"Sandwich ELISA”. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay.

5. ПЦР- диагностика.

Используется для идентификации вируса в материале больного.

В основном используется для диагностики вирусных пневмоний и бронхитов.

Отделяют в основном гриппозные случаи пневмоний и негриппозные – парагрипп, риновирусы, РС-вирус. А также определяются семейство ДНК-содержащих вирусов – адено и герпес-вирусы.

Методика мультиплексной РТ-ПЦР (м-РТ-ПЦР) позволяет идентифицировать от 2 до 9 микроорганизмов одновременно. Одним из преимуществ этого метода является возможность детекции возбудителей в различном материале - носоглоточных аспиратах, мазках из зева и носа, смывах из носоглотки, плазме крови.

Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus.

Чаще всего являются возбудителями инфекций верхних дыхательных путей, при чем хронического течения. Но встречаются бронхиты и стафилококковая пневмония, отличающаяся наличием мелких очагов разрежения легочной ткани, образованием полостей с воздухом. Вносят вклад в развитии ОРЗ у лиц с ослабленным иммунитетом.

1. Микроскопический метод диагностики. Окраска мазков по Грамму, получение колоний , расположены гроздьями, клетки округлой формы фиолетового цвета. Ориентировочный метод.

2. Бактериологический метод диагностики.

Первичный посев на ЖСА и КА для получения изолированных колоний.

После появления колоний оценка идет по параметрам:

1.Характер колоний.

2.Лецитиназная активность (ЖСА).

3. Гемолиз на КА.

Staph. epidermidis

на КА образует беловатые гладкие выпуклые колонии

На ЖСА S. aureus образует золотистые круглые выпуклые непрозрачные колонии. Вокруг этих колоний стафилококков, обладающих лецитиназной активностью, образуются зоны помутнения с перламутровым оттенком.

S. epidermidis не обладают лецитиназной активностью. Также они не обладают и гемолитическими свойствами, на КА не дают гемолиз.

Staph. аureus на КА дает гемолиз.

ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЙ ОТВЕТ

Посев типичных колоний на скошенный агар для выявления чистой культуры.

Идентификация чистой культуры: по культуральным признакам, на БХ (сахаролитическая активность, протеолитическая активность), антибиотикочувствительность, определение факторов вирулентности.

S.aureus – «+»: образование плазмокоагулазы, лецитиназы. Ферментация: глюкозы, маннита, образование а-токсина.

3. Серологический метод: в случаях хронической инфекции, определяют титр анти-а-токсина в сыворотке крови больных. Определяют титр АТ к риботейхоевой кислоте ( компонент клеточной стенки).

4. Методы экспресс-диагностики и молекулярно-биологические.

Метод иммунохимии, РИА, ИФА используются для исследования антигенной структуры возбудителя.

ПЦР – наиболее предпочтителен.

ГРИБЫ. Candida.

Candida — род дрожжей. Как правило комменсалы, но, при некоторых условиях, определённые виды могут вызывать патологию дыхательной системы.

1.Микроскопический метод. Окраска мазков по Граму, Ром-Гимзе, Циль-Нильсену.

2. Микологический метод.

Посев материала на среду Сабуро, инкубация при 35-37˚С 1 сутки, затем при 28-30 ˚С - 2-5 суток.

Появление R или S колоний кремового, белого цвета.

Пересев на скошенный агар Сабуро и Идентификация по морфологии, культуральным свойствам, ферментативной активности.

Колонии S ,белые	candida albicans на Сабуро.
БХ: + глюкоза и манноза.
3. Серологический. Имеют
диагностическую ценность
положительные реакции с вакциной
грибов Candida в разведении
исследуемой сыворотки
1:200 и выше и с полисахаридным
антигеном в реакции связывания
комплемента (при разведении
сыворотки 1:20 и выше).

Диагностика кандидоза основывается на выяснении жалоб, клинической картине заболевания. Подтверждение диагноза проводится с помощью световой микроскопии. Для этого требуется исследование отделяемого с поверхности слизистой оболочки влагалища или пениса. Диагностика кандидоза не требуется использования таких точных методов, как ПЦР или ПИФ, которые могут выявлять даже единичные организмы. Ведь грибы рода Кандида в норме обитают на покровах человека, и значение имеет факт обнаружения их интенсивного размножения.

Острый бронхит чаще всего может быть вызван вирусной природой, хотя есть случаи ОБ стафилакоккового, стрептококкового и грибкового происхождения. Среди вирусов - РС-вирус, грипп.

Пневмонии