- •Лабораторная работа № 1 цветные реакциии на белки и аминокислоты.
- •1. Биуретовая реакция
- •2. Нингидриновая реакция.
- •3. Ксантопротеиновая реакция (Мульдера).
- •4. Реакция Фоля.
- •5. Реакция на тирозин (Миллона).
- •Вопросы для самоконтроля.
- •Лабораторная работа № 2. Хроматографический метод определения аминокислот
- •Радиальная (распределительная) жидкостная хроматография
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 3 кислотный гидролиз и формоловое титрование по серенсену.
- •1. Кислотный гидролиз.
- •2. Формоловое титрование.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 4 физико-химические свойства белков.
- •1. Осаждение белков при кипячении.
- •2. Реакции осаждения белков при комнатной температуре нейтральными солями — высаливание.
- •3. Диализ белка.
- •4. Осаждение белков солями тяжелых металлов.
- •5. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •6. Осаждение белков органическими кислотами.
- •7. Осаждение белков органическими растворителями.
- •8. Осаждение белков алкалоидными реактивами.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 5. Строение сложных белков.
- •Н уклеопротеиды
- •1. Гидролиз нуклеопротеидов.
- •2. Качественные реакции на открытие составных частей нуклеопротеидов.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 6 ферменты.
- •1. Влияние реакции среды на активность амилазы.
- •2. Специфичность действия ферментов.
- •3. Влияние ингибиторов и активаторов на активность амилазы.
- •4. Активность α-амилазы слюны (количественное определение).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 7 витамины.
- •1. Качественная реакция на витамин в2.
- •2. Качественная реакция на витамин рр.
- •3. Качественная реакция на витамин в6.
- •4. Качественная реакция на витамин с.
- •5. Качественная реакция на викасол (жирорастворимые витамины).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 8 липиды.
- •1. Растворимость и эмульгирование жиров.
- •2. Гидролиз (омыление) жира.
- •3. Открытие в гидролизате составных частей жира.
- •4. Открытие ненасыщенности жирных кислот в жире.
- •5. Получение нерастворимых солей высших жирных кислот.
- •6. Гидролиз лецитина (фосфатидилхолина).
- •7. Качественная реакция на холестерин (реакция Шиффа).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 9 углеводы.
- •1. Доказательство наличия гидроксильных групп
- •2. Доказательство наличия карбонильных групп (альдегидная проба Мура).
- •3. Реакции восстановления металлов и окисления моносахаридов.
- •3А. Проба Троммера.
- •3Б. Проба Фелинга.
- •3В. Получение серебряного зеркала.
- •3Г. Проба Подобедова — Молиша с α- нафтолом.
- •3Д. Проба Барфеда.
- •4. Качественные реакции на дисахариды
- •4А. Реакции на сахарозу.
- •4Б. Реакция на мальтозу и лактозу
- •5. Цветные реакции на крахмал и гликоген.
- •6. Гидролиз крахмала.
- •7. Гидролиз клетчатки.
1. Доказательство наличия гидроксильных групп
Реактивы: глюкоза, 5%-ный раствор; NaOH, 30%-ный раствор; HCl, 10%-ньй раствор; CuSO4, 1%-ный раствор.
Ход работы: К 3мл раствора глюкозы прибавляют на 1/3объема раствора NaOН и по каплям 1%-ный раствор CuSO4. Образующийся гидрат окиси меди при наличии сахара растворяется, окрашивая жидкость в синий цвет.
CuSO4 + 2NaOH = Cu (OH)2 + Na2SO4
2. Доказательство наличия карбонильных групп (альдегидная проба Мура).
Реактивы: глюкоза, 5%-ный раствор; NaOH, 30%-ный раствор; HCl, 10%-ньй раствор; CuSO4, 1%-ный раствор.
Ход работы: В пробирку наливают 2-3мл раствора глюкозы и столько же раствора NaОН. Жидкость нагревают до кипения. Появляется сначала желтое, а затем темно-бурое окрашивание и запах карамели, делающийся более заметным при подкислении жидкости, разбавленной серной кислотой. Побурение раствора и появление запаха карамели зависит от образования продуктов полимеризации альдегидов.
3. Реакции восстановления металлов и окисления моносахаридов.
Принцип метода. Моносахариды — вещества не способные подвергаться гидролизу. По химическому строению моносахариды представляют собой альдегидо- или кетономногоатомные спирты. По числу атомов углерода моносахариды подразделяются на триозы, тетрозы, пентозы, гексозы, гептозы и т.д.
Реакции восстановления металлов основаны на свойствах моносахаридов, которые легко окисляются за счёт восстановления тяжёлых металлов, благодаря наличию в молекуле углевода свободных альдегидных и кетонных групп. Например, в реакции Троммера глюкоза при взаимодействии с гидратом окиси меди (Cu(OH)2) при подогревании окисляется, а медь восстанавливается, образуя при этом гидрат закиси меди (CuOH – осадок жёлтого цвета) или же безводную закись меди (Cu2O – осадок красного цвета). Кислород идёт на окисление моносахаридов.
В щелочном растворе моносахариды, окисляясь, восстанавливают соли окиси меди в закись меди, окиси висмута — в металлический висмут, соли серебра — в металлическое серебро. На этом основан ряд способов качественного и количественного определения углеводов.
3А. Проба Троммера.
Принцип метода. Растворы гексоз, например, глюкозы и фруктозы в щелочной среде восстанавливают при нагревании оксид меди, (II) в гемиоксид меди, а сами окисляют до альдоновых кислот. Эту реакцию для глюкозы в общем виде можно представить уравнениями
Р еактивы: глюкоза, 5%-ный раствор; NaOH, 10%-ный раствор; CuSO4, 5%-ный раствор.
Ход работы: В пробирку к 3мл раствора глюкозы добавляют растворы гидроксида натрия (1мл) и сульфата меди (5 капель). Выпадает осадок гидроксида меди (II), который при перемешивании или встряхивании пробирки растворяется, и раствор приобретает голубой цвет. Верхний слой жидкости осторожно нагревают в пламени горелки до кипения. Появление желтого осадка гидроксида меди (I), а затем и красного осадка гемиоксида меди указывает на окисление глюкозы и восстановление меди.
3Б. Проба Фелинга.
Принцип метода. В реактиве Фелинга ионы меди (II) находятся в виде комплексного соединения с тартратами. Механизм реакции гексоз (и всех редуцирующих углеводов) с реактивом Фелинга такой же, как в реакции Троммера. Преимуществом реактива Фелинга является то, что медь при избытке реактива не выпадает в виде окиси меди (II). Дисахариды и полисахариды взаимодействуют с реактивом Фелинга после кипячения с минеральными кислотами. Жидкость Фелинга представляет собой медный алкоголят сегнетовой соли:
Реактивы: глюкоза, 5%-ный раствор; реактив Фелинга.
Ход работы: В пробирку вносят 1мл раствора глюкозы и 1мл реактива Фелинга. Смесь перемешивают и нагревают на пламени горелки до кипения. Наблюдают образование красного осадка гемиоксида меди. Кислород идёт на окисление углевода.