_с

Российская академия медицинских наук Гематологический Научный Центр

НПО "РЕНАМ"

125167 Москва, Новый Зыковский пр., д. 4а

Пособие для врачей-лаборантов по методам исследования

_{плазменного гемостаза}

ФАКТОРЫ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ

Москва, 2009

2 Составители:

Генеральный директор НПО «РЕНАМ», доктор биологических наук Козлов Альберт Анатольевич

зав. производством НПО «РЕНАМ», старший научный сотрудник, кандидат биологи­ческих наук Берковский Арон Леонидович

начальник ОТК НПО «РЕНАМ», старший научный сотрудник, кандидат биологиче­ских наук Качалова Наталья Дмитриевна

научный сотрудник НПО «РЕНАМ» Сергеева Елена Владимировна

ведущий научный сотрудник ГНЦ РАМН, кандидат биологических наук Простакова Татьяна Михайловна

ОГЛАВЛЕНИЕ ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 4

Табл. 1. Факторы свертывания крови 4

Фактор I. Фибриноген 7

Фактор И. Протромбин - 7

Фактор III — тканевый тромбопластин 9

Фактор IV —ионы кальция 9

Фактор V 9

Фактор VI	10
Фактор VII	10
Фактор VIII	10
Фактор IX	12
Факторы X, XI, XII	13
Фактор XIII	13
Фактор Виллебранда	14
Фактор Флетчера	14
Фактор Фитцжеральда	15

ТЕСТ-СИСТЕМЫ КОМПАНИИ «РЕНАМ» 15

ФИБРИНОГЕН 19

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ VIII ФАКТОРА СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ 21

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ IX ФАКТОРА СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ 22

ФИБРИНСТАБИЛИЗИРУЮЩИЙ ФАКТОР XIII 22

ПРОТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ 23

АКТИВИРОВАННОЕ ЧАСТИЧНОЕ ТРОМБОПЛАСТИНОВОЕ ВРЕМЯ(АЧТВ) 24

ФАКТОР ВИЛЛЕБРАНДА 25

РеаРгС/FV тест Набор реагентов для определения резистентности активированного фактора V к протеину С 26

ЛИТЕРАТУРА 28

4

5

Введение

Система гемостаза имеет несколько важнейших функций: поддержания жидкого

состояния крови, циркулирующей в сосудах; прекращение кровотечения в месте повреж­дения сосуда и остановка кровопотери путем образования фибриновой пробки; растворе­ние этой пробки после восстановления целостности сосуда. В этом процессе принимают участие кровеносные сосуды, тромбоциты, плазменные факторы свертывания, ингибито­ры факторов свертывания, система фибринолиза.

В ответ на повреждающее воздействие происходит спазм микрососудов, активация клеток эндотелия, активация тромбоцитов, секреция этими клетками биологически активных веществ, адгезия и агрегация тромбоцитов, образование тромбоцитарной пробки. Одновре­менно в процесс включаются плазменные ферментные системы, лавинообразно активирую­щие друг друга и обеспечивающие образование фибринового сгустка, препятствующего по­тере крови, и последующий его лизис, когда такая опасность исчезает. Противосвертываю-щие системы антитромбина III, протеина С и ряда других протеинов проводят тонкое регу­лирование механизма свертывания и фибринолиза, ограничивая образование сгустка местом повреждения и не допуская превращение процесса свертывания в системный.

Факторы свертывающей системы синтезируются в основном в гепатоцитах печени и постоянно циркулируют в плазме крови в неактивной форме проферментов, и для их ак­тивации требуется повреждающее воздействие.

Факторы обозначают римскими цифрами, для отличия активированного фермента от неактивированного к цифре добавляют букву «а» (см. табл. 1).

Табл. I. Факторы свертывания крови

Обозна­чение	Синоним	Вид белка	Функция
1	2	3	4
I	Фибриноген	Структурный	Образует сгусток
II	Протромбин	Витамин К зависимая сериновая протеиназа	Активирует I, V, VII, XIII, протеин С, тромбо­циты
V	Проакцелерин	Связывающий	Помогает ф. Ха активи­ровать ф. II
VII	Конвертин	Витамин К зависимая сериновая протеиназа	Активирует ф. I и ф. X
VIII	Антигемофильный	Связывающий	Помогает ф. 1Ха активи­ровать ф. X
IX	Фактор Кристмаса	Витамин К зависимая сериновая протеиназа	Активирует ф. X
X	Фактор Стюарта	Витамин К зависимая сериновая протеиназа	Активирует ф. II

1	2	3	4
XI	Предшественник плаз­менного тромбопластина	Сериновая протеиназа	Активирует ф. IX
XII	Фактор Хагемана	Сериновая протеиназа	Активирует кининовую систему
XIII	Фибрин-стабилизиру ющий фактор	Трансглютаминаза	Сшивка фибрина
Фактор Виллебранда		Связывающий	Связывание тромбоцитов и ф. VIII
Фактор Флетчера		Прекалликреин	Фактор контакта
Фактор Фитцжеральда		Высокомолекулярный кининоген	Активация ф. XI

Коагуляционные ферменты являются сериновыми протеазами, которые взаимно активируют друг друга. В то же время такие факторы, как II, VII, IX, X (а также протеины С и 3) являются витамин К зависимыми. Это означает, что эти глюкопротеины содержат остатки глютаминовой кислоты, которые при активации претерпевают у-карбоксилирование под действием витамина К. При этом образуется новая у-глутаминовая кислота, которая играет существенную роль в процессе связывания энзима с фосфолипидами. В отсутствии витамина К эти энзимы также образуются, но они функ­ционально неполноценны (РIVКА). На этом свойстве витамина К основано применение антикоагулянтов непрямого действия (варфарин и др.).

Центральным событием в процессе свертывания крови является образование тром­бина, под действием которого из фибриногена плазмы крови образуется фибриновый сгу­сток. Активация процесса свертывания может осуществляться по внутреннему и внешне­му механизму, что моделируется тестами АЧТВ и протромбинового времени, соответст­венно. Оба пути активации приводят к появлению ф. Ха, который образует комплекс с фосфолипидами, своим кофактором ф. Vа и ионами кальция. Этот комплекс действует как инструмент для превращения протромбина в тромбин.

На рис. представлена упрощенная схема коагуляционного каскада, ингибиторы и антикоагулянты не указаны.

Factor XII

Extrinsic System

Tissue Factor

Factor VII

Factor VIII

Factor VII а

Factor V

Factor Ха

Factor Vа

Тhrombin

Fibrin

Fibrinogen

Intrinsic System

Vessel surfасе

High Molecular Weight Kininogen

Рrekallekrein

_=>

Factor ХПа

Factor IX

Factor VIIIа

Factor IХа

Factor X

Рrothrombin

Factor XI Factor XI а