БХ-методичка

среднем 25-30 г мочевины в сутки. При печеночной недостаточности синтез мочевины ослабляется, поэтому ее концентрация в крови уменьшается.

При почечной или сердечно-сосудистой недостаточности выделение мочевины с мочой уменьшается, а уровень в крови повышается, в результате чего развивается уремия - отравление организма продуктами азотистого обмена. Количество мочевины в крови увеличивается также при усилении катаболизма белков (лучевая болезнь, злокачественные образования, интоксикации, лихорадка и др.). Анализ является обязательным при обследовании и оценки состояния больных с заболеваниями почек и печени.

Цель и исходный уровень знаний.

Общая цель.

Уметь анализировать изменения концентрации мочевины в крови и интерпретировать полученные результаты. Освоить унифицированный метод количественного определения мочевины в крови. Изучить этапы биосинтеза мочевины.

Конкретные цели:

1.Трактовать метаболические закономерности образования и обезвреживания аммиака, циркуляторного транспорта аммиака, биосинтеза мочевины.

2.Анализировать изменения в системах транспорта и обезвреживания аммиака при генетических аномалиях ферментов метаболизма аммиака.

Исходный уровень знаний-умений: знать химическую структуру мочевины и веществ, которые принимают участие в процессах обезвреживания аммиака.

Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке к занятию.

Содержание		и	Указания к учебным действиям
последовательность действий
1.	Практическое	изучение	1.1. Определение содержания мочевины
определения		содержания	в сыворотке крови.
мочевины в сыворотке крови.
2.	Образование	аммиака и	2.1. Пути образования аммиака.
процессы		срочного	2.2.		Объяснить				молекулярные
обезвреживания его в организме.			механизмы		токсического			влияния		аммиака
			на организм.
			2.3. Циркуляторный транспорт аммиака.
			2.4. Расскажите о 4 молекулярных
			механизмах		срочного			обезвреживания
			аммиака.		Какие		существуют			пути
			использования			организмом			образованных
			азотистых продуктов?
3. Биосинтез мочевины.			3.1.	Какие		процессы			поставляют
			свободный аммиак на первом этапе синтеза
			мочевины? Hапишите реакции синтеза
			глутамина, каpбомаилфосфата?
			3.2.	Дать		общую		характеристику
			процесса биосинтеза мочевины, химизм
			реакций, названия ферментов.
4.	Клиническое	значение	4.1.		Первичные			и	вторичные
исследования мочевины в крови			гипераммониэмии (причины и последствия).

51

и моче.	4.2. Объясните изменения показателей
	обмена белков при уремии, печеночной и
	почечной	недостаточности,	лучевой
	болезни.
	4.3.	Приведите цифровые	значения
	содержания в норме в крови аммиака,
	мочевины, суточное выделения их с мочой.
	При заболевании, каких органов и систем
	врачу необходимо назначать анализ на
	содержание мочевины в крови и моче?

Задание для индивидуальной самостоятельной работы студентов.

1.Оценивать по биохимическим показателям нарушение процессов обезвреживания аммиака при врожденных и приобретенных пороках метаболизма.

2.Подготовить схемы в электроном варианте:

а) орнитиновый цикл обезвреживания аммиака; б) взаимосвязь процесса образования мочевины с дезаминированием,

переаминированием аминокислот и энергетическим обменом.

3. Взаимосвязь двух циклов Кребса (орнитинового и трикарбоновых кислот).

Алгоритм лабораторной работы.

Количественное определение содержания мочевины в крови с диацетилмонооксимом.

Принцип метода: мочевина образует с диацетилмонооксимом комплекс розовокрасного цвета. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации мочевины в крови.

Ход работы.

1	пробирка – опыт	2	пробирка – стандарт	3	пробирка – контроль
0,1 мл опыта		0,1 мл стандарта		0,1 мл воды
2	мл рабочего раствора	2	мл рабочего раствора	2	мл рабочего раствора

Кипятить 10 минут на водяной бане все пробирки, после охлаждения колориметрировать против контроля при λ=540 нм (зеленый светофильтр), кювета 5 мм

Расчет:

Еоп.

Мочевина = --------- * 16,65 = ммоль/л, где Еоп. – экстинкция опытной пробы,

Ест.

Ест. – экстинкция стандартной пробы (в 1 мл 16,65 ммоль/л мочевины) Концентрация мочевины в сыворотке крови 3,3-8,3 ммоль/л Экскреция с мочой 20-30 г/сут

Тема 27. Биосинтез порфиринов. Наследственные нарушения обмена порфиринов.

Актуальность темы.

В результате обмена в организме гемоглобина, миоглобина, цитохромов и других гемопротеидов, в состав которых входят тетрапиррольные простетические группы, происходит образование пигментов – порфиринов. Существуют наследственные нарушения синтеза порфиринов – порфирии. В зависимости от места проявления специфического ферментного дефекта, различают эритропоэтические и печеночные порфирии. Основными клиническими проявлениями порфирий являются повышение чувствительности к свету, неврологические нарушения.

52

Цель и начальный уровень знаний-умений.

Общая цель.

Изучить процесс синтеза порфиринов. Уметь использовать знание о наследственных нарушениях обмена порфиринов.

Конкретные цели: объяснять биохимические принципы регуляции обмена порфиринов, возникновения и развития наследственных нарушений синтеза порфиринов – порфирий.

Исходный уровень знаний-умений: уметь писать строение предшественников пиррольных колец порфиринов (глицина, сукцинил-КоА). Знать строение порфиринов.

Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке к занятию.

Содержание	и	Указания к учебным действиям
последовательность действий
1. Практическое изучение		1.1.	Исследование промежуточных	продуктов
исследования	промежуточных	биосинтеза порфиринов.
продуктов	биосинтеза
порфиринов.
2. Метаболизм порфиринов.		2.1. Порфирины: структура, биологическая роль.
		2.2. Реакции биосинтеза протопорфирина IX;
		образование гема.
		2.3. Регуляция синтеза порфиринов.
		2.4.	Наследственные нарушения	обмена
		порфиринов (энзимопатии): эритропоэтическая
		порфирия, печеночные порфирии, неврологические
		нарушения, фотодерматиты.

Задание для самостоятельной работы студентов.

Ситуационные задачи.

1. Составить схему синтеза гема и указать на ней ферменты, нарушение синтеза которых приводит к развитию порфирий.

2.Составить сравнительную схему эритропоэтических и печеночных порфирий (вид порфирии, дефект фермента, плазма крови, моча, кал, доминирующий синдром).

3.Суточная экскреция с мочой порфиринов у больного П. составила 500 мкг, а порфобилиногена - 800 мкг, содержание эритроцитов в крови значительно снижено. Из анамнеза оказалось, что больной П. использовал для приготовления пищи глиняную посуду, в которой, как показал анализ, было повышено содержание свинца.

Нарушением синтеза какого вещества	обусловлена данная патология?
Ингибирование какого фермента произошло?

Алгоритм лабораторной работы.

Исследование промежуточных продуктов биосинтеза порфиринов и их накопления при порфириях.

1. Реакция Богомолова.

К 10 мл мочи добавляют 2-3 мл насыщенного раствора сульфата меди. Если происходит помутнение, к образованной гидроокиси меди добавляют несколько капель соляной кислоты. Через 5 минут добавляют 2-3 мл раствора хлороформа. При наличии уробилина хлороформ оседает на дно пробирки и окрашивается в розово-красный цвет.

53

К 1 мл мочи добавляют 5 кап. 5% раствора CuSO4 и 0,5 мл хлороформа. Перемешивают. При позитивной реакции нижний слой окрашивается в розовый цвет.

2. Проба Шварца-Уотсона.

К 5 мл мочи добавляют несколько капель реактива Эрлиха (2 части диметилпараминобензальдегида, 98 частей 20% раствора соляной кислоты), потом добавляют 1 мл хлороформа и несколько раз взбалтывают. Характерный для острой порфирии порфобилиноген, или красный продукт его конденсации, остается при добавлении хлороформа в водной фазе, тогда как желчные пигменты переходят в хлороформ.

Итоговый контроль усвоения модуля ІІ

ОБЩИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ МЕТАБОЛИЗМА. “Метаболизм углеводов, липидов, аминокислот и его регуляция”.

1. Применять знание общих закономерностей метаболизма в процессе последующей учебы и профессиональной деятельности для анализа патогенеза и клинической диагностики заболеваний, а также контроля медикаментозной терапии и обоснования метаболической терапии заболеваний.

2. Использовать теоретические и практические навыки по биохимии и патохимии при изучении клинических дисциплин и в клинической биохимии.

Перечень вопросов для итогового контроля модуля ІІ: І. Теоретическая подготовка.

1.Биохимические компоненты клетки, их биохимические функции. Классы биомолекул. Иерархия биомолекул, их происхождение.

2.Ферменты: определение; свойства ферментов как биологических катализаторов.

3.Классификация и номенклатура ферментов, характеристика отдельных классов ферментов.

4.Строение и механизмы действия ферментов. Активный и аллостерический (регуляторный) центры.

5.Кофакторы и коферменты. Строение и свойства коферментов; витамины как предшественники в биосинтезе коферментов.

6.Коферменты: типы реакций, которые катализируют отдельные классы коферментов.

7.Витамин В1 (тиамин): строение, биологические свойства, механизм действия.

8.Витамин В2 (рибофлавин): строение, биологические свойства, механизм действия.

9.Витамин РР (никотиновая кислота, никотинамид): строение, биологические свойства, механизм действия.

10.Витамин В6 (пиридоксин): строение, биологические свойства, механизм действия.

11.Витамин В12 (кобаламин): биологические свойства, механизм действия.

12.Витамин Вс (фолиевая кислота): биологические свойства, механизм действия. 13.Витамин Н (биотин): биологические свойства, механизм действия.

14.Витамин В3 (пантотеновая кислота): биологические свойства, механизм действия.

15.Витамин С (аскорбиновая кислота): строение, биологические свойства, механизм действия.

16.Витамин Р (флавоноиды): строение, биологические свойства, механизм действия.

54

17.

Изоферменты, особенности строения и функционирования, значения в

диагностике заболеваний.

18.

Механизмы действия и кинетика ферментативных реакций: зависимость

скорости реакции от концентрации субстрата, рН и температуры.

19.

Активаторы и ингибиторы ферментов: примеры и механизмы действия.

20.

Типы ингибирования ферментов: обратимое (конкурентное, неконкурентное) и

необратимое ингибирование.

21.

Регуляция ферментативных процессов. Пути и механизмы регуляции:

аллостерические ферменты; ковалентная модификация ферментов.

22.

Циклические нуклеотиды (цАМФ, цГМФ) как регуляторы ферментативных

реакций и биологических функций клетки.

23.

Энзимопатии – врожденные (наследственные) дефекты метаболизма

углеводов, аминокислот, порфиринов, пуринов.

24.

Энзимодиагностика патологических процессов и заболеваний.

25.

Энзимотерапия – применение ферментов, их активаторов и ингибиторов в

медицине.

26.

Принципы и методы выявления ферментов в биообъектах. Единицы измерения

активности и количества ферментов.

27.

Обмен веществ (метаболизм) - общие закономерности протекания

катаболических та анаболических процессов.

28.

Общие стадии внутриклеточного катаболизма биомолекул: белков, углеводов,

липидов.

29.

Цикл

трикарбоновых

кислот.

Локализация,

последовательность

ферментативных реакций, значения в обмене веществ.

30.

Энергетический баланс цикла трикарбоновых кислот. Физиологичное значение

реакций ЦТК.

31.

Реакции

биологического

окисления;

типы

реакций

(дегидрогеназная,

оксидазная, оксигеназная) и их биологическое значение. Тканевое дыхание.

32.

Ферменты биологического окисления

в митохондриях:

пиридин-,

флавин-

зависимые дегидрогеназы, цитохромы.

33.

Последовательность

компонентов

дыхательной

цепи

митохондрий.

Молекулярные комплексы внутренних мембран митохондрий.

34.

Окислительное фосфорилирование: пункты сопряжения транспорта электронов

и фосфорилирования, коэффициент окислительного фосфорилирования.

35.

Хемиосмотическая

теория

окислительного

фосфорилирования,

АТФ-

синтетаза

митохондрий.

36.

Ингибиторы транспорта электронов и разобщители окислительного

фосфорилирования.

37.

Микросомальное окисление: цитохром Р-450; молекулярная организация цепи

переноса электронов.

38.

Анаэробное окисление глюкозы, общая характеристика процесса.

39.

Аэробное окисление глюкозы. Этапы превращения глюкозы до СО2 и Н2О.

40.

Окислительное декароксилирование пирувата. Ферменты, коферменты и

последовательность реакций в мультиферментном комплексе.

41.

Сравнительная характеристика биоэнергетики

аэробного

и

анаэробного

окисления глюкозы,

эффект Пастера.

42.

Фосфоролитический

путь

расщепления гликогена в печени

и

мышцах.

Регуляция активности гликогенфосфорилазы.

43.

Биосинтез гликогена: ферментативные реакции, физиологичное значение.

Регуляция активности гликогенсинтазы.

44.

Механизмы

реципрокной

регуляции гликогенолиза и

гликогенеза

за

счет

каскадного цАМФ-зависимого фосфорилирования ферментных белков.

55

45.	Роль адреналина, глюкагона и инсулина в гормональной регуляции обмена
	гликогена в мышцах и печени.
46.	Генетические нарушения метаболизма гликогена (гликогенозы, агликогенозы).
47.	Глюконеогенез: субстраты, ферменты и физиологичное значение процесса.
48.	Глюкозо-лактатный (цикл Кори) и глюкозо-аланиновый циклы.
49.	Глюкоза крови (глюкоземия): нормогликемия, гипо- и гипергликемии,
	глюкозурия. Сахарный диабет – патология обмена глюкозы.
50.	Гормональная регуляция концентрации и обмена глюкозы крови.
51.	Пентозофосфатный путь окисления глюкозы: схема процесса и биологическое
	значение.
52.	Метаболические пути превращения фруктозы и галактозы; наследственные
	энзимопатии их обмена.
53.	Катаболизм	триацилглицеролов в адипоцитах жировой ткани:
	последовательность		реакций,	механизмы регуляции	активности
	триглицеридлипазы.
54.	Нейрогуморальная		регуляция	липолиза при участии	адреналина,

норадреналина, глюкагона и инсулина.

55.Реакции окисления жирных кислот (β-окисление); роль карнитина в транспорте жирных кислот в митохондрии.

56.Окисление глицерола: ферментативные реакции, биоэнергетика.

57.Кетоновые тела. Реакции биосинтеза и утилизации кетоновых тел, физиологическое значение.

58.Нарушение обмена кетоновых тел в условиях патологии (сахарный диабет, голодание).

59.Биосинтез высших жирных кислот: реакции биосинтеза насыщенных жирных кислот (пальмитата) и регуляция процесса.

60.Биосинтез моно- и полиненасыщенных жирных кислот в организме человека.

61.Биосинтез триацилглицеролов и фосфоглицеридов.

62.Метаболизм сфинголипидов. Генетические аномалии обмена сфинголипидов

– сфинголипидозы.

63.Биосинтез холестерина: схема реакций, регуляция синтеза холестерина.

64.Пути биотрансформации холестерина: этерификация; образования желчных кислот, стероидных гормонов, витамина D3.

65.	Циркуляторный транспорт и депонирование липидов в жировой ткани.
	Липопротеинлипаза эндотелия.
66.	Липопротеины плазмы крови: липидный и белковый (апопротеины) состав.
	Гипер-липопротеинемии.

67.Патологии липидного обмена: атеросклероз, ожирение, сахарный диабет.

68.Пул свободных аминокислот в организме: пути поступления и использования свободных аминокислот в тканях.

69.Трансаминирование аминокислот: реакции и их биохимическое значение, механизмы действия аминотрансфераз.

70.Прямое и непрямое дезаминирование свободных L-аминокислот в тканях.

71.Декарбоксилирование L-аминокислот в организме человека. Физиологичное значение образованных продуктов. Окисление биогенных аминов.

72.Пути образования и обезвреживания аммиака в организме.

73.Биосинтез мочевины: последовательность ферментных реакций биосинтеза, генетические аномалии ферментов цикла мочевины.

74.Общие пути метаболизма углеродных скелетов аминокислот в организме человека. Глюкогенные и кетогенные аминокислоты.

75.Биосинтез и биологическая роль креатина и креатинфосфата.

76.Глутатион: строение, биосинтез и биологические функции глутатиона.

56

77.	Специализированные пути метаболизма циклических аминокислот			–
	фенилаланина и тирозина.
78.	Наследственные	энзимопатии	обмена циклических аминокислот	–
	фенилаланина и тирозина.
79.	Метаболизм порфиринов: строение гемма; схема реакций биосинтеза
	протопорфирина IX и гема.

Практическая подготовка.

1.1. Подготовка материала (биологические жидкости, клетки, субклеточны органелы) к проведению биохимических исследований.

2.2. Построение графиков зависимости скорости ферментативной реакции о концентрации субстрата, изменений рН среды и температуры.

3.3. Объяснять механизм превращения субстрата при каталитическо действии ферментов.

4.4. Написание структурных формул коферментных витаминов и объяснят механизм образования их биологически активных (комплексных) форм.

5.5. Объяснять механизм протекания ферментативных реакций при участи коферментов.

6.6. Воспроизведение последовательных этапов общих путей катаболизм белков, углеводов и липидов.

7.7. Написание последовательности реакций превращения интермедиатов цикле е трикарбоновых кислот.

8.Рисовать схему и объяснять строение и механизм действия цеп транспортаа электронов.

9.9. Объяснять на основе положений хемиоосмотической теории механиз сопряжения, окисления и фосфорилирования, синтеза АТФ в дыхательно цепи.

10.Выявление глюкозы в растворах реакцией Троммера, Фелинга. Написать уравнение.

11.Определение глюкозы в крови глюкозооксидазным методом (Городецкого). Написать уравнение реакции которая лежит в основе этого метода. Какова в норме концентрация глюкозы в крови человека?

12.Определение глюкозы в крови методом Хагедорна-Йенсена. Объясните принцип.

13.Выявление фруктозы реакцией Селиванова. Принцип метода.

14.Выявление гликогена в печени. Как может быть использован гликоген печени? Где еще накапливается в организме человека гликоген?

15.Определение конечного продукта анаэробного гликолиза – молочной кислоты методом Уффельмана. Принцип метода.

16.Выявление ацетона (кетоновых тел) в моче (реакциями с нитропруссидом натрия и хлоридом железа). Выявление кетоновых тел в моче експрессметодом. Принципы методов. Значение выявления кетоновых тел в крови и моче для медицины.

17.Выявление ацетона йодоформной реакцией. Написать эту реакцию.

18.Определение содержания пировиноградной кислоты в биологических жидкостях колориметрическим методом. Объясните принцип. Как строится калибровочная кривая?

19.Определение сиаловых кислот реактивом Гесса. Какое клиническое значение имеет определение концентрации сиаловых кислот в крови?

20.Выявление холестерола методом Сальковского. Принцип метода.

57

21.Выявление холестерола методом Либермана-Бурхарда. Принцип метода. Какая в норме концентрация холестерола в крови человека?

22.Изучение кинетики действия липазы поджелудочной железы. Какие соединения в организме активируют липазу? Проиллюстрируйте ответ результатами практической работы.

23.Воспроизведите в эксперименте процесс переаминирования с использованием глутаминовой и пировиноградной кислот. Использование метода хроматографии для оценки результатов. Напишите уравнение соответствующих реакций.

24.Определение активности аланинаминотрансферразы и аспартатаминотрансферразы. Принцип метода. Значение определения этих ферментов для медицины.

25.Определение мочевины в моче цветной реакцией с диацетилмонооксимом. Написать реакции образования мочевины в организме.

26.Определение аммиака в моче. Принцип метода.

27.Определение креатинина в моче цветной реакцией Яффе. При каких условиях наблюдается увеличение или уменьшение количества креатинина в моче?

28.Выявление желчных пигментов в моче реакцией Гмелина. Поясните процесс образования желчных пигментов в организме.

29.Выявление уробилина в моче реакцией Богомолова. Принцип метода. Когда уробилин присутствует среди желчных пигментов в моче?

30.Качественная реакция на фенилпировиноградную кислоту (проба Фелинга). Принцип метода. При каком заболевании фенилпировиноградная кислота появляется в моче?

МОДУЛЬ 3 МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОЛОГИЯ. БИОХИМИЯ МЕЖКЛЕТОЧНЫХ

КОММУНИКАЦИЙ.

БИОХИМИЯ ТКАНЕЙ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ

Тема 1. Строение и функции нуклеиновых кислот.

58

Актуальность темы. Изучение строения и свойств нуклеопротеидов имеет биологическое в общих чертах и практическое значение для медицины: формирует на молекулярном уровне понятия о наследственности и изменчивости, хранении и реализации наследственной информации. Знание материала темы важно для понимания природы наследственных заболеваний, причины их возникновения, а также подхода к лечению генетических болезней.

Цель и исходный уровень знаний.

Общая цель. Уметь применять знания о нуклеопротеидах для объяснения наследственных болезней, обоснования методов их лечения и профилактики.

Конкретные цели:

1.Объяснить строение и функции нуклеиновых кислот.

2.Сделать выводы относительно биологической роли нуклеиновых кислот.

3.Анализировать уровни структурной организации нуклеиновых кислот.

Исходный уровень знаний-умений.

Уметь писать формулы азотистых оснований, пентоз.

Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке к занятию.

Содержание		и	Указания к учебным действиям
последовательность действий
1.	Практическое	изучение	1.1. В тетрадь протоколов практических
качественного		состава	занятий выписать алгоритм лабораторной
нуклеопротеидов.			работы	“Гидролиз		и	определение
			составных частей нуклеопротеидов”.
			1.2. Написать в тетрадь протоколов
			схему гидролиза полимера нуклеопротеида
			до составных компонентов.
			1.3.	В	тетрадь	самостоятельной
			подготовки выписать формулы составных
			компонентов ДНК, РНК, примеры строения
			их мономеров, схему связи мономеров
			ДНК и РНК.
2.	Строение и	функции	2.1. Биохимические функции НК и
нуклеиновых кислот (НК).			нуклеотидов.		Роль нуклеотидов			в
			образовании молекул НК.
			2.2.	Компоненты		нуклеотидов		и
			нуклеозидов.		Минорные		азотистые
			основания и нуклеотиды.
			2.3. Свободные нуклеотиды и их
			биохимические функции: участие в
			метаболических реакциях (АТФ, НАД,
			НАДФ, ФАД, ФМН, ЦТФ, УТФ) и их
			регуляции (циклические нуклеотиды – 3’,5’-
			цАМФ,		3’,5’-цГМФ).
			2.4. Нуклеиновые кислоты: структура,
			свойства, исторические этапы изучения.
			Первичная структура НК, полярность
			нуклеотидов,		особенности		первичной
			структуры ДНК и РНК.

59

2.5.Строение, свойства и биологические функции ДНК. Экспериментальные доказательства генетической роли ДНК (феномен трансформации). Молекулярная масса, размеры и нуклеотидный состав молекул ДНК вирусов, прокариотов и эукариотов.

2.6.Вторичная структура ДНК, роль водородных связей в ее образовании (правила Чаргаффа, модель УотсонаКрика). Антипараллельные цепи.

2.7.Третичная структура ДНК. Физикохимические свойства ДНК: взаимодействие

скатионными лигандами; гипохромный эффект; денатурация и ренатурация ДНК.

2.8.Строение, свойства и биологические эффекты РНК. Типы РНК: мРНК, тРНК, рРНК; особенности структурной организации (вторичной и третичной) разных типов РНК.

3.	Молекулярная		3.1.	Хроматин:	нуклеосомная
организация		ядерного	организация, гистоны и негистоновые
хроматина	и	рибосом	белки.
эукариотических клеток.			3.2. Рибосомы: субъединицы, состав
			белков и РНК.
4. Нуклеопротеины.			4.1. Строение и биологические функции
			нуклеопротеинов. Особенности строения
			белков нуклеопротеинов.

Индивидуальная самостоятельная работа студента:

1.Создать схему структурной организации нуклеиновых кислот.

2.Объяснить механизм образования двойной спирали ДНК.

3.Объяснить механизм образования шпилек в молекуле т-РНК.

4.Какие высокомолекулярные комплексы образуют нуклеиновые кислоты?

Алгоритм лабораторной работы.

Гидролиз и определение составных компонентов нуклеопротеидов.

Принцип метода. Определяют качественными реакциями в гидролизате нуклеиновых кислот дрожжей пентозы, азотистые основания, фосфорную кислоту, белок.

1.Определение пентоз. К 1 мл гидролизата добавить 0,1 мл реактива Фелинга, кипятить на водяной бане до образования красной окраски.

2.Определение азотистых оснований. К 0,3 мл гидролизата добавить 0,1 мл раствора азотнокислого серебра [AgNO3]; наблюдается образование белого осадка.

3.Определение фосфорной кислоты. К 2 мл гидролизата добавить 1 мл раствора

аммония молибденовокислого [(NH4)2MoO4], нагреть на водяной бане до образования желтого осадка. Добавление 1 мл раствора аскорбиновой кислоты дает синюю окраску.

4.Определение белка. К 1 мл гидролизата добавить 0,5 мл биуретового реактива. Наблюдается возникновение фиолетовой окраски.

60