинтеграции. Это, по-видимому, в основном связано с конформационными изменениями структурных полипептидов. При денатурации различными факторами полиовирус, например, может потерять сердцевину. Такая ДС-антигенная конверсия сопровождается потерей способности индуцировать образование ВН-антител. У вируса ящура образование ВН-антител практически вызывали только полные вирионные (140S частицы), а не их компоненты. На этом основании об иммуногенности инактивированных вакцин против данных заболеваний можно судить по концентрации соответственно D- или 140S антигена.

Полиовирус явился моделью для расшифровки репликации всех РНК-вирусов, в том числе и пикорнавирусов. Кроме полиовируса, существенный вклад в этот процесс внесло изучение репликации вируса ящура.

 

Клеточными рецепторами для полиовируса, коксаки В вирусов, эховирусов и некоторых риновирусов человека являются иммуноглобулины. Для других пикорнавирусов рецепторами клеточной поверхности служат другие молекулы, включая гепаринсульфат, липопротеины низкой плотности, экстрацеллюмерные протеины и интегрины. После проникновения в клетку и разрушения оболочки вириона VPg отделяется от вирионной РНК клеточными ферментами. Пикорнавирусы обладают КЭП - независимым механизмом трансляции. Рибосомы связываются с 5'-нетранслируемой областью генома вируса, известной как рибосомальный входной сегмент. Этот сегмент вирусной геномной РНК связывается специфически с клеточными белками, которые играют ключевую роль в начале синтеза вирусных белков и РНК. Геномы всех пикорнавирусов имеют З'-поли (А) участок, который кодируется скорее вирусом, чем добавляется полиаденилирующими ферментами клетки-хозяина. Функция этих поли(А) сегментов неизвестна, но их длина, казалось, прямо коррелировала с инфекци-онностью вируса — РНК геном пикорнавирусов содержит одну открытую рамку считывания, которая транслируется в один полипротеин. Полипротеин расщепляется посттрансляционно кодируемой вирусом протеиназой с образованием 11 или 12 белков. 5'-концевая область генома кодирует структурные белки VP4, VP2, VP3 и VP1 в указанном порядке. Средняя область кодирует неструктурные вирусные белки, включая одну вирусную протеазу. 3'-конец генома кодирует другие неструктурные белки, включая вторую протеазу и РНК-зависимую РНК полимеразу.

Синтез вирусной РНК происходит в репликативном комплексе, который включает РНК матрицы, кодируемую вирусом РНК полимеразу и несколько других вирусных и клеточных белков, тесно связанных с вновь собранными гладкими цитоплазматическими структурами. Синтез комплиментарных цепей начинается на З'-концах вирионной РНК с использованием белка VPg в качестве праймера. Основную массу репликативных продуктов в репликативном комплексе составляют полноразмерные комплиментарные (-)РНК, среди которых встречаются плюс-цепи, транскрибированные одновременно вирусной РНК-полимеразой.

Из-за отсутствия КЭП-структуры на 5'-конце у пикорнавирусных мРНК эти вирусы способны вовлекать необычный механизм прекращения трансляции клеточных мРНК; одна из протеаз пикорнавирусов инактивирует КЭП-струк-турный комплекс, который необходим для присоединения клеточных мРНК к рибосомам. Таким образом, репликация пикорнавирусов характеризуется не только цитоцидным эффектом, но также очень эффективной продукцией новых вирионов. После эклипс периода и менее чем за 3 часа урожай может достичь 103 вирионов на 1 клетку.

Вирус гепатита А обычно трудно адаптируется к размножению в культуре клеток. Во многих культурах клеток устанавливается персистентная инфекция без ЦПД. Максимальный выход вируса (6,0—9,0 ТКИД50/мл) получают при механическом разрушении клеток с целью освобождения вируса.

 

При заражении культуры клеток цитопатическим мутантом НМ175А синтез вирусной РНК обнаруживали через 6 часов, а максимальное накопление вируса — через 12—27 часов. ЦПЭ развивается через 2—3 дня, урожай вируса достигает 8,7 lg БОЕ/мл (20 инфекционных единиц на клетку). Характерной особенностью репродукции вируса гепатита А является синтез небольшого количества негативно полярной РНК и быстрая инкапсидация почти всего пула вновь синтезированной (+)РНК во все периоды репликативного цикла.

Три белка VP1, VP2 и VP3, структурноподобных друг другу, образуют наружную поверхность вириона, а белок VP4 расположен внутри капсида и, вероятно, связан с геномной РНК. Белок VPg участвует в репликации РНК и, вероятно, выполняет сигнальные функции при инкапсидации.

Репликация РНК — это уникальное явление, присущее, насколько нам известно, лишь РНК-вирусам. Если бы клетки были способны синтезировать РНК на матрице РНК, то это сильно осложнило бы регуляцию упорядоченного потока информации по схеме ДНК—>РНК—>-белок. Точный механизм репликации вирусной РНК представляет значительный интерес.

 

После многолетних дебатов большинство исследователей в настоящее время придерживается точки зрения, согласно которой вирусы с одноцепочечным геномом реплицируются полуконсервативным способом и, следовательно, родительская молекула (вРНК) является одноцепочечной матрицей для одновременного синтеза нескольких комплементарных цепей (кРНК) (Спигелмен и др., 1968; Вайсман и др., 1968).

 

Таким образом, «репликативный предшественник» (РП) —это частично двухцепочечная структура с одноцепочечными «хвостами» (обзор Бишопа и Левинтоу, 1971). Сползающие с этой структуры дочерние одноцепочечные молекулы кРНК в свою очередь служат матрицами для синтеза новой вРНК 

 

 

Для того чтобы катализировать синтез последней, необходимы кодируемые вирусом РНК-зависимые РНК-полимеразы (репликазы). Эти ферменты в качестве матрицы обычно предпочтительнее используют РНК своего собственного вида вируса, чем другие РНК. В некоторых случаях в образовании кРНК и вРНК участвуют различные полимеразы, однако пока не установлено, насколько это положение является общим.

Клеточные мембраны играют очень важную роль в процессе размножения РНК-вирусов (обзор Эллисона, 1971). Плазматическая мембрана участвует в прикреплении и поглощении вирионов. Трансляция вирусных белков происходит главным образом на полисомах, связанных с мембранами шероховатой эндоплазматической сети.

 

Гликозилирование вирусных гликополипептидов осуществляется на мембранах гладкой эндоплазматической сети, а репликация РНК происходит в связанном с мембранами «репликативном комплексе». И наконец, в связи с тем, что вирионы РНК-вирусов большинства родов имеют внешнюю липопротеидную оболочку, цитоплазматичеекие мембраны (обычно плазматическая мембрана, но иногда внутренние мембраны эндоплазматической сети) играют важную роль в сборке и выходе вирусных частиц из клетки в процессе почкования.

 

Последний процесс имеет следующую последовательность событий:

1. Вирусные гликопротеиды включаются в состав плазматической мембраны, вытесняя все ранее присутствовавшие в ней клеточные белки.

 

2. На внутренней стороне модифицированной плазматической мембраны образуется слой вирусного «мембранного белка» (низкомолекулярный белок негликопротеидной природы).

 

3. Вирусный нуклеокапсид прикрепляется к мембранному белку, и вирусные гликопротеиды образуют видимые выступающие наружу структуры (пепломеры) на внешней стороне плазматической мембраны.

 

4. Происходит почкование — своего рода «обратный цитоз»; измененный участок плазматической мембраны выпячивается, и новый вирион, одевая свой нуклеокапсид, покидает клетку.

Пикорнавирусы.

 

 

Мелкие вирусы Ø 20 нм, без оболочки, капсид икосаэдрический. Геном представлен одноцепочечной (+) РНК длиной 7,5 – 8.0 т.п.н.

 

Пикорнавирусы известны как модельные системы, на которых сделано много открытий. Например, впервые сформулировано положение о моноцистронности эукариотических РНК; открыта внутренняя инициация трансляции; обнаружен РНК-зависимый синтез РНК и фермент его катализирующий; обнаружена двуспиральная РНК; показано участие нуклеотид-белковой затравки в синтезе нуклеиновых кислот; обнаружена РНК рекомбинация; сделано первое картирование генома, причем по продуктам трансляции.

 

In vitro был осуществлен синтез полиовируса. Искусственно синтезированные фрагменты ДНК лигировали и на этой матрице синтезировали РНК. Правда, для этого потребовалось очень много времени. Недавно таким же образом была синтезирована ДНК фага φХ174, но для этого понадобилось всего две недели.

 

Представители: полиовирус, вирус гепатита А, вирус ящура, риновирусы (возбудители ОРЗ и ОРВ), вирус энцефаломиокардита.

 

 

Структура генома.

5’-концу ковалентно (через тирозин – урацил) пришит белок, а на 3’-конце имеется полиА последовательность, синтезируемая матричным способом.

 

В 5’-НТО размером 600-1000 нт. находится IRES, а также последовательность polyС, функции которой не ясны, но известно, что ее удаление вызывает изменение фенотипа. Продуктом трансляции является единый полибелок, который далее нарезается на отдельные белки.

 

В 5’ и 3’-НТО находятся также цис-регуляторные элементы репликации (они не консервативны) oriL и oriR соответственно. У энтеровирусов и риновирусов в 5’-НТО находятся консервативные элементы, организованные в структуру типа клеверного листа.

 

Геном можно условно разделить на три части. В первой части закодированы структурные белки капсида, в третьей части, в гене 3D, закодирована РНК-зависимая РНК-полимераза.

 

 

Механизм репликации.

Схемы репликации постоянно меняются и ниже излагаемая видимо не последняя. Причина заключается в методологической сложности создания системы, позволяющей изучать процесс in vitro. В случае фага Qβ создание системы in vitro возможно, а, например, у полиовирусов репликация идет только в грубо очищенных экстрактах (фракция 10000g), выяснилось, что процесс связан с мембранами. В пораженной клетке развивается система мембранных пузырьков вытянутой формы, называемых репликативными комплексами. Можно показать, что в таких пузырьках сосредоточены все неструктурные белки и идет репликация. В трансформации мембранной системы задействованы белки 2В, 2С и полибелок 2ВС. Соответственно реагенты, ингибирующие образование мембранных пузырьков, подавляют и репликацию вируса.

Необходимо наличие мембран, происходит на циркуляризованной нековалентными взаимодействиями (+) епи. Циркуляризация (+) РНК осуществляется посредством образования рибонуклеопротеидных комплексов. В 5’ и 3’-НТО находятся элементы узнаваемые белками, в 5’-НТО – с PolyC связывается PCBP (PolyC-Binding Protein) с 3’-НТО связывается PABP (PolyA-Binding Protein). После связывания с элементами РНК эти белки приобретают сродство друг к другу, и посредством такого белкового мостика, РНК циркуляризуется. Клеточный фактор инициации трансляции – eIF4G (входит в состав фактора eIF4F), связывается с IRES в 5’-области и также имеет сродство к РАВР.

Вирусные белки 3CD и 3AB взаимодействуют с одной из шпилек в 5’-концевой структуры. 3СD может также связываться с мембраной, закрепляя всю структуру.

Образование кольцевой молекулы РНК можно рассматривать как контроль качества, потому что только целая молекула может свернуться в кольцо.

В одной из работ был показано, что синтез цепи можно осуществить in vitro и в отсутствии мембран с помощью очищенной полимеразы на искусственной матрице полиА, при этом также как и in vivo происходит ковалентное присоединение VPg. Однако, следует учитывать чувствительность метода, в малых количествах (-) цепь образуется и в отсутствии мембран, но выход реакции очень мал по сравнению с системами in vivo.

 

Этот участок длиной 70–100 нуклеотидов образует две шпилечные структуры, способные взаимодействовать друг с другом путем kissing взаимодействий. Изменение конформации этого участка влечет блокирование инициации репликации, но его полное удаление не влияет на инициацию синтеза (-) цепи. Участок получил даже название элемент Ильфа (так звали вахтера, который тщательно проверял пропуска, но когда пропуска не было, то пропускал так). Возможно, как у фага Qβ за счет этой структуры происходит запрятывание некоторого элемента, с которым взаимодействует полимераза – поли-А-хвост. Этот элемент открывается в рибонуклеопротеидном комплексе. С этой структурой взаимодействуют вирусные белки 3AB и 3CD. В комплексе белок С вырезает VPg (белок 3В) и полимеразу (белок 3D). Полимераза тут же начинает синтез РНК.

 

Далее по этой модели при синтезе (-) цепи РНК происходит образование дуплекса РНК, вследствие этого вытесняется 5’-концевой белковый комплекс. Далее он взаимодействует с внутренним ori I. Этот участок имеет конформацию петли и может находится у разных вирусов в разных частях генома, например, у пикорнавирусов в гене 2С, у ринавирусов в гене VP1, у вируса ящура в 5’НТО. Положение петли не имеет решающего значения для репликации.

Полиовирус был впервые выделен в 1909 году Карлом Ландштейнером (на фото) и Эрвином Поппером. Антигенные свойства – различают три серотипа: 1,2,3, не вызывающие перекрестного иммунитета. Эпидемиология: источник – больной человек.  Отмечается высокая восприимчивость человека к полиовирусам, причем, в более 90% случаев инфекцию вызывает полиовирус 1-го типа, чаще у детей от 6 мес до 5 лет). Вирус полиомиелита патогенен только для приматов, главным образом из-за того, что только у них есть соответствующие рецепторы. Основной путь передачи – фекально-оральный (доказано А.Сэбиным), вирус выделяется с испражнениями с конца инкубационного периода до 40-го дня болезни.

Сезонность - подъем заболеваемости в летние месяцы года.

Геном полиовируса был полностью расшифрован только в 1981 г.

В основе дифференциации родов лежат антигенные различия, неодинаковая чувствительность к низким значениям рН, разная патогенность для человека и некоторые другие признаки.

Это семейство охватывает три таксоиомически общепризнанных рода: Enterovirus, Rhinovirus и Calicivirus. Как отмечалось в гл. 1, некоторые исследователи считают, что из энтеровирусов должен быть выделен род Cardiovirus и что вирус ящура и, еозможно, лошадиный риновирус настолько своеобразны, что их необходимо исключить из рода Rhinovirus. Все пикорнавирусы имеют икосаэдрический капсид диаметром 25—40 им и лишены наружной липопротеидной оболочки. В структурном и химическом отношениях были исследованы вирусы полиомиелита, вирус ME (кардиовирус) и вирус ящура (Толбот и Браун, 1972). Структура и химический состав всех пикорнавирусов, кроме представителей рода Calicivirus, очень близки, поэтому все роды, кроме Calicivirus, будут рассмотрены вместе. Структура пикорнавирусов Вирионы родов Enterovirus и Rhinovirus весьма однородны по размеру и по данным электронной микроскопии негативно коитрастированных препаратов имеют диаметр от 25 до 30 нм (Мак-Ферран и др., 1971). На основании результатов рентгеноструктурного анализа было сделано предположение об икосаэдрической структуре вириона, а затем тем же методом было показано, что капсид вируса содержит 60n идентичных или структурно эквивалентных белковых субъединиц.

Некоторые представления об упаковке этих белковых субъединиц (капсомеров) можно получить по электронным микрофотографиям препаратов зараженных клеток (Хорн и Нэгингтон, 1959), однако изучить структуру более детально довольно трудно; связано это с тем, что капсомеры интактных вирионов не удается четко контрастировать фосфовольфраматом. Толбот и Браун (1972) сравнили структуру вируса ящура и одного из кардиовирусов, вируса ME (Рюккерт и др., 1969; Данкер и Рюккерт, 1971). При рН 6,5 или при нагревании вирусы разрушаются, и образуются крупные субъединицы, свободная РНК и нерастворимый осадок. Крупные субъединицы вируса ME имеют коэффициент седиментации 14S (мол. вес 440 000) и при обработке мочевиной диссоциируют на 5S-субъединицы (мол. вес 88 000). 5S-субъединицы (капсомеры) — это белковые молекулы, содержащие три разные полипептидные цепи, по одной копии каждая (VP1, VP2, VP3), которые образуются при расщеплении полипептида предшественника. Крупные US-субъединицы вируса ME имеют структуру пентамеров; крупные субъединицы вируса ящура, коэффициент седиментации которых равен не 14S, a 12S, по-видимому, являются тримерами, состоящими из сходных мономерных субъединиц. Белок-белковые связи в вирусе ящура разрываются по ребрам треугольных граней, а в вирусе ME разрыв связей приводит к образованию пентамерных субъединиц. Толбот и Браун (1972) предположили, что четвертый структурный белок вириона (VP4) локализуется на стыке граней икосаэдра, там, где проходит ось симметрии второго порядка. Сочетание обработки трипсином и электронной микроскопии участков вируса ящура, связывающих антитела, дает основание предположить, что VP1 локализуется на вершинах икосаэдра.

Энтеровирусы вызывают у людей нейроинфекции и заболевания различных органов и тканей.

Кардиовирусы и афтовирусы патогенны преимущественно для животных. К афтовирусам относится вирус ящура.

Патогенными для человека являются вирусы полиомиелита, Коксаки группы А и В, ECHO, энтеровирусы серотипов 68—71 и вирус гепатита А.

Полагают, что энтеровирусы весьма интенсивно эволюционируют, о чем свидетельствует формирование новых типов возбудителей с необычной локализацией в организме. Например, недавно выделенный энтеровирус серотипа 70 поражает конъюнктиву глаза, вызывая острый геморрагический конъюнктивит.

Все энтеровирусы близки между собой по своей структуре, химическому составу, резистентности к физическим и химическим факторам и другим свойствам. Наиболее изученным из них является вирус полиомиелита.

Фильтрующийся агент, названный впоследствии вирусом полиомиелита (синоним полиовирус), был выделен в 1909 г. при заражении обезьян К. Ландштейнером и Е. Поппером из спинного мозга умершего от полиомиелита ребенка.

Структура и химический состав. Однонитевая РНК ассоциирована с внутренним белком, при удалении которого ее инфекционность сохраняется. Капсид вириона построен по икосаэдрическому типу симметрии и состоит из 60 субъединиц Культивирование и репродукция. Вирусы полиомиелита хорошо репродуцируются с выраженным ЦПД в первичных и перевиваемых культурах разного происхождения (фибробласты человека, клетки HeLa и др.).

 

Адсорбция полиовирусов происходит преимущественно на липопротеиновых рецепторах клетки, в которую они проникают путем виропексиса, — вирус захватывается клеточной мембраной, которая впячивается внутрь, образуя микровакуоль. После освобождения вириона от капсида образуется репликативная форма РНК, которая является матрицей для синтеза нРНК и фонда вирионных РНК- Репродукция полиовируса происходит в цитоплазме чувствительных клеток.