Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
006 - переливание крови.doc
Скачиваний:
17
Добавлен:
10.11.2019
Размер:
9.94 Mб
Скачать

III. Методы определения резус-фактора:

Все способы определения резус-фактора можно разделить на две группы: методы , которыми определяют кровь в клинике, и методы применяемые в лаборатории.

В клинике используются два так называемых экспресс-метода:

• Экспресс-метод со стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева.

• Экспресс-метод на плоскости без подогрева.

Экспресс-метод определения резус-фактора стандартным универсальным реагентом для определения резус-фактора – Rh0 (d) в пробирках без подогрева .5

Оснащение:

- специально приготовленный универсальный реагент антирезус,

- стандартные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты для контроля,

- пробирки,

- пипетки Пастера,

- изотонический раствор NaCl.

Для определения резус-фактора может быть использована свежая несвернувшаяся кровь, взятая из пальца непосредственно перед исследованием, или консервированная без всякой предварительной обработки, и также эритроциты из пробирки после образования сгустка и отстаивания сыворотки.

Техника определения:

На дно пробирки внести 1 каплю стандартного реагента антирезус и 1 каплю исследуемой крови (или эритроцитов). Содержимое пробирки перемешать встряхиванием и затем медленно поворачивать, наклоняя пробирку почти до горизонтали таким образом, чтобы содержимое растекалось по ее стенкам. Такое размазывание крови по стенкам пробирки делает реакцию более выраженной. Как правило, агглютинация наступает в течение одной минуты, но для образования устойчивого комплекса антиген + антитело и четко выраженной агглютинации, а также ввиду возможности замедленной реакции при слабо выраженной агглютинабельности эритроцитов контакт эритроцитов с реагентом при перевертывании пробирки следует проводить не менее 3 мин. Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавить 2-3 мл изотонического раствора NaCl и перемешать, не взбалтывая, путем 2-3-кратного перевертывания пробирки. Оценку производить визуально.

Одновременно с исследованием крови больных или доноров производится контрольное исследование стандартных резус-положительных эритроцитов той же группы или группы 0(I) по системе АВО и стандартных резус-отрицательных эритроцитов, обязательно одногруппных с исследуемой кровью.

Оценка результатов:

Наличие агглютинации в виде крупных хлопьев из эритроцитов на фоне просветленной жидкости указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови (Rh+).

Отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная жидкость) указывает на резус-отрицательную принадлежность исследуемой крови (Rh-).

Результат учитывается как истинный после проверки контрольных образцов, т.е. при положительном результате со стандартными резус-положительными эритроцитами и отсутствии агглютинации со стандартными резус-отрицательными эритроцитами, одногрупными с исследуемой кровью по системе АВО.

Экспресс метод определения Rh-фактора на плоскости без подогрева

Методика проведения реакции

На белой пластинке со смачиваемой поверхностью пишут фамилию и инициалы лица, кровь которого исследуется. На левом краю пластинки делают надпись «сыворотка - антирезус», на правом — «контрольная сыворотка». Последней служит разведенная альбумином сыворотка группы АВ (IV), не содержащая антител анти-резус. Соответственно надписям на пластинке помещают по 1-2 капли (0,05-0,1 мл) реактива анти-резус и контрольной сыворотки. К обеим каплям добавляют исследуемые эритроциты. Кровь размешивают с реактивом сухой стеклянной палочкой, размазывая на пластинке до образования капли диаметром 1,5 см. Пластинку слегка покачивают. Через 3-4 минуты для снятия возможной неспецифической агглютинации к каждой капле добавляют 5-6 капель физиологического раствора. Затем пластинку покачивают в течение 5 минут.

Оценка результатов

Результат оценивают по наличию или отсутствию агглютинации невооруженным глазом. Наличие хорошо выраженной агглютинации в капле слева указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови. Отсутствие агглютинации в этой капле (гомогенная окраска) говорит о резус-отрицательной принадлежности исследуемой крови (Rh-). Результат считается истинным лишь при отсутствии признаков агглютинации в правой (контрольной) капле.