Тесты на специфические антитрепонемные анютитела.

Реакция адсорбции флюоресцирующих трепонемных антител (ФТА-адс). Реакция ФТА-адс - непрямая реакция иммунофлюоресценции, в которой в качестве антигена используется T. pallidum. Фиксированные ацетоном трепонемы, полученные из тестикулярной ткани инфицированного кролика, инкубируются с инактивированной сывороткой и связавшиеся антитела выявляют меченным флюоресцеином коньюгатом (флюоресцеирующие антитела к иммуноглобулину человека) при люминесцентной микроскопии. Сыворотку предварительно адсорбируют суспензией непатогенных трепонем для удаления неспецифических перекрестно-реагирующих антител, которые могут быть направлены против комменсальных трепонем. Реакция ФТА-адс положительна примерно у 80, 100 и 95 % больных первичным, вторичным и третичным сифилисом соответственно, и, в отличие от КЛВЗ-теста, остается положительной после успешной терапии.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). В этой реакции антиген T. pallidum связан на поверхности эритроцитов, и специфические антитела исследуемой сыворотки вызывают гемагглютинацию. Как и в тесте ФТА-адс, сыворотка должна быть предварительно адсорбирована непатогенными трепонемами для удаления антител против комменсальных спирохет. РНГА менее чувствительна, чем ФТА-абс при первичном сифилисе (положительна в 65 %) но обе дают одинаковые результаты при вторичном и позднем сифилисе; РНГА также остается положительной после инфекции в течение всей жизни. Эта реакция может также использоваться для обнаружения локального образования антитрепонемных антител в цереброспинальной жидкости, показателя нейросифилиса.

Ранее большое значение имела реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ). Она основана на способности антител, присутствующих в исследуемой сыворотке, иммобилизировать трепонемы. Суспензию трепонем, полученных из ткани яичка инфицированного кролика, смешивают с комплементом и исследуемой сывороткой. Смесь помещают в инкубационную камеру на 30 минут при 35 C в атмосфере 5 процентов углекислого газа и 95 процентов азота. Через 18 часов готовят препараты раздавленной капли из содержимого каждой пробирки, подсчитывают 25 трепонем и определяют сотношение подвижных и неподвижных трепонем. Реакция иммобилизации высоко специфична и, как правило, не дает ложноположительных результатов.

Другие серологические реакции. Производство моноклональных атител к T. pallidum позволило создавать диагностические системы, основанные на обнаружении реакций антител к специфическим трепонемным антигенам. Такие исследования используют технологию иммуноферментного анализа, позволяющий проводить быстрый скрининг большого числа проб с потенциально высокой специфичностью.

Проблемы серодиагностики сифилиса.

В некоторых случаях как неспецифические, так и специфические тесты дают ложноположительные результаты. Тест КЛВЗ может давать временный положительный результат после какого-либо сильного иммунного стимула типа острой бактериальной или вирусной инфекции, а также в результате иммунизации. Более постоянные ложноположительные результаты встречаются у лиц с аутоиммунными заболеваниями или коллагенозом, у наркоманов и лиц с гипергаммаглобулинемией. Ложноположительные результаты обычно становятся очевидными при отрицательных результатах специфических серологических тестов, но в некоторых случаях результаты ФТА-адс могут быть также быть положительными или пограничными.

Изредка тест ФТА-адс может быть положительным, а неспецифический тест КЛВЗ отрицательным. При других спирохетозах типа возвратного тифа, фрамбезии, пинты и лептоспироза результаты могут быть положительными как в специфических, так и неспецифических реакциях. Особенно затруднителен дифференциальный диагноз сифилиса и фрамбезии у иммигрантов из регионов, эндемичных по фрамбезии.

Прямое обнаружение ДНК трепонем в клиническом материале молекулярными методами типа полимеразной цепной реакции в будущем может играть роль в подтверждении диагноза сифилиса в трудных или атипичных случаях.