Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
БИОХИМИЯ - методичка.doc
Скачиваний:
54
Добавлен:
01.05.2019
Размер:
1.22 Mб
Скачать

3В. Получение серебряного зеркала.

Принцип метода. Глюкоза восстанавливает аммиачный раствор серебра, образуемый при взаимодействии нитрата серебра с гидроксидом натрия и водным раствором аммиака, до металлического серебра:

Реактивы: глюкоза, 1%-ный раствор; аммиачное азотнокислое серебро, 1%-ный раствор.

Ход работы: В пробирку наливают 2мл 1% раствора глюкозы и 1мл аммиачного раствора азотнокислого серебра. Осторожно нагревают. Стенки пробирки покрываются слоем металлического серебра.

3Г. Проба Подобедова — Молиша с α- нафтолом.

Принцип метода. Реакция α- нафтолом является общей для всех моносахаридов. При взаимодействии их с концентрированной серной кислотой из пентоз образуется фурфурол, а из гексоз — омсиметилфурфурол В присутствии α-нафтола как фурфурол, так и оксиметилфурфурол дают лейкосоединение (бесцветное), а это лейкосоединение окисляется серной кислотой в окрашенное хиноидное соединение (красно-фиолетового цвета).

Реактивы: глюкоза, 1% раствор; 10% спиртовой раствор α-нафтола; концентрированная серная кислота.

Ход работы: В пробирку помещают 1мл 1% раствора глюкозы, 2капли 10% спиртового α-нафтола и по стенке пробирки осторожно приливают 2мл концентрированной серной кислоты. Серная кислота опускается на дно пробирки, и на границе двух жидкостей образуется кольцо красно-фиолетового цвета.

3Д. Проба Барфеда.

Принцип метода. Гексозы в реакции с ацетатом меди приводят к образованию гемиоксида меди. Суммарное уравнение реакции для глюкозы имеет вид

Эта реакция протекает в среде со значением рН, близким к нейтральному (7,0). В этих условиях редуцирующие дисахариды не окисляются, что дает возможность отличить их от моносахаридов.

Реактивы: глюкоза, 5%-ный раствор; реактив Барфеда.

Ход работы: В пробирку вносят 1мл раствора глюкозы и 1мл реактива Барфеда. Смесь перемешивают и осторожно нагревают, в пламени горелки до кипения. Наблюдают образование красного осадка гемиоксида меди.

4. Качественные реакции на дисахариды

4А. Реакции на сахарозу.

Принцип метода. Сахароза не восстанавливает окислов металлов, но если на раствор сахарозы подействовать кислотой, то происходит расщепление сахарозы на глюкозу и фруктозу, которые способны восстанавливать окислы металлов.

Реактивы: сахароза, 5%-ный раствор; HCl (конц.); NаОН 5%-ный раствор; СuSO4, 1%-ный раствор; СоSО4, 2%-ный раствор.

Реакции восстановления металлов. В две пробирки вносят по 3мл 5%-ного раствора сахарозы. В одну из них добавляют 1-2 капли концентрированной соляной кислоты и нагревают пробирку 15 минут на водяной бане при 1000С. Вторая пробирка служит контролем. Затем в обе пробирки добавляют по 2 мл 5%-ного раствора гидроксида натрия или гидроксида калия, по 5 капель 1%-ного раствора СuSO4 и нагревают. В первой пробирке, где произошло расщепление сахарозы, образуется закись меди, во второй — закиси меди не образуется.

Реакция с солями кобальта. В пробирку с 2 мл 5%-ного раствора сахарозы добавляют 1 мл 5%-ного раствора NаОН и несколько капель 2%-ного раствора азотнокислого кобальта. Раствор приобретает фиолетовое окрашивание.

4Б. Реакция на мальтозу и лактозу

Принцип метода. В зависимости от способа соединения молекул моносахаридов друг с другом, дисахариды обладают, или же наоборот не обладают, редуцирующими свойствами. Мальтоза и лактоза имеют в своей молекуле по одной свободной альдегидной группе и обладают редуцирующими свойствами; сахароза не имеет свободной ни альдегидной, ни кетонной группы и этими свойствами не обладает.

Реактивы: мальтоза или лактоза, 5%-ный раствор; NаОН, 5%-ный раствор; СuSO4, 5%-ный раствор.

Ход работы: В пробирку с 5 мл 5% раствора мальтозы или лактозы добавляют 1 мл 5% раствора NаОН и 5 капель 5% раствора сульфата меди, нагревают. Выпадает красный осадок закиси меди. Для сравнения ту же реакцию проводят с сахарозой.