- •Диагностика инфекций половой системы
- •Основной спектр микроорганизмов, ответственных за возникновение воспалительных заболеваний гениталий, состоит из следующих представителей:
- •Микроорганизмов, вызывающих заболевания половой системы сейчас насчитывают около 30.
- •Основными методами диагностики являются:
- •Выбор клинического материала для исследования определяется наиболее вероятным местом локализации возбудителя. При анализе
- •Преаналитический этап.
- •используются модифицированные шпатели типа Эйра или щетки Cytobrash
- •Подготовка пациента
- •У мужчин материал берут из уретры.
- •Бактериоскопический метод заключается в приготовлении мазка из исследуемого материала, окраске его (иногда изучают
- •Для бактериологического исследования.
- •Бактериологический метод включает посев исследуемого материала на питательные среды, выделение чистой культуры и
- •Для ПЦР исследования.
- •Взятие биологического материала, по возможности, должно проводиться в период обострения инфекции. Количество материала,
- •Наиболее адекватным инструментом для взятия соскобов и мазков для ПЦР-анализа является специальный одноразовый
- •урогенитальные
- •ПЦР (полимеразная цепная реакция) – самый быстрый метод диагностики инфекционных заболеваний. Чаще всего
- •Для серодиагностики.
- •Серологическая диагностика, основанная на реакции антиген - антитело, может быть использована для определения
- •Венерические заболевания
- •Хламидиоз
- •Диагностика
- •Бактериоскопический метод
- •Бактериологический метод
- •Иммуноферментный анализ (ИФА).
- •Иммунофлюоресцентный метод — прямая, непрямая иммунофлюоресценция (ПИФ, НПИФ) ПИФ - определение антигена с
- •Анализ на хламидиоз методом полимеразной цепной реакции - по нескольким молекулам ДНК. Основные
- •Микоплазмоз и Уреаплазмоз
- •Бактериоскопический метод
- •К методам лабораторной диагностики генитальных микоплазм относятся бактериологический, молекулярно-генетический, серологические методы.
- •Наиболее оптимальной и часто практикуемой основой для роста микоплазм признана среда, в состав
- •Генитальные микоплазмы могут культивироваться как на жидких, так и на плотных питательных средах.
- •Рост M.hominis проявляется через 24—48 ч в виде характерных колоний с плотным центром
- •Для U.urealyticum характерно образование на агаре очень мелких колоний и часто их сливной
- •Тест-система "Mycoplasma DUO" производства "Sanofi Pasteur" позволяет культивировать, идентифицировать и дифференцированно титровать Ureaplasma
- •Серологические реакции (РСК, РИМ, РПГА, ИФА)
- •Чаще используют реакцию агрегат-гемагглютинации и ИФА. Реакция агрегат-гемагглютинации позволяет выявить наличие антигена микоплазм
- •Появление ПЦР открыло новые возможности для диагностики внутриклеточных инфекций. ПЦР основана на выделении
- •Трихомониаз
- •Бактериоскопическое исследование
- •Вторая методика - это окрашивание препарата метиленовым синим или по Граму. Ведётся поиск
- •Бактериологический метод
- •Среди серологических методов для определения антитрихомонадных антител оптимальным является иммуноферментный анализ. Однако показано,
- •Новая генодиагностическая технология - “ПЦР-технология” (ПЦР – полимеразная цепная реакция) в последнее время
- •Бактериальный вагиноз
- •Gardnerella vaginalis
- •Mobiluncus spp
- •Бактериальный вагиноз (БВ) - это переходное состояние вагинального биоценоза, характеризующееся замещением лактофлоры G.
- •ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
- •Забор материала.
- •Выделение и культивирование вирусов
- •Папилломавирусная инфекция
- •Цитологическое исследование мазков по Паппаниколау.
- •Типирование папилломавирусов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР)
- •Цитомегаловирус
- •Серодиагностика
- •ДНК-диагностика цитомегаловируса
- •Кандидоз
- •Лабораторная диагностика заболевания включает в себя:
- •Микроскопический метод.
- •Микологическое исследование
- •Серологическое исследование
- •Кроме классических микробиологических методов лабораторной диагностике сегодня является определение маркеров кандидоза - Дарабинитола
- •Сифилис
- •Все методы лабораторной диагностики сифилиса можно условно разделить на:
- •Взятие материала для микроскопирования.
- •Темнопольная микроскопия.
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).
- •Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ).
- •РИБТ
- •Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa).
- •Иммуноблотинг (Western blot)
- •Нетрепонемные тесты
- •Реакция Вассермана (RW, РВ)
- •Экспресс-метод (микрореакция на стекле).
- •Гонореея
- •Диагностика гонореи.
- •бактериоскопическое исследование
- •Бактериологическое исследование
- •Кроме посева, может использоваться метод (ПЦР), представляющий собой ДНК-диагностику возбудителя гонореи
- •ДИАГНОСТИКА МЯГКОГО ШАНКРА.
- •Взятие материала.
- •Довольно часто возбудитель мягкого шанкра хорошо виден под микроскопом: это напоминающая стаю рыбок
- •Диагностика донованоза
- •Основным методом диагностики донованоза служит гистологическое исследование пораженных тканей. Микроскопия мазка-отпечатка или измельченного
- •Диагноз основан на клинической картине, результатах гистологического исследования, данных анамнеза о половых контактах,
- •Спасибо за внимание
РИБТ
основана на феномене обездвиживания бледных трепонем антителами типа иммобилизинов, имеющимися в сыворотке крови больных сифилисом. В качестве антигена для РИБТ используют взвесь бледных трепонем, полученных из тканей сифилитического орхита кролика. Бледные трепонемы после добавления к ним сыворотки крови больного прекращают движение, т. е. происходит их иммобилизация. Результаты реакции оценивают в процентах: положительная РИБТ констатируется при иммобилизации от 51 до 100% бледных трепонем, слабоположительная - от 31 до 50%, сомнительная - от 21 до 30% и отрицательная - от 0 до 20%. Реакцию ставят в условиях анаэробиоза. Иммобилизины появляются в сыворотке крови больных позднее, чем другие антитела, поэтому РИБТ становится положительной позже РИФ. РИБТ является наиболее специфичной из существующих реакций на сифилис.
Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa).
Иммуноблотинг (Western blot)
для определения специфических IgM либо IgG является одним из современных и точных методов диагностики сифилиса. При проведении иммуноблотинга T.pallidum подвергаются электрофорезу , в результате чего происходит разделение белковых иммунодетерминант. Затем проводится обработка разделенных точек - blots исследуемой сывороткой и антителами к IgG либо IgM, помеченных ферментами или радиоактивными веществами. Выявленные с помощью иммуноблотинга определенные иммунодетерминанты являются диагностическими признаками сифилиса.
Нетрепонемные тесты
определяют антитела класса IgG и IgM к липидам(фосфолипидам), липопротеинам, высвобождаемых из поврежденных клеток хозяина, вследствие сифилитической инфекции и липидам,входящим в состав мембраны бледной трепонемы. Антилипидные антитела могут появляться не только вследствие сифилиса или других трепонематозов, но и в ответ на некоторые острые и хронические заболевания, при которых наблюдается разрушение тканей. Антилипидные антитела (реагины) образуются через 7- 14 дней после образования шанкра или через 4-5 недель после инфицирования.
Реакция Вассермана (RW, РВ)
основана на феномене связывания комплемента. Для ее постановки используют кардиолипиновый антиген, являющийся холестеринизированным спиртовым экстрактом из мышц бычьего сердца и обладающий сходными антигенными свойствами с бледной трепонемой.
Экспресс-метод (микрореакция на стекле).
В этой реакции используют кардиолипиновый антиген, одну каплю которого смешивают с 2-3 каплями сыворотки крови обследуемого человека в лунках специальной стеклянной пластины. Реакция протекает по механизму преципитации. Общая продолжительность постановки реакции 10-40 мин. Результат оценивают по количеству выпавшего осадка и величине хлопьев. Поэтому этот метод разрешен для применения только как отборочная реакция при массовых обследованиях населения, диспансеризации и обследовании больных в клинико-диагностических лабораториях соматических больниц. Окончательный диагноз сифилиса на основании этого метода устанавливать запрещено.
Гонореея
грамотрицательный диплококком — гонококком лат. Neisseria gonorrhoeae
Диагностика гонореи.
При подозрении на наличие гонококковой инфекции исследуют отделяемое мочеиспускательного канала, парауретральных протоков, большой железы преддверия влагалища, канала шейки матки, стенок влагалища, секрет предстательной железы, семенных пузырьков, желёз и лакун мочеиспускательного канала, промывные воды прямой кишки.
В клинической практике для диагностики гонореи чаще применяют бактериоскопический и бактериологический методы, реже – иммунофлюоресцентный, серологический, иммуноферментный. Новыми и перспективными для диагностики гонореи являются молекулярно-биологические методы: ПЦР (полимеразная цепная реакция).
бактериоскопическое исследование
Наиболее распространенным методом лабораторной диагностики гонореи является бактериоскопическое исследование, при котором отделяемое мочеполовых органов наносят тонким слоем на предметное стекло, а затем окрашивают.
Гонококки хорошо прокрашиваются всеми основными анилиновыми красителями.
Возбудитель гонореи в мазке гноя (окраска по Граму).
Бактериологическое исследование
посев на питательные среды, содержащие нативные белки крови, сыворотки или асцитической жидкости; используют безасцитные среды (например, среда КДС-1 с гидролизатом казеина, дрожжевым аутолизатом и нативной сывороткой); оптимум роста в атмосфере 10— 20 % углекислого газа, при рН 7,2—7,4 и температуре 37 °C.