- •Диагностика инфекций половой системы
- •Основной спектр микроорганизмов, ответственных за возникновение воспалительных заболеваний гениталий, состоит из следующих представителей:
- •Микроорганизмов, вызывающих заболевания половой системы сейчас насчитывают около 30.
- •Основными методами диагностики являются:
- •Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя. При анализе
- •Преаналитический этап.
- •используются модифицированные шпатели типа Эйра или щетки Cytobrash
- •Подготовка пациента
- •У мужчин материал берут из уретры.
- •Бактериоскопический метод заключается в приготовлении мазка из исследуемого материала, окраске его (иногда изучают
- •Для бактериологического исследования.
- •Бактериологический метод включает посев исследуемого материала на питательные среды, выделение чистой культуры и
- •Для ПЦР исследования.
- •Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала,
- •Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый
- •урогенитальные
- •ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего
- •Для серодиагностики.
- •Серологическая диагностика, основанная на реакции антиген - антитело, может быть использована для определения
- •Венерические заболевания
- •Хламидиоз
- •Диагностика
- •Бактериоскопический метод
- •Бактериологический метод
- •Иммуноферментный анализ (ИФА).
- •Иммунофлюоресцентный метод — прямая, непрямая иммунофлюоресценция (ПИФ, НПИФ) ПИФ - определение антигена с
- •Анализ на хламидиоз методом полимеразной цепной реакции - по нескольким молекулам ДНК. Основные
- •Микоплазмоз и Уреаплазмоз
- •Бактериоскопический метод
- •К методам лабораторной диагностики генитальных микоплазм относятся бактериологический, молекулярно-генетический, серологические методы.
- •Наиболее оптимальной и часто практикуемой основой для роста микоплазм признана среда, в состав
- •Генитальные микоплазмы могут культивироваться как на жидких, так и на плотных питательных средах.
- •Рост M.hominis проявляется через 24—48 ч в виде характерных колоний с плотным центром
- •Для U.urealyticum характерно образование на агаре очень мелких колоний и часто их сливной
- •Тест-система "Mycoplasma DUO" производства "Sanofi Pasteur" позволяет культивировать, идентифицировать и дифференцированно титровать Ureaplasma
- •Серологические реакции (РСК, РИМ, РПГА, ИФА)
- •Чаще используют реакцию агрегат-гемагглютинации и ИФА. Реакция агрегат-гемагглютинации позволяет выявить наличие антигена микоплазм
- •Появление ПЦР открыло новые возможности для диагностики внутриклеточных инфекций. ПЦР основана на выделении
- •Трихомониаз
- •Бактериоскопическое исследование
- •Вторая методика - это окрашивание препарата метиленовым синим или по Граму. Ведётся поиск
- •Бактериологический метод
- •Среди серологических методов для определения антитрихомонадных антител оптимальным является иммуноферментный анализ. Однако показано,
- •Новая генодиагностическая технология - “ПЦР-технология” (ПЦР – полимеразная цепная реакция) в последнее время
- •Бактериальный вагиноз
- •Gardnerella vaginalis
- •Mobiluncus spp
- •Бактериальный вагиноз (БВ) - это переходное состояние вагинального биоценоза, характеризующееся замещением лактофлоры G.
- •ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
- •Забор материала.
- •Выделение и культивирование вирусов
- •Папилломавирусная инфекция
- •Цитологическое исследование мазков по Паппаниколау.
- •Типирование папилломавирусов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР)
- •Цитомегаловирус
- •Серодиагностика
- •ДНК-диагностика цитомегаловируса
- •Кандидоз
- •Лабораторная диагностика заболевания включает в себя:
- •Микроскопический метод.
- •Микологическое исследование
- •Серологическое исследование
- •Кроме классических микробиологических методов лабораторной диагностике сегодня является определение маркеров кандидоза - Дарабинитола
- •Сифилис
- •Все методы лабораторной диагностики сифилиса можно условно разделить на:
- •Взятие материала для микроскопирования.
- •Темнопольная микроскопия.
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).
- •Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ).
- •РИБТ
- •Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa).
- •Иммуноблотинг (Western blot)
- •Нетрепонемные тесты
- •Реакция Вассермана (RW, РВ)
- •Экспресс-метод (микрореакция на стекле).
- •Гонореея
- •Диагностика гонореи.
- •бактериоскопическое исследование
- •Бактериологическое исследование
- •Кроме посева, может использоваться метод (ПЦР), представляющий собой ДНК-диагностику возбудителя гонореи
- •ДИАГНОСТИКА МЯГКОГО ШАНКРА.
- •Взятие материала.
- •Довольно часто возбудитель мягкого шанкра хорошо виден под микроскопом: это напоминающая стаю рыбок
- •Диагностика донованоза
- •Основным методом диагностики донованоза служит гистологическое исследование пораженных тканей. Микроскопия мазка-отпечатка или измельченного
- •Диагноз основан на клинической картине, результатах гистологического исследования, данных анамнеза о половых контактах,
- •Спасибо за внимание
Наиболее оптимальной и часто практикуемой основой для роста микоплазм признана среда, в состав которой входят гидролизат (триптический перевар) сердца крупного рогатого скота, лошадиная сыворотка и дрожжевой экстракт. Для оптимизации роста в среды вносятся обогащающие добавки, прежде всего аминокислоты L-цистеин и L-аргинин.
Генитальные микоплазмы могут культивироваться как на жидких, так и на плотных питательных средах. При бактериологической диагностике применяют и первый, и второй варианты. Посев клинического материала на жидкие питательные среды используется как предварительный тест на ферменты уреазу (для Ureaplasma urealyticum) и аргиназу (для Mycoplasma hominis). Под влиянием уреазы происходит расщепление мочевины с образованием аммиака, что приводит к защелачиванию жидкой питательной среды и изменению цвета индикатора в течение 18–24 часов. Фермент аргиназа, продуцируемый Mycoplasma hominis, разлагает аминокислоту аргинин, что также сопровождается повышением рН среды.
Рост M.hominis проявляется через 24—48 ч в виде характерных колоний с плотным центром и кружевной периферией «яичница-глазунья».
Для U.urealyticum характерно образование на агаре очень мелких колоний и часто их сливной рост. Для лучшей их визуализации к плотной среде добавляют мочевину и индикатор ее разложения тиосульфат марганца. Колонии U.urealytictim окрашиваются на этой среде в коричневый цвет.
Тест-система "Mycoplasma DUO" производства "Sanofi Pasteur" позволяет культивировать, идентифицировать и дифференцированно титровать Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis. Она представляет собой микрометод, который, помимо одновременного выявления двух микроорганизмов, позволяет определять их содержание.
Серологические реакции (РСК, РИМ, РПГА, ИФА)
рекомендуется использовать при массовых обследованиях групп населения, а также подтверждения клинического диагноза. Однако серологическая диагностика микоплазм и уреаплазм весьма затруднительна в связи с существованием большого числа серотипов этих возбудителей, а также с недостаточной изученностью иммунологических изменений при поражении мочеполовых путей микоплазмами. При микоплазменных инфекциях мочеполовых путей воспалительный процесс захватывает значительно меньшую анатомическую сферу, особенно у мужчин. Это сопровождается слабым раздражением иммунной системы и слабой выработкой антител.
Чаще используют реакцию агрегат-гемагглютинации и ИФА. Реакция агрегат-гемагглютинации позволяет выявить наличие антигена микоплазм в сыворотке крови больного в концентрации 0,001-0,0001 мг/л.
Особенность реакции заключается в том, что агрегированные глутаральдегидом белки иммунной сыворотки используют для сенсибилизации эритроцитов. При этом антитела вводят в состав трехмерных белковых комплексов таким образом, чтобы часть активных центров антител находилась на некотором расстоянии от поверхности эритроцита и была более доступной для детерминант антигена. Минимальный диагностический титр составляет 1:8.
ИФА позволяет выявлять антиген в сыворотке крови в минимальном диагностическом титре 1:200.
Появление ПЦР открыло новые возможности для диагностики внутриклеточных инфекций. ПЦР основана на выделении ДНК из исследуемого материала и распознавании последовательности нуклеотидов в генах микоплазм. Чувствительность 99%.
Для выявления микоплазмозов урогенитального тракта наиболее подходящими являются бактериологический метод и ПЦР, а также тестсистема "Mycoplasma DUO".
Трихомониаз
Trichomonas vaginalis — простейшее из класса жгутиковых (Fragellata), является возбудителем заболеваний урогенитально- го тракта как мужчин, так и женщин.
Бактериоскопическое исследование
Микроскопический метод включает две методики.
Первая - это определение трихомонад в нативном препарате при фазовом контрастировании. Необходимо найти овальное или грушевидное тело, чуть больше лейкоцита, имеющее жгутики и совершающее характерные толчкообразные поступательные движения. Такое исследование следует делать практически “не отходя от пациента”, иначе в течение нескольких минут влагалищная трихомонада может прекратить свои движения.