1. Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 50,00 мл последовательно вносят 0,50; 1,00; 2,00; 3,00, 4,00 и 5,00 мл стандартного раствора новокаина (100,0 мкг/мл), доводят водой до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность каждого раствора на спектрофотометре СФ-46 при 290 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Полученные результаты помещают в таблицу.

№	1	2	3	4	5
V(новокаина), мл	0,50	1,00	2,00	3,00	5,00
C(новокаина), мкг/мл	1,00	2,00	4,00	6,00	10,0
А

По полученным данным методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение зависимости С от А.

2. Определение массы новокаина в пробе

Полученную пробу количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50,00 мл, доводят водой до метки и перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора в условиях, описанных выше. По рассчитанному обратному уравнению градуировочного графика определяют концентрацию новокаина в растворе (С_х, мкг/мл), а затем по формуле m = C50,00 - массу новокаина в анализируемой пробе.

Занятие 29

Цель занятия

1. Знать:

• общий принцип возникновения и измерения аналитического сигнала в эмиссионных спектроскопических методах анализа;

• основные принципы, положенные в основу атомно-эмиссионной спектроскопии, устройство и принцип работы приборов, используемых в данном методе анализа и область его практического применения;

• общую характеристику и классификацию различных видов люминесценции; основные характеристики и закономерности молекулярной фотолюминесценции; основные факторы, влияющие на интенсивность флуоресценции растворов;

• устройство и принцип работы приборов, используемых для измерения интенсивности флуоресценции;

• область практического применения люминесцентных методов анализа, основные приёмы, используемые в флуориметрии.

1. Уметь:

• проводить флуориметрическое определение рибофлавина.

1. Атомно-эмиссионная спектроскопия. Принцип метода. Устройство и принцип работы используемых приборов. Практическое применение.

2. Люминесцентные методы анализа. Классификация, причина возникновения, основные характеристики и закономерности люминесценции.

3. Влияние различных факторов на интенсивность флуоресценции растворов.

4. Устройство и принцип работы приборов, применяемых для измерения интенсивности флуоресценции.

5. Основные приёмы, используемые в люминесцентных методах анализа.

1. Сравните основные достоинства и недостатки атомно-абсорбционной и атомно-эмиссионной спектроскопии. Какой из этих методов Вы используете в том случае, когда необходимо определить качественный состав пробы?

2. Почему эмиссионная фотометрия пламени используется для определения только щелочных и щелочноземельных металлов?

3. Объясните принцип работы атомизатора с индуктивно связанной плазмой. Можно ли использовать атомизатор с ИСП в ААС?

4. Что такое Стоксов сдвиг и почему он возникает? Почему у атомов и простых молекул в газовой фазе он может отсутствовать?

5. Почему спектр флуоресценции симметричен только самой длинноволновой полосе спектра поглощения и только в шкале частот (или волновых чисел), но не длин волн? Для всех ли веществ соблюдается правило симметричности спектров поглощения и испускания?

6. Что такое квантовый и энергетический выходы флуоресценции и как они связаны друг с другом?

7. Приведите примеры, показывающие связь строения органического вещества с его способностью флуоресцировать.

8. Почему интенсивность флуоресценции увеличивается прямо пропорционально увеличению оптической плотности раствора при _возб лишь при малых значениях оптической плотности? Объясните причину расширения области прямолинейной зависимости при использовании кювет очень малой толщины или нецентральном облучении больших кювет?

9. Почему измерение интенсивности флуоресценции проводят с помощью фотоумножителя, а не с помощью обычного фотоэлемента? Почему флуориметрия является более чувствительным и более избирательным методом анализа, чем фотометрия?

10. Что такое фосфоресценция? Почему спектр фосфоресценции сильнее сдвинут в сторону больших длин волн, по отношению к спектру поглощения, чем спектр флуоресценции? Почему для наблюдения фосфоресценции молекулу необходимо иммобилизировать (замораживание растворов, адсорбция на фильтровальной бумаге, использование мицелл ПАВ и т.д.)?