Определение бактерий родаSalmonella

Ход определения. Навеску продукта массой 25 г объединенной пробы вносят во флакон , содержащий 100 мл Среды обогащения (Кауфмана, селенитовой или хлористо-магниевой «М»), и помещают в термостат для культивирования при 37°С. Через 16-24 ч делают посев из Среды обогащения на среду Эндо, распределяя материал шпателем по поверхности Среды. Посевы культивируют при 37°С в течение 20-24 ч.

Выявление сальмонелл: на среде Эндо сальмонеллы растут в виде круглых бесцветных или слегка розоватых прозрачных колоний. Из подозрительных колоний готовят мазки, окрашивают по Граму.

В случае отсутствия роста на элективных средах и при наличие роста на средах обогащения посевы пересеивают из сред Кауфмана, Киллиана и других в чашки Петри со средой Эндо или Левина и термостатируют при 37°С в течение 24 ч. В дальнейшем исследование проводят по методике бактериологического исследования мяса.

Определение бактерий группы кишечных палочек

Ход определения. В среду Кесслер или «ХБ» вносят 5 мл испытуемой взвеси, помещают в термостат при 37°С на 18-20 ч. При росте бактерий кишечных палочек на среде Кесслер в поплавке образуется газ, а среда «ХБ» приобретает желтый цвет.

Для определения бактерий группы кишечных палочек при обнаружении желтого цвета на среде «ХБ» или газа в поплавке на среде Кесслер проводят высев на чашки Петри со средой Эндо или Левина и помещают в термостат при 37°С на 18-20 ч. Дальнейшее исследование ведут по методике бактериологического исследования мяса.

Определение бактерий родаProteusв н-форме

Ход определения. 5 мл анализируемой взвеси вносят в конденсационную воду свежескошенного МПА, не касаясь поверхности Среды (метод Шукевича). Вертикально поставленные пробирки помещают в термостат на 37°С в течение 18-24ч.

Выявление протея: на скошеном МПА культура поднимается из конденсационной жидкости вверх по поверхности среды в виде вуалеобразного налёта с голубым оттенком. Из культуры готовят мазки, окрашивают их по Граму, определяют подвижность. Обнаружение грамотрицательных подвижных (Н-форм) мелких палочек указывают на наличие бактерий родаProteus.

Определение коагулазоположительных стафилококков

Ход определения. Из взвесе (1:10) проводят посев по методу Дригальского на желчно-солевой агар (ЖСА), содержащий 6,5% хлорида натрия для выявления лецитиназной активности. Посевы термостатируют при 37°С в течение 24 ч.

Выявление коагулазоположительных стафилококков: на ЖСА колонии токсигенных стафилококков образуют «радужный венчик». Из подозрительных колоний готовят мазки, окрашивают по Граму.

Наличие грамположительных стафилококков, давших положительную реакцию плазмокоагуляции и реакцию на лецитиназу, свидетельствуют о присутствии токсигенных стафилококков.

Определение сулъфитредуцирующих клостридий

Ход определения. В пробирки, содержащей 9 мл расплавленной и охлаждённой до 45°С среды Вильсон-Блера, вносят по 1 мл десятикратных разведений взвеси исследуемого продукта. Тщательно перемешивают посевной материал, помещают в термостат и культивируют при 46°С в течение 8-12 ч или при 37°С в течение 20 ч.

Определение сульфитвосстановителей(Cl.perfringens,Cl.sporogenes): при росте клостридий сульфитвостановителей на среде Вильсон-Блера, на которой в результате восстановления сульфата натрия в сульфит натрия происходит взаимодействие с хлоридом железа, среда чернеет за счёт образования сульфита железа.

За положительный титр клостридий принимают то максимальное разведение взвеси, в посеве которой произошло почернение среды. Например, если характерные изменения наблюдаются в пробирках с разведением 10~², то считают, что в 1 г исследуемого продукта 10²микробных клеток.

Рис. 28. Автоклавы

Рис. 30. Термостаты