- •Лабораторная работа № 1 цветные реакциии на белки и аминокислоты.
- •1. Биуретовая реакция
- •2. Нингидриновая реакция.
- •3. Ксантопротеиновая реакция (Мульдера).
- •4. Реакция Фоля.
- •5. Реакция на тирозин (Миллона).
- •Вопросы для самоконтроля.
- •Лабораторная работа № 2. Хроматографический метод определения аминокислот
- •Радиальная (распределительная) жидкостная хроматография
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 3 кислотный гидролиз и формоловое титрование по серенсену.
- •1. Кислотный гидролиз.
- •2. Формоловое титрование.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 4 физико-химические свойства белков.
- •1. Осаждение белков при кипячении.
- •2. Реакции осаждения белков при комнатной температуре нейтральными солями — высаливание.
- •3. Диализ белка.
- •4. Осаждение белков солями тяжелых металлов.
- •5. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •6. Осаждение белков органическими кислотами.
- •7. Осаждение белков органическими растворителями.
- •8. Осаждение белков алкалоидными реактивами.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 5. Строение сложных белков.
- •Н уклеопротеиды
- •1. Гидролиз нуклеопротеидов.
- •2. Качественные реакции на открытие составных частей нуклеопротеидов.
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 6 ферменты.
- •1. Влияние реакции среды на активность амилазы.
- •2. Специфичность действия ферментов.
- •3. Влияние ингибиторов и активаторов на активность амилазы.
- •4. Активность α-амилазы слюны (количественное определение).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 7 витамины.
- •1. Качественная реакция на витамин в2.
- •2. Качественная реакция на витамин рр.
- •3. Качественная реакция на витамин в6.
- •4. Качественная реакция на витамин с.
- •5. Качественная реакция на викасол (жирорастворимые витамины).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 8 липиды.
- •1. Растворимость и эмульгирование жиров.
- •2. Гидролиз (омыление) жира.
- •3. Открытие в гидролизате составных частей жира.
- •4. Открытие ненасыщенности жирных кислот в жире.
- •5. Получение нерастворимых солей высших жирных кислот.
- •6. Гидролиз лецитина (фосфатидилхолина).
- •7. Качественная реакция на холестерин (реакция Шиффа).
- •Вопросы для самоконтроля:
- •Лабораторная работа № 9 углеводы.
- •1. Доказательство наличия гидроксильных групп
- •2. Доказательство наличия карбонильных групп (альдегидная проба Мура).
- •3. Реакции восстановления металлов и окисления моносахаридов.
- •3А. Проба Троммера.
- •3Б. Проба Фелинга.
- •3В. Получение серебряного зеркала.
- •3Г. Проба Подобедова — Молиша с α- нафтолом.
- •3Д. Проба Барфеда.
- •4. Качественные реакции на дисахариды
- •4А. Реакции на сахарозу.
- •4Б. Реакция на мальтозу и лактозу
- •5. Цветные реакции на крахмал и гликоген.
- •6. Гидролиз крахмала.
- •7. Гидролиз клетчатки.
3В. Получение серебряного зеркала.
Принцип метода. Глюкоза восстанавливает аммиачный раствор серебра, образуемый при взаимодействии нитрата серебра с гидроксидом натрия и водным раствором аммиака, до металлического серебра:
Реактивы: глюкоза, 1%-ный раствор; аммиачное азотнокислое серебро, 1%-ный раствор.
Ход работы: В пробирку наливают 2мл 1% раствора глюкозы и 1мл аммиачного раствора азотнокислого серебра. Осторожно нагревают. Стенки пробирки покрываются слоем металлического серебра.
3Г. Проба Подобедова — Молиша с α- нафтолом.
Принцип метода. Реакция α- нафтолом является общей для всех моносахаридов. При взаимодействии их с концентрированной серной кислотой из пентоз образуется фурфурол, а из гексоз — омсиметилфурфурол В присутствии α-нафтола как фурфурол, так и оксиметилфурфурол дают лейкосоединение (бесцветное), а это лейкосоединение окисляется серной кислотой в окрашенное хиноидное соединение (красно-фиолетового цвета).
Реактивы: глюкоза, 1% раствор; 10% спиртовой раствор α-нафтола; концентрированная серная кислота.
Ход работы: В пробирку помещают 1мл 1% раствора глюкозы, 2капли 10% спиртового α-нафтола и по стенке пробирки осторожно приливают 2мл концентрированной серной кислоты. Серная кислота опускается на дно пробирки, и на границе двух жидкостей образуется кольцо красно-фиолетового цвета.
3Д. Проба Барфеда.
Принцип метода. Гексозы в реакции с ацетатом меди приводят к образованию гемиоксида меди. Суммарное уравнение реакции для глюкозы имеет вид
Эта реакция протекает в среде со значением рН, близким к нейтральному (7,0). В этих условиях редуцирующие дисахариды не окисляются, что дает возможность отличить их от моносахаридов.
Реактивы: глюкоза, 5%-ный раствор; реактив Барфеда.
Ход работы: В пробирку вносят 1мл раствора глюкозы и 1мл реактива Барфеда. Смесь перемешивают и осторожно нагревают, в пламени горелки до кипения. Наблюдают образование красного осадка гемиоксида меди.
4. Качественные реакции на дисахариды
4А. Реакции на сахарозу.
Принцип метода. Сахароза не восстанавливает окислов металлов, но если на раствор сахарозы подействовать кислотой, то происходит расщепление сахарозы на глюкозу и фруктозу, которые способны восстанавливать окислы металлов.
Реактивы: сахароза, 5%-ный раствор; HCl (конц.); NаОН 5%-ный раствор; СuSO4, 1%-ный раствор; СоSО4, 2%-ный раствор.
Реакции восстановления металлов. В две пробирки вносят по 3мл 5%-ного раствора сахарозы. В одну из них добавляют 1-2 капли концентрированной соляной кислоты и нагревают пробирку 15 минут на водяной бане при 1000С. Вторая пробирка служит контролем. Затем в обе пробирки добавляют по 2 мл 5%-ного раствора гидроксида натрия или гидроксида калия, по 5 капель 1%-ного раствора СuSO4 и нагревают. В первой пробирке, где произошло расщепление сахарозы, образуется закись меди, во второй — закиси меди не образуется.
Реакция с солями кобальта. В пробирку с 2 мл 5%-ного раствора сахарозы добавляют 1 мл 5%-ного раствора NаОН и несколько капель 2%-ного раствора азотнокислого кобальта. Раствор приобретает фиолетовое окрашивание.
4Б. Реакция на мальтозу и лактозу
Принцип метода. В зависимости от способа соединения молекул моносахаридов друг с другом, дисахариды обладают, или же наоборот не обладают, редуцирующими свойствами. Мальтоза и лактоза имеют в своей молекуле по одной свободной альдегидной группе и обладают редуцирующими свойствами; сахароза не имеет свободной ни альдегидной, ни кетонной группы и этими свойствами не обладает.
Реактивы: мальтоза или лактоза, 5%-ный раствор; NаОН, 5%-ный раствор; СuSO4, 5%-ный раствор.
Ход работы: В пробирку с 5 мл 5% раствора мальтозы или лактозы добавляют 1 мл 5% раствора NаОН и 5 капель 5% раствора сульфата меди, нагревают. Выпадает красный осадок закиси меди. Для сравнения ту же реакцию проводят с сахарозой.