- •ЗАГАЛЬНІ ВІДОМОСТІ
- •1. ВУГЛЕВОДИ
- •1.1. Йодометричний метод визначення глюкози
- •1.2. Визначення крохмалю поляриметричним методом за Еверсом
- •1.3. Йодометричний метод визначення лактози
- •2.1. Визначення кислотного числа
- •2.2. Визначення числа омилення
- •2.3. Визначення ефірного числа
- •2.4. Визначення йодного числа
- •2.5. Визначення перекисного числа
- •3. АМІНОКИСЛОТИ ТА БІЛКИ
- •3.1. Визначення амінокислот методом тонкошарової хроматографії
- •3.2. Визначення азоту амінних груп методом формольного титрування
- •3.3. Ізоелектрична точка білків
- •3.4. Осадження білків
- •3.4.1. Осадження білків солями важких металів
- •3.4.2. Осадження білків органічними розчинниками
- •3.4.3. Осадження білків реактивами на алкалоїди
- •3.4.4. Осадження білків концентрованими мінеральними кислотами
- •3.4.5. Осадження білків органічними кислотами
- •3.4.6. Осадження білків під час кип’ятіння
- •3.5. Кількісне визначення білка на основі біуретової реакції
- •3.6. Визначення відновленого глутатіону
- •3.7. Розділення білків та вивчення їх властивостей
- •3.8. Вивчення стійкості казеїн-кальцій-фосфатного комплексу
- •3.9. Визначення кальцію комплексонометричним методом
- •4.1. Кількісне визначення вітаміну В1 (тіаміну)
- •4.2. Якісне визначення вітаміну В2 (рибофлавіну)
- •4.3. Кількісне визначення вітаміну С у рослинній сировині
- •4.4. Кількісне визначення вітаміну С в молоці
- •4.5. Якісні реакції на вітаміни групи А
- •4.6. Кількісне визначення каротинів
- •4.7. Якісне визначення вітаміну D3 (холекальциферолу)
- •5. ФЕРМЕНТИ
- •5.1. Визначення специфічності дії ферментів
- •5.2. Якісне визначення дії β-фруктофуранозидази
- •5.4. Визначення амілолітичної (декстринуючої) активності.
- •5.5. Визначення протеолітичної активності
- •5.6. Визначення активності пероксидази
- •5.7. Визначення дегідрогенази
- •6. СПИРТОВЕ БРОДІННЯ
- •7. КІЛЬКІСНЕ ВИЗНАЧЕННЯ ОРГАНІЧНИХ КИСЛОТ
- •7.1. Визначення летких кислот (у перерахунку на оцтову)
- •7.2. Визначення молочної кислоти
- •8. ВИЗНАЧЕННЯ КІЛЬКОСТІ ДУБИЛЬНИХ РЕЧОВИН
- •9. ВИЗНАЧЕННЯ КІЛЬКОСТІ ПЕКТИНУ ЗА КАЛЬЦІЙ ПЕКТАТОМ
- •10. СТАТИСТИЧНЕ ОПРАЦЮВАННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕНЬ
- •11. ЗАХОДИ З ТЕХНІКИ БЕЗПЕКИ В ЛАБОРАТОРІЇ
- •12. СПИСОК РЕКОМЕНДОВАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ
- •12.1. Основна
- •12.2. Додаткова
- •ЗАГАЛЬНІ ВІДОМОСТІ…………………………………………………….….......3
Загальна поправка дорівнює 2. Загальний результат потрібно зменшити в 2 рази.
Приклад 2. Наважка 5 г, трубка завдовжки 200 мм. При першому визначенні кут поляризації дорівнює+5,2°. При виявленні поправки (наважка 10 г, трубка завдовжки 200 мм) знайдено кут, який дорівнює +0,3°.
Таким чином, вміст крохмалю в досліджуваному продукті:
5,2 - 0,3 ×1,78 = 5,05 ×1,78 = 8,989 » 9% 2
Аналізують одержані результати, складають висновки і рекомендації.
1.3. Йодометричний метод визначення лактози
Лактоза – основний вуглевод молока, яке є сировиною для молочної
промисловості. |
У |
хлібопекарській |
і |
кондитерській |
промислово |
використовують |
відходи |
молочної промисловості– |
молочну сироватку, |
яка |
|
містить лактозу. |
|
|
|
|
|
Мета роботи: засвоєння йодометричного методу визначення лактози. Завдання на виконання роботи: визначити вміст лактози у молоці та
молочних продуктах.
Апаратура: аналітичні терези; годинник.
Лабораторний посуд: мірні колби місткістю250 мл; конічні колби місткістю 250 мл; хімічні склянки місткістю 100 мл; лійки для фільтрування;
піпетки; бюретки для титрування. |
|
|
|
||
Матеріали |
та |
реактиви: |
розчин |
купрум |
сульфату(69,26 г |
перекристалізованого CuSO4.5H2О розчиняють в 1 л дистильованої води); 0,1 н розчин натрій тіосульфату; 0,1 н розчин йоду; 0,1 н розчин натрій гідроксиду; 1,0 %-й розчин крохмалю; 0,5 н розчин хлоридної кислоти; 1,0 н розчин натрій гідроксиду; гумові пробки, молоко; фільтрувальний папір.
Принцип методу ґрунтується на взаємодії альдегідної групи лактози з йодом у лужному середовищі, де йод є окисником. Атомарний кисень, що виділяється при цьому, окиснює лактозу в лактобіонову кислоту(глюкозу – в глюконову кислоту), яка в лужному середовищі утворює сіль.
Реакція відбувається за схемою:
2NaOH + J2 → NaJ+ NaOJ + H2O;
C12H22O11 + NaOJ + NaOH → C12H21O12Na + NaJ + H2O;
Йод, який не прореагував з лактозою, визначають титруванням розчином натрій тіосульфату у кислому середовищі. Ця реакція також йде у дві стадії:
NaOJ + NaJ + H2SO4 → J2 + Na2SO4 + H2O;
J2 + 2Na2S2O3 → 2NaJ + Na2S4O6.
Хід роботи. Зважують з точністю до0,01 г 10 мл молока і переносять у мірну колбу місткістю 250 мл, обмивають склянку, в якій зважувалось молоко, дистильованою водою і переливають суміш у мірну колбу. Доливають у мірну колбу воду до половини місткості і перемішують. Для осадження білків і жирів додають 10 мл розчину купрум сульфату і4 мл 1 н розчину натрій гідроксиду, перемішуючи рідину після вливання кожного реактиву. Доливають до позначки водою, знову перемішують і залишають відстоюватись протягом30 хв. Відстояну рідину фільтрують у суху колбу через складчастий ,фільтрне
7
враховуючи перші 10 – 20 мл фільтрату.
Переносять 25 мл фільтрату, що відповідає 1 г молока, в конічну колбу місткістю 250 – 300 мл, в іншу таку саму колбу вносять25 мл дистильованої води (контрольний дослід). В обидві колби додають по25 мл 0,1 н розчину йоду і одразу при постійному перемішуванні повільно приливають з бюретки
по 37,5 мл 0,1 н |
розчину натрій гідроксиду. Колби |
закривають |
гумовими |
пробками і витримують протягом 20 хв у темному місці при температурі20 °С |
|||
(±2 °С). Потім у |
кожну колбу вливають по8 мл 0,5 н розчину хлоридної |
||
кислоти і титрують ,йодщо виділився розчином |
натрій |
тіосульфату в |
|
присутності індикатора (1,0 %-й розчин крохмалю). |
|
|
Титрування проводять спочатку повільно без індикатора до появи світложовтого забарвлення розчину, потім доливають 1 мл індикатору і продовжують титрувати до моменту, коли від однієї краплини розчину натрій тіосульфату сине забарвлення зникає.
Вміст лактози, %, обчислюють за формулою:
Л = |
0,01801×(А - В)×0,97 |
×100%, |
(1.2) |
|
|||
|
n |
|
де 0,01801 – кількість лактози, еквівалентна 1 мл 0,1 н розчину йоду, г; A і B – кількість 0,1 н розчину натрій тіосульфату, витраченого на титрування йоду у відповідно контрольній і дослідній пробах, мл; 0,97 – поправка, встановлена емпірично; n – наважка молока, г; 100 – коефіцієнт перерахунку у відсотки.
Аналізують одержані результати, складають висновки і рекомендації.
Запитання для самоперевірки
1.На які групи поділяються вуглеводи?
2.Яке значення вуглеводів для живих організмів?
3.Яке значення вуглеводів у харчових виробництвах?
4.У чому полягає принцип визначення крохмалю за Еверсом?
5.У чому суть йодометричного методу визначення альдоз?
6.Який принцип лежить в основі визначення лактози?
|
|
2. ЛІПІДИ |
|
|
|
||
Ліпідами називаються неоднорідні за хімічною |
будовою |
речовини, |
|||||
загальною |
властивістю |
яких |
є |
розчинність |
у |
неполярних |
органічн |
розчинниках: ефірі, ацетоні, хлороформі, бензолі тощо.
За своєю будовою ліпіди– здебільшого складні ефіри вищих жирних кислот з гліцерином чи іншими спиртами. До складу деяких ліпідів, окрім цих компонентів, входять ортофосфатна кислота, азотисті основи чи вуглеводи тощо.
Ліпіди поділяються напрості (нейтральні жири (гліцериди); стериди, воски) та складні (фосфоліпіди; гліколіпіди).
Функції цього класу сполук важливі й різноманітні. Ліпіди – структурні елементи клітин; джерело енергії для організму(при окисненні 1 г жиру виділяється 39 кДж енергії, тобто вдвічі більше, ніж при розщепленні1 г вуглеводів). Вони виконують захисну функцію та є субстратом для синтезу біологічно активних речовин.
8
Властивості жирів залежать від співвідношення насичених і ненасичених жирних кислот, що містяться в них. Кількість та якість жирів впливають на біологічну цінність харчових продуктів.
Показники жирів, які відзначаються деякою сталістю, називають числами або константами жиру. Вони характеризують природу жиру та його якість. З хімічних констант найбільше значення мають кислотне та йодне числа, число омилення, ефірне число тощо.
|
|
2.1. Визначення кислотного числа |
|
|
||||
Кислотне |
число – це кількість міліграмів калій гідроксиду, потрібна для |
|||||||
нейтралізації вільних жирних кислот, що містяться в 1 г жиру. |
|
|
||||||
Кислотне |
число |
разом |
із |
іншими |
фізико-хімічними |
показникам |
||
характеризує якість жиру. Так, в олії, виготовленій із дозрілого насіння, вільних |
||||||||
жирних кислот мало, тому кислотне число низьке; олія із недозрілого насіння |
||||||||
має значний вміст вільних жирних кислот– кислотне число зростає. При |
||||||||
зберіганні жиру спостерігається накопичення вільних |
жирних |
кислот за |
||||||
рахунок |
руйнування |
складноефірних |
зв’язків |
у , |
жирахтобто |
зростає |
||
кислотність. Підвищення |
кислотності вказує на зниження |
якості |
жиру, що |
супроводжується появою неприємного запаху та смаку.
Мета роботи: засвоєння методики визначення кислотного числа. Завдання на виконання роботи: визначити кислотне число у різних видах
жирів.
Апаратура: водяна баня.
Лабораторний посуд: колби конічні місткістю50 – 100 мл; бюретки для титрування; піпетки; циліндри мірні.
Матеріали та реактиви: спиртово-ефірна суміш (суміш спирту та ефіру у співвідношенні 1:1, нейтралізована 0,1 н розчином калій гідроксиду до рожевого забарвлення за наявності фенолфталеїну); 1,0 %-й спиртовий розчин фенолфталеїну; 0,1 н спиртовий (96%-й спирт) розчин калій гідроксиду; олія або тваринний жир.
Принцип методу полягає в тому, що вільні жирні кислоти, які містяться в жирі, відтитровують 0,1 н розчином калій гідроксиду.
Хід роботи: 2 – 3 г жиру вмішують у конічну колбу місткістю 50 – 100 мл, розтоплюють у водяній бані з температурою50 – 60 °С і розчиняють у20 мл спиртово-ефірної суміші. До прозорого розчину доливають3 – 4 краплини фенолфталеїну і при постійному переміщуванні титрують0,1 н спиртовим розчином калій гідроксиду до появи блідо-рожевого забарвлення, яке після перемішування не зникає упродовж 0,5 – 1,0 хв.
Кислотне число, мг/г, обчислюють за формулою:
КЧ = |
V ×T × |
5,61 |
, |
(2.1) |
n |
|
|||
|
|
|
|
де V – кількість 0,1 н розчину лугу, використаного на титрування, мл; Т – коефіцієнт поправки на титр0,1 н розчину калій гідроксиду; 5,61 – коефіцієнт перерахунку мілілітрів 0,1 н розчину калій гідроксиду в міліграми; n – наважка жиру, г.
Аналізують одержані результати, складають висновки і рекомендації.
9
2.2. Визначення числа омилення
Число омилення – це кількість міліграмів калій гідроксиду, потрібна для омилення зв'язаних і нейтралізації вільних жирних кислот, що містяться в 1 г жиру.
Кількість калій гідроксиду, потрібного для омилення 1 г жиру, залежить від молекулярної маси жирних кислот, що входять до його складу. Що більша молекулярна маса жирних кислот, які входять до складу жиру, то менше
молекул буде в 1 г жиру і менше калій гідроксиду піде на омилення. |
|
|||
Мета роботи: засвоєння методу визначення числа омилення. |
|
|||
Завдання на виконання роботи: визначити число |
омилення у |
різних |
||
видах жирів. |
|
|
|
|
Апаратура: аналітичні терези; водяна баня. |
|
|
|
|
Лабораторний |
посуд: колби конічні місткістю |
50 |
мл; бюретки |
для |
титрування; піпетки; |
циліндри мірні; холодильник |
зворотний; лійки |
для |
|
фільтрування. |
|
|
|
|
Матеріали та реактиви: 0,5 н спиртовий розчин калій гідроксиду(30 г хімічно чистого КОН розчиняють в 1 л етилового спирту при нагріванні в колбі із зворотним холодильником, через добу розчин фільтрують і зберігають у склянці з темного скла); 0,5 н розчин хлоридної кислоти; 1,0 %-й розчин фенолфталеїну; олія або тваринний жир; фільтрувальний папір.
Принцип методу полягає у зв'язуванні(омиленні) калій гідроксидом жирних кислот, які входять до складу жиру, і нейтралізації вільних жирних кислот.
Рівняння реакція омилення: |
|
|
|
|
||
|
CH2OCOR |
|
|
|
CH2OН |
+ 3 RСООК |
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
CHOCOR |
+ 3 КОН |
CHOН |
||||
|
|
+ КОН |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
CH2OН |
|
||
CH2OCOR |
|
|
||||
|
|
|
|
|
||
На омилення однієї молекули жиру використовується три молекули калій |
||||||
гідроксиду. Кількість |
лугу, який не |
прореагував |
із жиром, відтитровують |
розчином хлоридної кислоти.
Хід роботи. В одну колбу місткістю50 мл вносять 0,5 г жиру, зваженого на аналітичних терезах, а в другу– 0,5 мл води; потім в обидві додають з бюретки по 15 мл 0,5 н спиртового розчину калій гідроксиду. Колби з'єднують
із зворотним холодильником і кип'ятять у водяній бані при періодичному струшуванні протягом 30 – 40 хв до повного омилення жиру і нейтралізації жирних кислот. До прозорого та однорідного мильного розчину додають15 – 20 мл води, 3 – 4 краплини фенолфталеїну і титрують 0,5 н розчином хлоридної кислоти до зникнення рожевого забарвлення. Паралельно проводять контрольний дослід.
Число омилення, мг/г, обчислюють за формулою:
10