3. Для диагностики поздних и латентных форм сифилиса большое значение имеет реакция Вассермана со спинномозговой жидкостью

Схема постановки опыта

№ п/п	Ингредиенты	Пробирки
		1	2	3	Контроли: антигена
					4 (ликвора)	антикомплементарность	Гемоток сичность
1.	Спинномозговая жидкость (неразведенная), мл	0,10	0,25	0,5	0,5
2.	Антиген в рабочей дозе (ультраозвученный из трепонем), мл	0,50	0,50	0,50	-	0,5	0,5
3.	Комплемент разведенный по титру (без % надбавок)	0,50	0,50	0,50	0,5	0,5	-
4.	Физраствор, мл	0,40	0,25	-	0,5	0,5	1,0
Инкубация в термостате 1 час при +37^о С
5.	Гемолитическая смесь, мл	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0
Инкубация в термостате 1 час при + 37^о С
Результаты у больного сифилисом		- Г	- Г	- Г	+ Г	+ Г	+ Г

Примечание: Спинномозговую жидкость не инактивируют, но если она содержит кровь, то её прогревают при + 56^о С 30 минут. Мутную жидкость центрифугируют.

4. Реакция иммобилизации бледных трепонем (pибt):

Принцип: угнетение движения бледных трепонем антителами сыворотки крови в присутствии комплемента.

Ингредиенты реакции:

- трепонемы - получают из яичка кролика, зараженного экспериментальным сифилисом. Яичко измельчают в специальной среде, не угнетающей подвижность спирохет;

- комплемент (сыворотка крови морской свинки);

- сыворотка обследуемого больного;

- сыворотка заведомо здорового человека.

Реакцию выполняют в меланжерах для лейкоцитов по Н. М. Овчинникову, который усовершенствовал методику Нельсона-Мауэра.

Схема постановки опыта:

№ п/п	Ингредиенты	№ меланжеров
		1	2 контр. компле мента		3	4 контр. антигена		5
1.	Сыворотка обследуемого	До метки 1	До метки 1		-	-		-
2.	Взвесь тканевых спирохет в смеси с активным комплементом	До метки 2		-	До метки 2		-		-
3.	Смесь тканевых спирохет с инактивированным комплементом			До метки 2	-		До Метки 2		-
4.	Взвесь тканевых спирохет без комплемента	-		-	-		-		До метки 2

Концы меланжера закрыть резиновой трубочкой (прекратить доступ воздуха). Поместить в термостат при + 35° С на 18 - 20 часов, после чего учитывать результаты:

- на оба края предметного стекла наносят по капле хорошо перемешанных смесей сыворотки с активированным и инактивированным комплементом;

- капли покрывают покровным стеклом 20 х 20 мм².

- с помощью микроскопа (темнопольного) определяют количество подвижных и неподвижных трепонем, сначала в капле с активным, потом с инактивированным комплементом;

- процент специфически иммобилизированных спирохет в и опыте определяют по формуле: Х = Tк-Тоx 1000, где

Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом);

То - число подвижных трепонем в опыте (с активным комплементом).

Результат считают положительным, если процент иммобилизации выше 50, слабоположительным - от 31 до 50, сомнительным - от 21 до 30, отрицательным - ниже 30.