- •Лекция
- •План лекции
- •Классификация тестов
- •Прямая визуализация бледных трепонем
- •Возможности визуализации бледных трепонем
- •Почему серологическая диагностика более приемлема?
- •Основа лабораторной диагностики сифилиса
- •Микрореакция
- •Реакции Вассермана (трепонемный антиген)
- •Микрореакция
- •Положительное в МР
- •Отрицательное в МР
- •Из истории реакции Вассермана
- •Реакция Вассермана
- •Оценка результатов RW
- •Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
- •Принцип РИБТ
- •Клиническая оценка РИБТ
- •Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
- •Клиническая оценка РИФ
- •Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)
- •Приказ МЗ РФ №87 от 26.03.2001
- •Особенности трепонемных тестов
- •Особенности трепонемных тестов
- •Что в перспективе?
- •Диагностический алгоритм I.
- •Диагностический алгоритм II.
- •Диагностический алгоритм III.
- •Ложноположительные серологические реакции
- •Ложноположительные реакции встречаются при:
- •Дифференциальная диагностика ложноположительных реакций
- •Клиническая оценка МР и RW при первичном сифилисе
- •Клиническая оценка МР и RW при вторичном сифилисе
- •Клиническая оценка МР и RW при третичном сифилисе
- •Клиническая оценка РИФ при первичном сифилисе
- •Клиническая оценка РИФ при вторичном и третичном сифилисе
- •Клиническая оценка РИБТ в различные периоды сифилиса
- •Что на следующей лекции?
Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
В качестве антигена в реакции используют патогенные бледные трепонемы штамма Никольса из раннего орхита кролика
Принцип РИБТ
К живым бледным трепонемам добавляют сыворотку обследуемого.
Если человек болен, то антитела к возбудителю сифилиса (IgG) блокируют подвижность бледных трепонем.
Если человек не болен, то специфичных антител нет и подвижность трепонем сохраняется.
Клиническая оценка РИБТ
Отрицательная реакция, если иммобилизированы до 20% трепонем
Слабоположительная реакция, если иммобилизированы от 21% до 50% трепонем
Положительная реакция, если иммобилизированы от 51% до 100% трепонем
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
Антигеном служит взвесь бледных трепонем штамма Никольса из раннего орхита кролика.
Специфические флюоресцирующие антитела.
Сыворотка обследуемого
Клиническая оценка РИФ
Если у больного имеются антитела к бледной трепонеме, то формируется комплекс антиген-антитело.
Это определяется по специфическому свечению под люминисцентным микроскопом.
Реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)
Антигеном служат эритроциты барана, нагруженные бледной трепонемой.
При добавлении сыворотки больного формируется иммунный комплекс, который вызывает агглютинацию эритроцитов.
Чувствительность 100%
Специфичность 97-99%
ИФА
Принцип метода заключается в соединении комплекса антиген-антитело с конъюгатом, содержащим ферментную метку, выявляемую с помощью субстратной смеси.
Антиген – из культуральной или патогенных бледных трепонем.
Чувствительность – 95,2-98,4%
Специфичность – 96-98,3%
Приказ МЗ РФ №87 от 26.03.2001
«О совершенствовании серологической диагностики сифилиса», на основании того, что ИФА и РПГА являются более чувствительными и специфичными и легко воспроизводимыми тест- системами, которые можно использовать в качестве отборочных и подтверждающих тестов, с 2006 г. произошла замена классического КСР (МР, RW) на ИФА и РПГА
Особенности трепонемных тестов
РИБТ И РИФ, как и ИФА – весьма специфичны и чувствительны, но, в отличии от ИФА, их использование ограничено из-за невозможности автоматизирования постановки реакции и учета результатов: имеет место субъективизм в оценке результатов, что в свою очередь требует опыта и высокой квалификации лаборанта
Особенности трепонемных тестов
Примерно у 85% больных после успешного лечения сифилиса трепонемные тесты отсаются положительными в течение нескольких лет, а у некоторых в течение всей жизни, из-за чего эти тесты не рекомендуется использовать при контроле излеченности.