7. Моча для проведения ПЦР–исследований (туберкулёз, ЦМВ, ИППП).
Мочу собирают утром натощак после сна или не ранее чем через 2-3 часа после последнего мочеиспускания.
Мочу (среднюю часть утренней порции или всю утреннюю порцию) собирают утром натощак после тщательного туалета гениталий.
При сборе мочи желательно использовать широкий сосуд с крышкой, по возможности собирать мочу сразу в посуду, в которой она будет доставлена в лабораторию.
Минимальный объем мочи, необходимый для проведения анализа, составляет 20 мл. Если в лабораторию доставляется не вся собранная моча, то перед тем, как часть мочи сливается в посуду для транспортировки, ее необходимо тщательно взболтать.
Собранную мочу доставляют в лабораторию в течение 1-3 часов без дополнительного охлаждения. Длительное хранение мочи при комнатной
температуре до исследования приводит к изменению не только ее физических свойств и к разрушению клеток, но и к размножению
бактерий.
Анализ мочи на микобактерии должен предусматривать обязательное трёхкратное исследование. Сбор суточной мочи для бактериологического исследования не практикуется в связи с невозможностью сохранения сте- рильности при накоплении материала в течение времени сбора.
8. Общий анализ крови.
Материалом для исследования является венозная кровь, которая берется из локтевой вены.
Для общего анализа кровь забирается в вакуумную
пробирку с фиолетовой крышкой (с К3ЭДТА). Для точного соотношения кровь-антикоагулянт необходимо набрать полностью всю пробирку до отметки или указанного
объема крови!
На пробирках в обязательном порядке должны указываться
идентификационный номер пациента и название медицинского учреждения. Идентификационный номер
должен сохраняться в регистрационном журнале учреждения.
Кровь пациента до передачи курьеру должна храниться в холодильнике (+2 - +4°С) или в контейнере с хладогеном.
Пробирки с кровью отдаются курьеру вместе с направлениями. Номера пробирок должны
соответствовать номерам на направлениях.
Кровь отправляется в лабораторию в день забора. До
следующего дня хранить кровь нельзя!
Лейкопения – вирусы, лейкоцитоз – бактериальная природа.
9. МАРКЕРЫ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ.
Материалом для исследования - венозная кровь из локтевой вены.
Используется обычная сухая пробирка или вакуумная пробирка с красной крышкой.
Количество забираемой крови: до 5 параметров - 5 мл свыше 5 параметров -10 мл
На пробирках в обязательном порядке должны указываться идентификационный номер пациента и название
медицинского учреждения.
Кровь пациента до передачи курьеру должна храниться в холодильнике (+2 - +4°С) или в контейнере с хладогеном.
Кровь отправляется в лабораторию в день забора. До
следующего дня цельную кровь хранить нельзя!
Если невозможно кровь пациента передать в лабораторию в день забора, то необходимо отделить сыворотку от форменных элементов крови. Для отделения сыворотки от
форменных элементов необходимо: центрифугировать кровь после образования сгустка при 1000 об/мин в течение 10 минут, затем отобрать сыворотку в одноразовую пластиковую пробирку типа eppendorf (1,5 мл). Отобранную сыворотку хранить в холодильнике можно в течение 1-2 дней. Для более длительного хранения (что не желательно), сыворотку необходимо заморозить.
Аналитический этап.
ОРЗ вызваны инфекционными факторами, поэтому важной задачей является определение этиологического агента заболевания.
Основные методы, используемые для исследования инфекций респираторной системы:
Вирусологический;
Цитологический;
Серологический;
Бактериологический, Микологический;
Молекулярно-биологический (ПЦР).
1. Риниты, риносинуситы и назофарингиты, ларингиты и
ларинготрахеиты.
Основные возбудители: Вирусы - гриппа, парагриппа, аденовирусы, герпес-вирусы, респираторно-синцитиальный вирус (РС), коронавирусы, риновирусы.
Бактерии - Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes и Haemophilus influenzae, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus.
Грибы – Candida и Aspergillus.
М. pneumoniae и Chlamydia pneumonia ( атипичные возбудители) могут также вызывать острые инфекционные заболевания верхних дыхательных путей, но чаще они проникают в ткань легкого.
Формирование смешанного инфицирования происходит преимущественно за счёт ассоциации М. pneumoniae с вирусами гриппа,
парагриппа, аденовирусом и РС-вирусом.
Принципы лабораторной диагностики ОРВИ верхних дыхательных путей.
1.Цитологический метод – окраска мазков по Романовскому-Гимзе, определение цитопатического действия вируса (очаговое, симпласт, диффузное), метод ориентировочный и прост в осуществлении.
2.Вирусологический метод – в настоящее время редко используется, первый этап – культивирование используется редко. Второй этап – цветная проба – изменение окраски питательной среды 199 с красной на желтую свидетельствует об отсутствии возбудителя.
Из материала больного также смотрится цитопатическое действие вируса на клетки, и редко проводится реакция гемадсорбции.
3 этап - идентификация вируса по антигенной структуре. Если вирус содержит ГА (гриппа, парагриппа, аденовирус, коронавирусы – РТГА.
Если вирус не содержит ГА (РС, риновирус) – РСК и нейтрализация на культуре клеток.
3. Серологический метод.
Диагноз подтверждается при достижении диагностического титра Ат или при возрастании титра Ат в 4 и более раза. Для определения нарастания титров антител необходимо использовать парные сыворотки, взятые в острый период заболевания и в период реконвалесценции.
Для вируса гриппа серологический метод производят с помощью РТГА, РСК, ИФА, определяют 4х кратное увеличение титра Ат в сыворотке больного.
РС вирус – для обнаружения Аг используют методы РИФ и ИФА. Для определения Ат – РСК, ИФА и РН.
Герпес-вирус – цитологический: окраска мазков по Ром-Гимзе- синцитий- многоядерные клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядерными включениями Каудри. Возможно заражение культур клеток HELa Hep2. Идентификация вируса проводится экспресс-диагностикой: РИФ, ИФА с использованием моноклональных Ат и ПЦР.
4. Методы Экспресс-Диагностики.
РИФ.
ИФА.
- универсальный метод для определения как Аг вируса, так и применим для серологии.