Вопросы для подготовки

1. Сложные способы окраски, цели их использования. Тинкториальные свойства бактерий.

2. Строение клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий. Техника и механизм окраски по Граму.

3. Строение клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий. Техника и механизм окраски по Цилю-Нильсену.

4. L-формы бактерий, определение понятия, причины возникновения. Роль в патологии человека. ОтличияL-форм бактерий от протопластов и микоплазм.

5. Строение клеточной стенки грибов и дрожжей.

Задания для подготовки

Выполнить рисунки клеточных стенок грамположительных, грамотрицательных, кислотоустойчивых бактерий и грибов в альбоме, подписать все структурные компоненты:

Рис. 1 Клеточная стенка грамположительных бактерий	Рис. 2 Клеточная стенка грамотрицательных бактерий
Рис. 3 Клеточная стенка кислотоустойчивых бактерий	Рис. 4 Клеточная стенка грибов

Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель: Освоить сложный способ окраски бактерий по Граму.

Задание.Приготовить фиксированный микропрепарат из смеси двух бактерийBacillus cereusиEscheriсhia coli, окрасить по Граму, микроскопировать с объективом 90и иммерсией. При микроскопии определить форму бактерий и отношение их к окраске по Граму. Препарат зарисовать. Заполнить таблицу.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Окраска по Граму

1. Приготовить тонкий и равномерный мазок, без скоплений клеток в определенном участке.

2. Высушить мазок на воздухе.

3. Зафиксировать жаром.

4. Окрасить мазок 1%-ным \ раствором генцианового фиолетового, красить 1-2 мин.

5. Слить краситель (не в коем случае не промывать водой!!!).

6. Обработать мазок раствором Люголя 1-2 мин.

7. Обильно промыть препарат водой.

8. Погрузить мазок в раствор 95%-ного этанола на 60 с, препарат слегка покачивать для равномерного отхождения фиолетовых струек краски.

9. Промыть препарат водой.

10. Окрасить препарат дополнительно фуксином.

11. Высушить препарат на воздухе.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Ингредиенты окраски по Граму	Назначение основных ингредиентов	Рисунок с обозначениями
1.
2.
3.
4.

Вывод: (Ответить на вопрос каков механизм окраски по Граму?)

Р а б о т а №2

Цель:Освоить сложный способ окраски кислотоустойчивых бактерий по Цилю-Нильсену.

Задание.Приготовить фиксированный микропрепарат из смеси двух бактерийMycobacterium tuberculosisиStaphylococcus aureus, окрасить по Цилю-Нильсену, микроскопировать с объективом 90и иммерсией. При микроскопии определить наличие в препарате и форму кислотоустойчивых и некислотоустойчивых бактерий. Препарат зарисовать. Заполнить таблицу.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Окраска по Цилю-Нильсену

1. Приготовить тонкий и равномерный мазок, без скоплений клеток в определенном участке.

2. Высушить мазок на воздухе.

3. Зафиксировать жаром.

4. Окрасить мазок карболовым фуксином Циля (наносить через фильтровальную бумагу!!!) с подогреванием до появления паров, но не доводя краситель до кипения, красить 3-5 мин.

5. Слить краситель и промывать препарат водой.

6. Погрузить препарат на 3-5 с в 5%-ный раствор серной или соляной кислоты для обесцвечивания.

7. Обильно промыть препарат водой.

8. Докрасить препарат метиленовым синим Леффлера в течение 3-5 мин.

9. Высушить препарат на воздухе.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Ингредиенты окраски по Цилю-Нильсену	Назначение основных ингредиентов	Рисунок с обозначениями
1.
2.
3.

Вывод: (Ответить на вопросы: 1. Каков механизм окраски по Цилю-Нильсену? 2. В диагностике каких заболеваний используется данный способ окрашивания?)

_____________________________________________________________________________



занятие №3:	Строение бактериальной клетки Морфология грибов Методы выявления структур бактериальной клетки и изучения морфологии грибов
УЧЕБНАЯ Цель:	Изучить строение бактериальной клетки и морфологию грибов.