Методы диагностики

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД.

Материал для исследованияна эмкар, брадзот, инфекционную энтеротоксемию и другие клостридиозы следует брать не позже 3-4 часов после гибели животного, так как затем происходит быстрое размножение анаэробов в кишечнике и проникновение их в органы и ткани, что может привести к ложным результатам исследования.

Материал для исследования:

столбняк	Раневой экссудат (из глубины раны), кусочки тканей, гной
ботулизм	Пробы подозрительных кормов, содержимое желудка, кусочки печени павших и кровь от больных животных
эмфизематозный карбункул	Трупы вскрывать нельзя – почвенная инфекция! Патматериал: кусочки мышц, отечная жидкость. Если всё же вскрыли - селезенка, печень, кровь из сердца.
злокач. отек	Кусочки пораженных органов, мышц, раневой экссудат
брадзот	Паренхиматозные органы, измененные участки стенки сычуга, двенадцатиперстная кишка, мезентериальные лимфоузлы, отечная ткань.
анаэробная энтеротоксемия	Содержимое тонкого отдела кишечника для обнаруж. токсина, труп животного, тонкий кишечник, печень, почки,селезенка.
некробактериоз	При жизни берут соскобы на границе здоровой и пораженной тканей; посмертно – трупы мелких животных, паренхиматозные органы (печень) с некротическими очагами.
копытная гниль	Свежепораженные участки кожи копытец и слизь в межпальцевой щели

При проведении бак диагностики соблюдают следующий принцип

выделения чистой культуры (ЧК): Исследуемый материал среда Китта-Тароцци

сахарно-кровяной агар Цейслера отвивка колонии среда Китта-Тароцци (чистая культура) бактериоскопия, изучение культурально-биохимических свойств, биопроба, изучение антигенных свойств.

Морфология возбудителей.

Анаэробы имеют схожую морфологию. Это крупные тонкие палочки, в мазках они располагаются одиночно кроме Fusobacterium necrophorumиCl.septicum, которые располагаются в виде длинных нитей.

Все Гр +,кромеFusobacterium necrophorum, все образуютспоры, кромеFusobacteriumnecrophorum. Хорошо заметную при микроскопии капсулу способна образовывать толькоCl.perfringens. Всеподвижны (перитрихи), кромеCl.perfringensиFusobacterium necrophorum.Благодаря форме и расположению образующихся спор

• Cl.tetaniимеет форму«барабанной палочки»,

• Cl.botulinum– форму «теннисной ракетки»,

• Cl.hystoliticum– форму«игольного ушка»,

• большинство клостридий, в том числе Cl.septicum,Cl.sporogenes. имеет форму«веретена».

Очень медленно и «неохотно» образует споры в свежем патматериале и молодых культурах Cl.perfringens.

Культивирование:

Все возбудители анаэробных инфекций требовательны к питательным средам. Для выделения анаэробов и наращивания бактериальной массы используют среду Китта-Тароцци, молоко с кусочками печени, мозговую среду, сахарно-кровяной агар Цейслера. Для культивирования ЭМКАРА и некробактериоза к питательной среде добавляют сыворотку крови КРС. Для выделения чистой культуры исследуемый материал часто подвергают прогреванию перед посевом на водяной бане при 80^оС в течение 10-60 минут, чтобы в нём остались только споры клостридий.Методы создания анаэробных условий: 1.Физический(в анаэростате с вакуумом или индифферентным газом (водород, азот)2. Химический(в эксикаторе; внесение пирогаллола, других химических смесей, поглощающих кислород) 3.Биологический(совместное культивирование с Serratia marcescens или другими аэробами);4.Механический: В жидких питательных средах с добавлением кусочков органов и тканей (среда Китта-Тароцци), - под слоем вазелинового масла или парафина;

в многослойном агаре или при посеве глубинным методом; под стеклом (посев по Перетцу или в трубки Вейона).

Культуральные свойства анаэробов.

При росте анаэробов на среде К-Т наблюдают сначала равномерное помутнение, связанное с подвижностью микробов и часто – вспенивание, связанное с выделением газов. Через 3-4 суток на дно выпадает осадок.

Быстрее всех на среде Китта-Тароцци растёт Cl.perfringensпоэтому через каждые 3-4 часа делают пересевы, для выделения чистой культуры. Медленно растут возбудителиCl.botulinumиCl.tetaniс образованием газа.

Возбудители анаэробных инфекций имеют специфический запах:

• Cl.botulinumCl.chauvoei(ЭМКАР)- запах прогорклого масла.

• Cl.tetani– запах жженого рога.

• Cl.sordellii– гнилого мяса.

На плотной питательной среде Цейслера колонии анаэробов серо-белого цвета, часто – с зоной гемолиза.

• Cl.perfringensобразует мелкие, округлые, плоские колонии, кот.на свету зеленеют.

• Cl.chauvoeiобраз. кол. в виде«виноградного листа или перламутровой пуговицы».

• Cl.tetaniобразует нежные прозрачные колонии с приподнятым центром и отростками, напоминающие«паучков».

• Cl. botulinum образует колонии крупные с корневидными отростками и зоной гемолиза или нежный вуалеобразный налёт с микроскопически изрезанными краями.