Паразитирующих у сельскохозяйственных животных (и. И. Вершинин, 1982)

Вид паразита	Промежуточ-ный хозяин	Окончательный хозяин	Препа-тентный период, дни	Размер спороцист, мкм	Длина ме-розоитов в цисте, мкм	Патогенность для промежуточ-ного хозяина	Структура стенки цисты при световой и электронной микроскопии
1	2	3	4	5	6	7	8
S.bovicanis	Крупный рогатый скот	Собака, волк, лисица, песец, койот, енот	9—10	10,8 х 16,3	10—14	Патогенный	Стенка тонкая (менее 1 мкм) и гладкая. Ворсинчатые выросты без фибрилл в небольшом количестве нерегулярно расположены по всей поверхности цисты. Выросты заметны и при световой микроскопии свежего материала.
S.bovifelis	То же	Кошка домашняя и дикая	7—9	7,8 х 12,5	13—15	Слабопатогенный	Стенка толстая (до 5,4 мкм), с радиальной исчерченностью. Многочис-ленные прямые ворсинчатые выросты длиной 3,8— 5,5 мкм располагаются наклонно к поверхности цисты и содержат до 200—300 фибрилл
S. bovihominis	То же	Человек, бабуин, макака-резус	9—10	9,3 х 14,7	7—9	Слабопатогенный	Стенка толстая (до 6,9 мкм), с радиальной исчерченностью. Многочис-ленные прямые ворсинчатые выросты длиной 4— 7 мкм содержат множество фибрилл, располагаются вертикально к поверхности цисты
S.ovicanis	Овца	Собака, песец, кайот, шакал	8-9	9,9 х 14,8	14—17	Патогенный	Стенка толстая (до 2,5 мкм), с радиальной исчерченностыо. Многочис-ленные прямые палисадоподобные выросты длиной 2-3,5 мкм фибрилл не содержат.

1	2		3	4		5	6	7	8
S.ovifelis		То же	Кошка	11—14	8,1 х 12,4		12—15	Слабопатогенный	Стенка с многочисленными, похожими на цветную капусту выростами длиной 1 -4,5 мкм. Выросты содержат многочисленные фибриллы. Инвазиро-ванная клетка хозяина заключена в соединительную ткань, образующую вторичную стенку цисты.
S.suicanis		Свинья домашняя и дикая	Собака, волк, лиса	9—12	9,6 х 12,6		14	Патогенный	Стенка с многочисленными па-лисадоподобными, вертикально располо-женными выростами длиной 2,2—4,8 мкм. Фибриллы в выростах лежат беспорядочно
S.suihominis		То же	Человек	9	10,5 х 13,5		15	Патогенный	Стенка тонкая (1 мкм). В молодых цистах заметны прямые выросты, которые подгибаются в более старых цистах. В свежих нативных препаратах у старых цист видны волосовидные выросты длиной до 14 мкм. Фибриллы в выростах располагаются парами
S.eguicanis		Лошадь	Собака	8	10 х 15,2		3,2—6,5	Не выяснена	Стенка цисты тонкая (менее 1 мкм), без радиальной исчерченности. На повер-хности цисты заметно небольшое количество выростов длиной 0,4— 2 мкм
S.fayeri		То же	Собака	12—15	11-13 х 7-8,5		15—20	Не выяснена	Стенка до 2 мкм толщиной (с поперечной исчерченностью).

Примечание. Величина цист S.оviсаnis микроскопическая, а S. оvifelis—до 1,5 см и больше. Величина цист S. suicanis—50-1500х15-100 мкм, а S. suihominis — до 5 мм. У цист S. еguicanis длина до 350 мкм, а у S. fayeri—до 900 мкм при ширине до 70 мкм. При составлении таблицы использованы данные авторов: А. О. Неуdоrn и др. (1975); I. Р. Dubеу и др. (1977); Н. Меhlhоrn и А. О. Неуdorn (1978); I. К. Fгеnкеl и др. (1979); И. И. Вершинин, Ф. Ф. Леонтьева (1974); И. И. Вершинин (1977).

ные ооцисты и спороцисты саркоспоридий. Ооцисты имеют размер 14,5—20 мкм в длину, 10—15 мкм в ширину. Спороцисты с толстой оболочкой имеют эллипсоидную или яйцевидную форму длиной от 11 до 17 и шириной 7,5—11,6 мкм. Для большей достоверности рекомендуются трехкратные копроcкопические обследования с интервалом в 2—3 дня (Н. И. Степанова, 1982).

Диагностика трихомоноза

Диагноз на трихомоноз ставят на основании эпизоотологических данных, клинического обследования животных и результатов лабораторного исследования отобранного от больных животных материала.

Для исследования в ветеринарную лабораторию направляют абортированный плод (до 4-месячной стельности) вместе с плодовыми оболочками или часть плаценты, паренхиматозные органы плода, патологические выделения из половых органов. Направляют также соскобы слизистой препуция, секрет придаточных половых желез, сперму быков, патологические выделения из половых органов.

Согласно «Методическим указаниям по лабораторной диагностике трихомоноза крупного рогатого скота» (одобренным Главным управлением ветеринарии Госагропрома СССР 29.12.1985 г.) взятие и пересылка материала осуществляются следующим образом.

Перед взятием диагностического материала у животного половые органы моют теплой водой с мылом и вытирают полотенцем.

Вагинально-цервикальную слизь берут в период половой охоты или через 3—5 дней после введения СЖК в дозе 2000—3000 МЕ. За день до взятия материала рекомендуется вводить животным подкожно 1,5—2,0 мл 0,5%-ного водного раствора прозерина или 1%-ного раствора карбохолина.

Слизь берут полистироловыми пипетками. Для этого к 10-граммовому шприцу при помощи резиновой муфты присоединяют полистироловую пипетку, набирают 5 мл физиологического раствора и вводят его под давлением через раскрытое зеркалом влагалище в шейку матки на глубину 3—4 см. Затем, не извлекая пипетки, шприцем насасывают физиологический раствор вместе со слизью, переносят в пробирку, которую закрывают резиновой пробкой.

Вагинальную слизь можно брать ложкой-катетером, которую вводят во влагалище животного без зеркала. При этом положение ложки должно быть боковым, а ее стержня — горизонтальным. Ложкой делают соскоб слизистой оболочки влагалища и через канал стержня переливают в пробирку. Если соскоб густой консистенции, через канал стержня ложки шприцем вводят 5 мл физиологического раствора, выливают в пробирку и закрывают пробкой.

Сперму от быков получают на искусственную вагину, переливают в полиэтиленовые пакетики, как делают на станции искусственного осеменения.

Секрет придаточных половых желез получают путем массажа их через прямую кишку.

Соскобы со слизистой оболочки препуция берут с помощью приборов Казеева, Корчака или Жабоедова. Смонтированный прибор вводят в полость препуция до ее середины. Затем выдвинутым стержнем делают 3—4 возвратно-поступательных движения от свода препуциальной полости до трубки прибора. После этого стержень осторожно извлекают, опускают в пробирку с 3 мл физиологического раствора, промывают, вытаскивают. Пробирку закрывают резиновой пробкой.

Материал для исследования берут не раньше чем через 6 дней после профилактических орошении и через 10 дней после лечения трихомонадоцидными препаратами.

Абортированный плод, плаценту доставляют в лабораторию не позднее 12 ч после аборта. В холодное время года плоды рекомендуется замораживать.

Пробы секрета придаточных половых желез, препуциальной и вагинальной слизи, патологические выделения в пробирках, неразбавленную сперму в полиэтиленовых пакетиках доставляют в лабораторию в термосе со льдом не позднее 6 ч после взятия. Высевы из патологического материала рекомендуется делать на месте и отправлять в лабораторию засеянные питательные среды.

Нативный материал (соскобы, секрет, сперма) исследуют в раздавленной капле.

Соскобы слизи густой консистенции разбавляют физиологическим раствором при температуре 37 °С в соотношении 1 : 2—1 : 5, сперму — 1:10.

При исследовании спермы сперматозоиды обездвиживают, смешивая каплю ее с каплей уксусной кислоты, разбавленной в соотношении 1 : 500—1 : 800.

Жидкий материал берут со дна пробирки, наносят на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют в раздавленной капле под малым, а затем под средним увеличением микроскопа в затемненном поле зрения.

При микроскопии надо учитывать, что живые трихомонады имеют ундулирующую мембрану и аксостиль, движения скачкообразно-поступательно-вращательные.

Для получения культуры возбудителя трихомоноза используют среду Петровского или пептонно-агаровую.

Перед посевом в каждую пробирку со средой (Петровского, пептонно-агаровой) добавляют стерильную сыворотку крови лошади или крупного рогатого скота (без признаков гемолиза) — 1 мл, пенициллин и стрептомицин по 1000 ЕД/мл, а в пептонно-агаровую среду—дополнительно и нистатин по 250 ЕД/мл среды. Затем эти пробирки помещают в термостат при 37 °С на 1—1,5 ч.

Каждую пробу от животного высевают в две пробирки со средой. В пробирки со средой вносят по 0,3—0,5 мл материала.

При исследовании абортированного плода делают посевы содержимого грудной, брюшной полостей, сычуга, печени, легких, сердца, измененных участков плаценты, околоплодной жидкости в две пробирки со средой.

Засеянные пробирки инкубируют в термостате при 37 °С в течение 10 дней.

На 3-й день посевы просматривают визуально и при обнаружении помутнения пипеткой берут каплю среды со дна пробирки, помещают на предметное стекло и просматривают в неразбавленном виде под средним увеличением микроскопа в затемненном поле зрения. Затем посевы просматривают на 5-й, 7-й, 9-й дни.

С целью дифференциации трихомонад готовят окрашенные мазки из среды. Делают тонкий мазок, высушивают на воздухе, фиксируют этиловым спиртом в течение 20-25 мин, окрашивают по Романовскому в течение 40-90 мин, промывают дистиллированной водой (рН 7,0-7,2), высушивают и исследуют под иммерсионной системой микроскопа.

При микроскопии необходимо учитывать, что трихомонады имеют округлую, овальную, грушевидную, ланцетовидную, палочковидную формы. Цитоплазма трихомонад окрашивается в голубой цвет различной интенсивности, ядро - в красно-фиолетовый или красный, жгутики - в красный.

От переднего конца трихомонады отходят 4 жгутика, из которых три направлены вперед, а четвертый, окаймляя ундулирующую мембрану, идет назад и оканчивается свободно. Вдоль всего тела расположен аксостиль. Ядро овальной формы, чаще расположено ближе к передней части тела возбудителя.

Трихомонаду необходимо дифференцировать от непатогенных жгутиковых рода Воdо, Oicоmоnаs, у которых имеется 1 или 2 жгутика, а ундулирующая мембрана и аксостиль отсутствуют.

Результаты микроскопического, культурального исследований считают положительными в случае обнаружения в препарате или посевах возбудителя трихомоноза.

Сроки исследования: микроскопического - 1 день; культурального – 10 дней (табл.9).

Таблица 9