1. Ниже приведены значения Rf для пяти компонентов анализируемой смеси. Пятно, соответствующее какому компоненту, будет находиться ближе всего к линии фронта растворителя?

1) 0,26; 2) 0,35; 3) 0,58; 4) 0,73; 5) 0,90.

2. Ниже приведены значения коэффициентов распределения для пяти компонентов анализируемой смеси. Пятно, соответствующее какому компоненту, будет находиться ближе всего к линии старта?

1) 1; 2) 5; 3) 10; 4) 20; 5) 50.

3. Найдите выражения, в которых имеются ошибки:

1. значение R_f вещества А оказалось равным 2,25;

2. чем больше разность величин R_f двух веществ, тем меньше величина их коэффициента разделения;

3. величина R_f вещества зависит от температуры;

4. при замене в составе подвижной фазы метанола на ацетон значение R_f вещества изменилось;

5. после проведения хроматографирования вещество осталось на стартовой линии, следовательно, его коэффициент распределения равен 0;

4. Двухмерная тсх отличается от одномерной тем, что:

1. элюирование в ней всегда проводят смесью растворителей, состоящей из двух компонентов;

2. разделение в двухмерной ТСХ предполагает использование двух хроматографических пластинок;

3. двухмерная ТСХ всегда проводится в восходящем варианте, а одномерная - в нисходящем;

4. в двухмерной ТСХ проводится два разделения, причём второе в направлении противоположном первому;

5. в двухмерной ТСХ проводится два разделения, причём второе в направлении перпендикулярном первому.

5. В ВЭЖХ используются сорбенты, диаметр частиц которых составляет:

1) 5 нм; 2) 5 мкм; 3) 500 мкм; 4) 5 мм; 5) 500 мм.

6. Смесь хлорид- и бромид-ионов анализируют методом ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Какой из перечисленных детекторов является наиболее подходящим в данном случае?

1) рефрактометрический; 2) кондуктометричекий;

3) спектрофотометрический; 4) масс-спектрометрический;

5) флуориметрический.

7. Смесь катионов щелочных металлов разделяют с помощью ионообменника, содержащего -SO₃H группы, используя в качестве элюента водный раствор HCl. В какой последовательности катионы щелочных металлов будут выходить из колонки?

1) Na⁺, K⁺, Rb⁺, Li⁺; 2) K⁺, Rb⁺, Li⁺, Na⁺; 3) Rb⁺, K⁺, Na⁺, Li⁺;

4) Li⁺, Rb⁺, K⁺, Na⁺; 5) Li⁺, Na⁺, K⁺, Rb⁺.

8. Заряд матрицы ионообменников (катионитов или анионитов), содержащих какие функциональные группы, практически не будет зависеть от рН?

1) -COO^-; 2) -SO₃^-; 3) -O^-; 4) -NH₃⁺; 5) -N(CH₃)₃⁺.

9. Сефадексы - это:

1) сополимеры стирола и дивинилбензола; 2) декстрины;

3) производные декстрана; 4) полимеры акриламида;

5) продукты полимеризации тетрафторэтилена

10. Ниже приведена эксклюзионная хроматограмма для смеси полимеров, обладающих одинаковой химической природой, но разными молярными массами. Найдите последовательность, которая отражает соотношение молярных масс веществ А, B и C.

1) М(А) > M(B) > M(C); 2) M(C) > M(A) > M(B)

3) M(C) < M (B) > M(A); 4) M(B) > M(A) < M(C);

5) M(A) < M(B) > M(C).

При хроматографировании лекарственного вещества димедрола и его N-метильного производного (N-метилдимедрола) на хроматографической пластинке «Сорбфил» при использовании в качестве подвижной фазы 1 М водно-ацетонового раствора NaCl были получены следующие результаты:

	димедрол	N-метилдимедрол
Расстояние от линии старта до центра пятна, , мм	56,3	50,1
Расстояние от линии старта до нижнего края пятна, , мм	53,9	47,6
Расстояние от нижней до верхней границы пятна, w, мм	4,7	6,2

Рассчитайте значения R_f, , N и H для обоих веществ, а также величины коэффициента разделения и разрешения. Длина пробега подвижной фазы (L) составляет 90,0 мм.

Расчётные формулы и полученные величины основных хроматографических характеристик димедрола и N-метилдимедрола выглядят следующим образом:

Характеристика	Формула	Рассчитанное значение
		димедрол	N-метилдимедрол
Rf		0,626	0,557
коэффициент ёмкости,		0,597	0,795
число теоретических тарелок, N		2,110^3	9,410^2
высота эквивалентная теоретической тарелке, H		4,310^-2 мм	9,510^-2 мм

Коэффициент разделения и разрешение димедрола и N-метилдимедрола равны:

Полное разделение димедрола и N-метилдимедрола в данных условиях не достигается.

1. При хроматографировании атропина на хроматографической пластинке «Сорбфил» при использовании в качестве подвижной фазы 0,5М водно-ацетонового раствора NaCl были получены следующие результаты: расстояние от линии старта до центра пятна - 49,6 мм, расстояние от линии старта до нижней границы пятна - 46,8 мм, расстояние от нижней до верхней границы пятна - 5,6 мм. Расстояние между линией старта и линией фронта растворителя равно 90,0 мм. Рассчитайте R_f, N и H. Ответ: 0,551; 1,110³; 8,110^-2 мм.

2. Рассчитайте значение разрешения для хлоридов тетраэтиламмония и тетрабутиламмония при их разделении методом ТСХ, если при выбранных условиях хроматографирования расстояние между центрами пятен данных веществ равно 6,4 мм, а расстояния между верхней и нижней границами пятна - 4,4 мм для одного вещества и 4,0 мм для другого. Ответ: 1,5.

3. Пробу мочи объёмом 5,00 мл, содержащей берберин, пропустили через сорбционный патрон, содержащий 0,1 г сорбента. При этом берберин количественно адсорбировался на нём. Затем сорбент отмыли от адсорбировавшихся совместно с берберином веществ вначале водой, а затем этанолом и диэтиловым эфиром. После высушивания сорбента берберин количественно десорбировали 0,50 мл смеси 0,03М KH₂PO₄ с ацетонитрилом (6:4). Полученный элюат анализировали методом ВЭЖХ. Рассчитайте концентрацию берберина в анализируемом образце мочи (нг/мл), если зависимость площади пика (S, ед. оптической плотностисек) от концентрации берберина в растворе (мкг/мл) описывается уравнением S = 0,412C, а при хроматографировании берберина, содержавшегося в анализируемой моче, был получен пик с S = 0,900. Ответ: 220 нг/мл.

4. При стандартизации раствора NaOH навеску NaCl массой 0,7340 г растворили в воде в мерной колбе вместимостью 100,0 мл. Затем 10,00 полученного раствора пропустили со скоростью 3 мл/мин через колонку с катионообменником КУ-2 в H⁺-форме, после чего промыли колонку дистиллированной водой до нейтральной реакции. Промывные воды присоединили к элюату. Для титрования полученной смеси потребовалось 14,05 мл стандартизуемого раствора NaOH. Определите молярную концентрацию NaOH в данном растворе. Ответ: 0,08939 моль/л.

5. Динамическая ёмкость некоторого сильнокислотного катионообменника составляет 5,0 ммоль/г. Какой максимальный объём раствора с концентрацией NaCl 9,0 г/л можно пропустить через колонку, в которой находится 5,0 г такого ионообменника в H⁺-форме, чтобы все ионы Na⁺ заместились на ионы H⁺? Ответ: 0,16 л.

1. Тауродезоксихолевую кислоту, содержащуюся в 0,50 мл пробы плазмы крысы, количественно экстрагировали 0,50 мл этилацетата. Полученный экстракт упарили досуха, сухой остаток растворили в 1 капле этилацетата и полностью перенесли на хроматографическую пластинку. После хроматографирования площадь полученного пятна оказалась равной 50 мм². Рассчитайте концентрацию тауродезоксихолевой кислоты (мкг/мл) в исследуемом образце плазмы. Уравнение зависимости десятичного логарифма площади пятна (мм²) от логарифма массы тауродезоксихолевой кислоты в пятне (нг) имеет вид: lgS = 0,69lgm + 0,02.

2. При определении лекарственного вещества дротаверина (но-шпы) в плазме крови методом ВЭЖХ с использованием папаверина в качестве внутреннего стандарта (концентрация в плазме - 5,00 мкг/мл) были получены следующие результаты:

С, мкг/мл	S пика дротаверина, ед.оптич.пл.сек	S пика папаверина, ед.оптич.пл.сек
0,10	0,28	2,89
0,50	1,68	2,78
1,00	2,84	2,62
5,00	13,89	2,38

Рассчитайте уравнение градуировочного графика С = bK_S, где K_S=S(дротаверина)/S(папаверина) и определите концентрацию дротаверина в плазме, если S(дротаверина) = 5,00, а S(папаверина) = 2,50.

3. Навеску сильнокислотного катионообменника в H⁺-форме массой 2,50 г поместили в колонку. Затем через неё пропустили 200 мл 1 М NaCl и промыли водой до нейтральной реакции. Элюат и промывные воды собрали в мерную колбу вместимостью 500,0 мл. Для титрования 50,0 мл полученного раствора потребовалось 10,20 мл 0,1000 М NaOH. Определите динамическую ёмкость используемого катионообменника (ммоль/г).

ХРОМАТО-ФОТОМЕТРИ­ЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АМИНАЗИНА

А миназин является лекарственным веществом из группы нейролептиков и используется для лечения различных психических расстройств. Методика хромато-фотометрического анализа драже аминазина включает в себя ТСХ-разделение компонентов, входящих в состав драже, и фотометрическое определение выделенного аминазина по реакции с эозином.

ТСХ-разделение проводится на пластинке «Силуфол», которая представляет собой алюминиевую фольгу, на которой с помощью крахмала закреплён тонкий слой силикагеля. В качестве подвижной фазы используется смесь ацетона и 0,25 М NaBr в объёмном соотношении 1:1. Для проявления хроматограммы применяется реактив Драгендорфа (K[BiI₄]). Пятна на хроматограмме, соответствующие аминазину и другим веществам основного характера, после проявления будут иметь оранжевую окраску (на жёлтом фоне) из-за протекания реакции:

R₃NH⁺ + [BiI₄]^-  (R₃NH⁺)[BiI₄]^-

Рис. 32.1. Схема разметки хроматографической пластинки и нанесения веществ

Фотометрическое определение аминазина по реакции с эозином имеет тот же принцип, что и аналогичное определение этония (см. с. 256 - 257).

Определение аминазина в драже проводят по следующей методике. Одно драже аминазина растворяют в 5,0 мл этанола. После отстаивания отмеривают с помощью автоматической пипетки 0,020 мл полученного раствора и количественно переносят капилляром на линию старта в зону хроматографической пластинки (рис. 32.1). В зону В аналогичным образом наносят 0,020 мл стандартного раствора аминазина (5,0 мг/мл). В зону А наносят капилляром стандартный раствор аминазина (около 5 мкл). Пластину подсушивают и помещают в хроматографическую камеру в систему ацетон: 0,25 М NaBr (1:1). Высота подъёма фронта растворителя 5 см. После высушивания пластинку разрезают на отдельные зоны и зону А проявляют реактивом Драгендорфа. По расположению оранжевого пятна в зоне А определяют нахождение аминазина в зонах В и С. Отдельно снимают слой сорбента с зоны В и С, переносят в две пробирки из полиэтилена вместимостью 1 мл. Прибавляют 1,0 мл 0,01 М НСI, центрифугируют полученные растворы и количественно переносят надосадочную жидкость в экстракционные пробирки. В каждую пробирку прибавляют по 0,5 мл 0,1% раствора ПВС, 0,5 мл 0,07% раствора эозина и разбавляют водой до 10,0 мл. Измеряют оптическую плотность стандартного и исследуемого растворов на КФК - 2 МП при 540 нм в кювете с толщиной слоя 2 см относительно раствора, содержащего все перечисленные выше компоненты за исключением аминазина. Массу аминазина в одном драже рассчитывают по формуле:

где А_с - оптическая плотность стандартного раствора аминазина после хроматографирования; А_х - оптическая плотность исследуемого раствора; 5,010^-3 - концентрация аминазина в стандартном растворе (мг/мл); 5,0 - объём исследуемого раствора (мл).

ЗАНЯТИЯ 33-34