основывается на
выявлении:
В О З Б У
Д И Т Е Л Я :
Прямыми
методами:
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИМ
( микроскопическим -
БИОЛОГИЧЕСКИМ
экспрессная
)
Методами
выявления специфических изменений,
вызванных
в организме возбудителем :
Методами
выявления
антигенов возбудителя:
ИФА
РИА
ЭКСПРЕССНАЯ
РП
РН
ДИАГНОСТИКА
РОНГА
РСКМикробиологический диагноз
МИКРОСКОПИЧЕСКИМ
РАННЯЯ ДИАГНОСТИКА
СЕРОЛОГИЧЕСКИМ
ПОЗДНЯЯ,
иногда -Аллергическим ретроспективная
РИФ
Микроскопическое же исследование может быть не только самостоятельным методом установления диагноза, но и этапом других методов исследования и диагностики. Например, при бактериологической диагностике неоднократно проводится микроскопическое исследование мазков из исследуемого материала, колонии, выделенной чистой культуры, но основанием для диагноза является выделение культуры и ее идентификация по комплексу свойств. Равным образом, серологическое исследование может быть этапом идентификации выделенной чистой культуры, но серологическая диагностика - самостоятельный метод диагностики. В соответствии с этим мы и определяем методы диагностики бактериальных инфекций.
Микробиологическая диагностика начинается с взятия исследуемого материала. Исследуемым материалом могут быть выделения больного (кал, моча, мокрота, гной, отделяемое слизистых), биопсийный материал (кровь, ликвор, кусочки взятых во время операции или обследования тканей), аутопсийный материал, взятый при вскрытии трупа. Иногда микробиологическому исследованию подвергаются объекты внешней среды - вода, пища, почва, воздух, материал от животных. Взятый материал сопровождается направлением в лабораторию, обеспечивается правильная транспортировка и хранение исследуемого материала.
Микроскопический метод диагностики - диагностика заболевания путём микроскопического выявления и идентификации возбудителя по морфологическим и тинкториальным свойствам.
Достоинства микроскопического метода - быстрота, простота, доступность, экономичность диагностики. Это - метод ранней диагностики, т.е. диагноз может быть получен с первых дней заболевания. Быстрота получения ответа (не более часа) делает этот метод методом экспрессной диагностики.
Однако, большие достоинства метода соседствуют с его серьёзными недостатками. Микроскопический метод обладает малой надежностью вследствие малой чувствительности и малой точности. Например, чтобы обнаружить туберкулезную палочку в мокроте надо, чтобы ее содержание доходило до 100 000 в 1 мл. Идентификация возбудителя только на основании его морфологических и тинкториальных свойств в редких случаях является достаточной, так как именно эти свойства обычно одинаковы у патогенных и родственных им непатогенных микроорганизмов. Микроскопический метод диагностики обычно является лишь ориентировочным. Основным он считается при некоторых протозойных инфекциях (малярия, амебиаз и др.), важным - при острой гонорее.
Учитывая достоинства микроскопического метода, стараются повысить его чувствительность за счет концентрирования микроорганизмов в исследуемом материале (центрифугирование, флотация, использование предварительного кратковременного подращивания микроорганизмов на питательных средах и др.), использования люминесцентной микроскопии (светящиеся объекты на темном фоне заметнее, чем при обычных окрасках). Точность диагностики повышают за счет комбинирования микроскопии с серологическими реакциями для выявления и идентификации микроорганизмов по их антигенной структуре - применения реакции иммунофлюоресценции.
Бактериологический метод диагностики - диагностика заболевания путём выделения и идентификации возбудителя в чистой культуре.
Этот метод является основным методом микробиологической диагностики. Он дает возможность поставить ранний диагноз, чувствителен, точен. Благодаря тому, что выделяется чистая культура возбудителя, метод дает возможность управлять ходом лечения: определять чувствительность к лекарственным препаратам и соответственно выбирать оптимальную комбинацию антимикробных препаратов для лечения, использовать чистую культуру возбудителя для приготовления аутовакцины при лечении хронических процессов. Благодаря высокой чувствительности метода результаты бактериологического исследования служат основанием для решения вопросов реабилитации больного: только после отрицательных результатов посева кала больной брюшным тифом может быть выписан из стационара, решен вопрос о допуске к работе лиц, работающих в пищевых учреждениях и т.п.
При изучении общей микробиологии студенты знакомятся с общими схемами выделения чистых культур микроорганизмов и их идентификации по комплексу свойств. При рассмотрении вопросов частной медицинской микробиологии необходимо помнить эти схемы, но понимать, что в известном Вам виде они практически не используются. Применительно к диагностике конкретного заболевания эти схемы изменяются, и такие изменения необходимо для себя отметить, причем запоминать их лучше всего основываясь на своеобразии заболевания и свойств возбудителя. Например, почти никогда не производится посев исследуемого материала на мясо-пептонный агар, для этого используют дифференицально-диагностические, элективные или специальные среды, иногда производят посев на жидкие среды обогащения и т.п. Выбор подозрительной колонии редко основывается только на морфологии и микроскопическом составе колоний, часто приходится учитывать характер роста на дифференциально-диагностических средах, ставить реакцию агглютинации с материалом из колонии и др. Такие особенности применения бактериологического метода диагностики будут для студентов опознавательными признаками, способствующими лучшему усвоению материала не только касающегося методов диагностики, но и биологических свойств возбудителя и характеристики заболевания.
Биологический метод диагностики (биопроба) - диагностика заболевания путём выявления возбудителя или его токсина при введении исследуемого материала лабораторным животным с последующей диагностикой развивающейся инфекции или интоксикации у животного, нередко - с одновременной постановкой реакции биологической нейтрализации для идентификации вида и серовара возбудителя и его токсина.
Этот метод диагностики применяется в настоящее время относительно редко. Он имеет ограничения, связанные с тем, что далеко не все возбудители заболеваний у человека патогенны для животных, а определение в организме человека бактериальных токсинов таким методом ограничивается необходимостью высокого содержания токсина. Обычно биопроба используется при диагностике чумы, туляремии, ботулизма, сальмонеллезов и является дополнительным методом прямого выявления возбудителя в организме больного.
Использование бактериологического метода диагностики позволяет получить результат обычно в течение 2 - 3-х, иногда 4 - 6-ти суток, в зависимости от скорости роста бактерий, выбранной схемы выделения культуры и сложности методов идентификации. Биологический метод диагностики обычно дает результат в течение одних или более суток. Микроскопический метод - метод экспрессной диагностики.
Названные методы, основанные на прямом определении присутствия возбудителя в организме, обеспечивают раннюю диагностику инфекционного заболевания, в первые дни заболевания. Необходимым условием для эффективности этих методов является присутствие возбудителя в исследуемом материале. Если возбудитель, даже находясь в организме, не попадает во взятый для исследования материал от больного, диагностика указанными методами не возможна.
Кроме того, далеко не всегда патогенный микроб, присутствующий в организме больного, является возбудителем диагностируемого заболевания. Человек может быть здоровым микробоносителем одного возбудителя, а в настоящее время заболевание у него вызвано другим возбудителем. Особенно сложно решается вопрос о признании обнаруженного в организме микроорганизма в случае заболеваний, вызванных условно-патогенными и считающимися непатогенными микроорганизмами. Мы будем вести об этом речь при рассмотрении вопросов клинической микробиологии. Здесь лишь укажем, что одним из доказательств этиологической роли микроорганизма является характер ответной реакции иммунной системы организма на антигены этого микроба.
Поэтому в комплексной диагностике инфекционных заболеваний важную роль играют методы косвенного определения присутствия возбудителя в организме, основанные на выявлении специфических изменений в организме, вызванных возбудителем. Это - серологическая и аллергическая диагностика.
Серологический метод диагностики - диагностика заболевания путём выявления в сыворотке больного антител к возбудителю.
Серологическая диагностика является самостоятельным методом диагностики, в то время как серологическое исследование используется для серологической идентификации выделенной чистой культуры и для экспрессной индикации микроорганизма во внешней среде и в организме.
Серологический диагноз состоит во взятии крови, получении из нее сыворотки и определении в ней титров антител к антигенам предполагаемого возбудителя с помощью известных антигенов-диагностикумов.