- •Лабораторная работа № 1 цветные реакциии на белки и аминокислоты.
- •1. Биуретовая реакция
- •2. Нингидриновая реакция.
- •3. Ксантопротеиновая реакция (Мульдера).
- •4. Реакция Фоля.
- •5. Реакция на тирозин (Миллона).
- •Вопросы для самоконтроля.
- •Лабораторная работа № 2. Хроматографический метод определения аминокислот
- •Радиальная (распределительная) жидкостная хроматография
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 3 кислотный гидролиз и формоловое титрование по серенсену.
- •1. Кислотный гидролиз.
- •2. Формоловое титрование.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 4 физико-химические свойства белков.
- •1. Осаждение белков при кипячении.
- •2. Реакции осаждения белков при комнатной температуре нейтральными солями — высаливание.
- •3. Диализ белка.
- •4. Осаждение белков солями тяжелых металлов.
- •5. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •6. Осаждение белков органическими кислотами.
- •7. Осаждение белков органическими растворителями.
- •8. Осаждение белков алкалоидными реактивами.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 5. Строение сложных белков.
- •Н уклеопротеиды
- •1. Гидролиз нуклеопротеидов.
- •2. Качественные реакции на открытие составных частей нуклеопротеидов.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 6 ферменты.
- •1. Влияние реакции среды на активность амилазы.
- •2. Специфичность действия ферментов.
- •3. Влияние ингибиторов и активаторов на активность амилазы.
- •4. Активность α-амилазы слюны (количественное определение).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 7 витамины.
- •1. Качественная реакция на витамин в2.
- •2. Качественная реакция на витамин рр.
- •3. Качественная реакция на витамин в6.
- •4. Качественная реакция на витамин с.
- •5. Качественная реакция на викасол (жирорастворимые витамины).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 8 липиды.
- •1. Растворимость и эмульгирование жиров.
- •2. Гидролиз (омыление) жира.
- •3. Открытие в гидролизате составных частей жира.
- •4. Открытие ненасыщенности жирных кислот в жире.
- •5. Получение нерастворимых солей высших жирных кислот.
- •6. Гидролиз лецитина (фосфатидилхолина).
- •7. Качественная реакция на холестерин (реакция Шиффа).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 9 углеводы.
- •1. Доказательство наличия гидроксильных групп
- •2. Доказательство наличия карбонильных групп (альдегидная проба Мура).
- •3. Реакции восстановления металлов и окисления моносахаридов.
- •3А. Проба Троммера.
- •3Б. Проба Фелинга.
- •3В. Получение серебряного зеркала.
- •3Г. Проба Подобедова — Молиша с α- нафтолом.
- •3Д. Проба Барфеда.
- •4. Качественные реакции на дисахариды
- •4А. Реакции на сахарозу.
- •4Б. Реакция на мальтозу и лактозу
- •5. Цветные реакции на крахмал и гликоген.
- •6. Гидролиз крахмала.
- •7. Гидролиз клетчатки.
5. Качественная реакция на викасол (жирорастворимые витамины).
Известны два природных витамина — К1 и К2, являющиеся производными нафтохинона. Витамин К1 — филлохинон, желтоватая маслянистая жидкость, К2 представляет собой желтые кристаллы. Витамин К входит в состав простетической группы фермента, участвующего в биосинтезе протромбина. Протромбин — необходимый компонент в процессе свертывания крови. Витамин К содержится в митохондриях и регулирует процессы фосфорилирования. У здорового человека витамин К постоянно синтезируется кишечной микрофлорой. Витамин К — антигеморрагический витамин. Викасол – искусственно синтезированный аналог витамина К1, обладает биологической активностью витамина. Дневная лечебная доза викасола составляет 0,015г.
Принцип метода. Викасол в присутствии цистеина в щелочной среде окрашивается в лимонно-желтый цвет.
Реактивы: викасол; 0,05% раствор; цистеин, 0,025% раствор; едкий натр, 10% раствор.
Х од работы: В пробирку вносят 5 капель раствора викасола, добавляют 5 капель раствора цистеина и 1 каплю 10% раствора едкого натра. Появляется лимонно-желтое окрашивание.
Вопросы для самоконтроля:
Что такое витамины и почему они так называются?
Как классифицируют витамины?
Что такое авитаминозы и гиповитаминоы и каковы причины их возникновения?
Какие вы знаете качественные реакции на витамины? Приведите примеры.
На чем основаны качественные реакции, проводимые в данной работе?
Какова связь между витаминами и ферментами?
Лабораторная работа № 8 липиды.
Теоретическая часть.
К липидам относятся различные по своей химической природе вещества, обладающие общим физическим свойством: они не растворимы в воде и растворимы в органических растворителях (эфире, хлороформе, ацетоне и т.п.). По химическому строению липиды разделяются на собственно жиры (нейтральные жиры) и липоиды (жироподобные вещества). Нейтральные жиры (глицериды) — это сложные эфиры глицерина и высших жирных кислот. Липоиды — жироподобные вещества — по своей химической природе разделяются на фосфатиды, стерины, цереброзиды и воска.
Общим признаком фосфатидов является наличие в составе их молекул фосфорной кислоты, какого-то аминоспирта и жирных кислот. Например, фосфатидом является лецитин, при гидролизе которого образуется глицерин, две молекулы жирных кислот, фосфорная кислота и холин.
Стерины — высокомолекулярные циклические одноатомные спирты, содержащие кольцо циклопентанпергидрофенантрена. Наиболее распространенным и биологически важным является вещество стероидной структуры — холестерин. Определение содержания холестерина в крови и тканях имеет большое значение. Для этого используются различные характерные для холестерина цветные реакции. Все они имеют одинаковый химизм. Под действием серной кислоты происходит дегидратация холестерина, в результате чего две молекулы его теряют две молекулы воды, соединяются между собой с образованием вещества, окрашенного в красный цвет (под действием одной серной кислоты), или в зеленый (под действием серной кислоты вместе с уксусным ангидридом).
Практическая часть.
1. Растворимость и эмульгирование жиров.
Реактивы: подсолнечное масло; хлороформ; вода; едкий калий, 1% раствор; карбонат натрия, 10%раствор; раствор мыла; спирт.
Ход работы: Для определения растворимости жиров берут 6 пробирок, во все наливают по несколько капель подсолнечного масла и приливают по 1-2 мл в каждую одной из следующих жидкостей: хлороформа; воды; 1% раствора едкого калия; карбоната натрия, 10%раствора; мыла и спирта. Тщательно размешивают содержимое пробирок и наблюдают растворение жира и образование устойчивых эмульсий. Результаты опыта и их объяснение записывают.