Диагностика

Материал для исследования:

У женщин:

•    отделяемое влагалища;

•    первая порция мочи.

У мужчин:

•    отделяемое уретры;

•    первая порция мочи.

Диагностика основана на выявлении клинических признаков заболевания и обнаружении в исследуемом материале Trichofrionas vaginalis, однако при постановке диагноза не опираются исключительно На клинику по следующим причинам: .

1)    указанные клинические симптомы могут быть проявлениями других инфекций урогенитального тракта;

2)    классический и патогномоничный для трихомониаза «клубничный» симптом встречается только у 2% пациенток;

3)    пенистые выделения, которые можно связать с активным ростом трихомонад, наблюдаются примерно у 12 % инфицированных женщин.

В настоящее время применяют четыре лабораторных метода определения Trichomonas vaginalis: микроскопический, культуральный, иммунологический и генодиагностический.

Как и при других инфекционных заболеваниях, при трихомониазе диагностическая эффективность тестов в значительной степени зависит от качества взятия клинического материала для исследования и его правильной транспортировки в лабораторию. Самые лучшие тесты могут давать неправильные результаты при низком качестве взятия образца. Методики взятия образцов для тестирования, их хранения и транспортировки зависят от пола пациента, анатомической области взятия материала и метода тестирования. Врач, осуществляющий взятие материала для исследования на наличие трихомониаза, должен обеспечить:

•    высокое качество взятия образца;

•    точную маркировку образца;

•    своевременную и правильную транспортировку образца в лабораторию.

Важно помнить, что:

•    в течение 48-72 часов до взятия клинического материала обследуемый не должен получать антимикробную терапию;

•    образцы из уретры у мужчин и образцы первой порции мочи (ППМ) у лиц обоего пола следует получать после задержки мочеиспускания в течение не менее 2 часов перед обследованием.

Методы, применяемые для диагностики инфекции, вызываемой Т. vaginalis

•    Микроскопическое исследование нативного или окрашенного мазка отделяемого половых органов.

•    Культуральное исследование.

•    Методы амплификации нуклеиновых кислот (МАНК).

•    Иммунологические методы, направленные на обнаружение трихомонадного антигена, включая иммунохроматографический стрип-тест.

•    Определение антител (например, методом иммуноферментного анализа — ИФА).

Инструменты, необходимые для взятия образцов

•    Вагинальное зеркало.

•    Стерильный ватный/дакроновый тампон или одноразовая бактериологическая петля объемом 1 мкл и 10 мкл.

•    Предметные и покровные стекла (чистые, сухие и без царапин).

•    Стерильный физиологический раствор (оптимально — имеющий температуру 37 °С).

•    Стерильный контейнер для сбора первой порции мочи;

•    Пробирки с транспортной средой и/или средой для культивирования.

Получение и обработка образцов

Методы сбора образцов для тестирования на Т. vaginalis указаны в таблице.

Таблица

Методы взятия образцов для тестирования на Т. vaginalis

Образец	Методика взятия
Отделяемое влагалища	•    Очистить наружные половые органы стерильным марлевым тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором/ •    Ввести во влагалище теплое гинекологическое зеркало, смоченное стерильным физиологическим раствором. •    Материал собрать стерильным ватным/дакроновым тампоном или одноразовой бактериологической петлей объемом 10 мкл под контролем зрения из заднего и боковых сводов влагалища. •    У женщин после гистерэктомии образцы взять с боковых сводов влагалища. •    У девочек взять образцы через отверстие девственной плевы с задней стенки влагалища без использования гинекологического зеркала. •    У детей и женщин, не имевших в анамнезе половых контактов с проникновением, образцы взять из преддверия влагалища. •    Исследование вагинальных образцов, самостоятельно собранных пациенткой, и образцов, полученных врачом, показало сравнимые результаты при использовании культурального метода, тест-системы InPouchTM TV и МАНК
Первая порция мочи у женщин	• Образец ППМ (объемом 10-15 мл) собрать в стерильный контейнер, затем центрифугировать и исследовать осадок. Чувствительность тестов при исследовании мочи уступает таковой при исследовании вагинальных образцов

Отделяемое уретры	•    При наличии свободных выделений собрать их стерильным ватным/дакроновым тампоном или одноразовой бактериологической петлей объемом 1 мкл из наружного отверстия уретры. •    При отсутствии выделений перед взятием материала попросить пациента помассировать уретру скользящими движениями от основания пениса к его головке, затем осторожно ввести в уретру стерильный ватный/дакроновый тампон или одноразовую бактериологическую петлю объемом 1 мкл на глубину 2—4 см и получить выделения. Ложку Фолькмана для получения материала из уретры использовать не рекомендуется
Отделяемое препуциального мешка	•    Материал из препуциального мешка собрать стерильным ватным/ дакроновым тампоном. •    Стерильным тампоном, смоченным физиологическим раствором, очистить головку полового члена и внутреннюю поверхность препуциального мешка и таким образом получить образец для исследования
Первая порция мочи у мужчин	•    Исследовать центрифугат (объемом 600 мкл), полученный из 20 мл первой порции мочи. •    Перед взятием образцов пациент должен воздерживаться от мочеиспускания не менее 2 часов

Рекомендации по подготовке, транспортировке и хранению образцов, предназначенных для дальнейшего микроскопического исследования нативных и окрашенных акридиновым оранжевым препаратов, культивирования и применения МАНК, представлены в таблице.

Метод диагностики	Рекомендации	Комментарии
Исследование нативного препарата	•    Каплю теплого стерильного физиологического раствора (оптимальнаятемпература — 37 °С) помещают на предметное стекло. •    Образцы, собранные ватным/дакроновым тампоном или одноразовой бактериологической петлей, осторожно смешивают с физиологическим раствором и накрывают покровным стеклом. •    Препарат исследуют немедленно с помощью обычного светового микроскопа с применением различных методов контрастирования (светлое поле, фазовый контраст или темное поле)	-

Исследование нативного препарата	• Микроскопическое исследование нативного препарата желательно осуществлять непосредственно после взятия образца. В тех случаях, когда требуется транспортировка, препарат следует поместить в атмосферу <;влажной камеры» в чашку Петри (на увлажненную фильтровальную бумагу) и немедленно, не допуская охлаждения, доставить в лабораторию	-
Исследование  препарата, окрашенного акридиновым оранжевым	•    Полученный материал помещают на стекло, передвигая бактериологическую петлю по его поверхности с легким нажатием. •    Если образец был получен с помощью тампона, тампон прокатывают по поверхности стекла. •    Подготовленный препарат должен быть промаркирован, высушен при комнатной температуре и доставлен в лабораторию. •    Если препарат не может быть доставлен в лабораторию в течение 24 часов, он должен быть после высушивания фиксирован 80%этиловым спиртом в течение 3 минут, а перед окрашиванием подвергнут регидратации в течение 3 минут	•    Материал наносят на стекло тонким слоем. •    Для исследования необходим люминесцентный микроскоп. •    При несоблюдении правил взятия и условий доставки биологического материала (разбитые, не промаркированные, склеенные друг с другом стекла, отсутствие материала на стекле) образцы не подлежат микроскопическому исследованию
Культуральный	• Сразу после получения образец должен быть помещен в жидкую питательную среду или в транспортную среду Amies. В транспортной среде Stuart’s после 24 часов Т. vaginalis сохраняется недостаточно хорошо	Продолжительность хранения образцов должна соответствовать рекомендациям производителя транспортных систем, но не более 12 часов при комнатной температуре. Внимание! Колебание температур губительно действует на жизнеспособность Т. vaginalis
Методы амплификации нуклеиновых кислот	Полученный образец помещают в транспортную среду, предоставляемую производителем тест-системы или в сухую пробирку. Температура и продолжительность хранения образцов должны соответствовать рекомендациям производителя тест-системы	-

Трихомонада (окраска метиленовым синим)

Трихомонада (окраска по Граму)

Содержание:

1. История

2. Этиология

3. Классификация

4. Патогенез

5. Симптомы трихомониаза

6. Эпидемиология

7. Лечение

8. Профилактические мероприятия

9. Диагностика

10. Список литературы

Список литературы:

1. Учебник по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии под редакцией А.А. Воробьева 2003

2. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии под редакцией А.А. Воробьева А.С. Быкова 2003

3. Медицинская микробиология-Позднеев-2001-778с

4. Скрипкин Ю.К. Кожные и венерические болезни. Издательство «Триада – Х», Москва, 2000, с. 604;

5. Библиогр.: Бодяжина Б.И., Сметник В.П. и Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология, с 292, М., 1990;

6. Избранные разделы гинекологии, под ред. Г.М. Савельевой, М., 1984;

7. Ильин И.И. Негонококковые уретриты у мужчин, с, 153. М., 1983;

8. Кобозева Н.В. Методы обследования и лечения детей с гинекологическими заболеваниями, Л., 1978;

9. Титкинский О.Л., Новиков И.Ф. и Михайличенко В.В. Заболевания половых органов у мужчин, с. 25, Л., 1985;

10. Туранова Е.Н., Частикова А.В. и Антонова Л.В. Гонорея женщин, М., 1983.