- •Рассказать методологию и подходы биотестирования, основные требования к методам, тест-объектам и тест-функциям.
- •Рассказать суть методологии биоиндикации. В чем отличие методов биотестирования от методов, предполагаемых биоиндикационные исследования?
- •В чем преимущества и недостатки использования тест-объектов растительного происхождения в биотестировании? а в биоиндикации?
- •Влияние стрессирующих воздействий на морфологический гомеостаз (раскрыть на конкретных примерах). Назвать типы, классы или виды живых организмов, используемых в данном подходе биотеситрования.
- •В чем преимущества и недостатки биоиндикаторов животного происхождения? Назвать типы, классы и виды животных, используемых в биоиндикации.
- •Как провести оценку энергетического обмена в рамках физиологического подхода биотестирования. Суть подхода.
- •В чем преимущества использования клеток высших растений в цитогенетических тестах. Назвать виды растений, применяемых в качестве тест-объектов радиационного и химического загрязнения.
- •Принцип методов биоиндикации качества атмосферного воздуха с помощью лишайников. Оценочная шкала. Индекс полеотолерантности
- •Как провести оценку нарушения процессов роста на примере растительных объектов (например, колеоптилей злаковых культур) в рамках физиологического подхода биотестирования.
- •Эффективность биохимических тестов при исследовании состояния организма и среды обитания. Рассказать суть любого метода, применяемого в данном подходе.
- •Методы биоиндикации воды с помощью макрофитов. Прямые и косвенные индикаторы. Коэффициенты достоверности и значимости. Индекс неоднородности Симпсона.
- •Как и какие клетки млекопитающих возможно использовать в цитогенетических тестах. В чем преимущества? Назовите известные Вам методы.
- •Методы оценки флуктуирующей асимметрии.
- •Иммунологический подход.
- •Как реконструировать дозу ионизирующего излучения, полученную человеком с помощью микроядерного теста. В чем принцип метода?
- •Генетический подход оценки качества окружающей среды. Предложить бальную оценку состояния тест-объектов по уровню генетических нарушений. Указать известные методы, предлагаемые данным подходом.
- •Перечислить краткосрочные (экспресс) тесты для выявления мутагенных и канцерогенных химических веществ. Предложить тест-объекты, применяемые для этих целей.
- •Провести биоиндикацию качества воды в проточном водоеме по системе сапробности. Рассчитать индекс сапробности. Назвать организмы-индикаторы (типы, классы, виды).
- •Провести предварительное обследование водоема
- •Реконструировать дозу ионизирующего излучения, полученную человеком, по хромосомным аберрациям в лимфоцитах периферической крови. В чем принцип метода?
- •Перечислить требования и преимущества принципа биотестирования с помощью беспозвоночных. Охарактеризовать известные методы (на примере любой природной среды в рамках любого подхода).
- •Применять на практике методы ботанического, зоологического, альгологического, микробиологического анализов почв в рамках биоиндикационного подхода.
- •Рассказать преимущества и недостатки использования микроорганизмов в качестве биоиндикаторов. Колииндекс и колититр. Общее микробное число.
- •Провести оценку трофических свойств воды и почвы с помощью макрофитов. Коэффициент общности по Жаккару и Соренсену. Индекс Коха. Коэффициент дифференциальности.
- •Провести оценку качества воды с помощью олигохентного индекса. В чем суть метода?
- •Провести оценку качества воды с помощью олигохентного индекса. В чем суть метода?
- •В чем преимущества и недостатки использования клеток микроорганизмов для генетического анализа? Дать суть методов генетического мониторинга с помощью микроорганизмов.
- •Составить схему отбора проб воды в локальных водоемах для импактного мониторинга предприятия.
- •Составить схему отбора проб воды в текучем водоеме для импактного мониторинга предприятия.
- •Составить схему отбора проб почвы для импактного мониторинга предприятия.
- •Составить схему рекогносцировочной поездки для регионального мониторинга территории
- •Составить схему проведения биологического мониторинга наземной территории, загрязненной нефтепродуктами
- •Составить схему проведения биологического мониторинга водоема, загрязненного тяжелыми металлами и радионуклидами.
- •Составить общую схему регионального мониторинга территории для проведения природоохранных мероприятий (например, создания парковой зоны или заказника).
- •Составьте схему биологического мониторинг водоема-охладителя атомной станции, в котором наблюдается сильная эвтрофикация, приводящая к засорению фильтров для забора воды.
- •Предложите набор экспресс-методов биомониторинга водоема-охладителя атомной станции для принятия решения о мероприятиях по обновлению его видового состава.
- •Составить схему этапов экологической экспертизы территории для разрешения строительства химического предприятия.
- •Предложите набор цитогенетических экспресс-методов биомониторинга наземной территории в районе расположения атомной станции.
- •Предложите набор экспресс-методов биоиндикации для глобального биомониторинга проточных водоемов
- •Предложить схему эксперимента (подход биотестирования, тест-организм(ы), тест-функции) для оценки влияния физического (химического) фактора на организм.
- •Предложить батарею тестов для проведения биологического мониторинга городской территории, расположенной в районе размещения базовой станции сотовой связи.
Составить схему проведения биологического мониторинга водоема, загрязненного тяжелыми металлами и радионуклидами.
1) Загрязнение водоема радионуклидами может служить следствием работы атомных станций. К видам загрязнений от атомных станций относят радиационное и тепловое загрязнение. В данном случае рассматривается радиационное загрязнение водоема.
Необходимо исследовать данную территорию для анализа источника загрязнения: провести оценку температуры (дозиметрию), динамики видового состава водоема, полную оценку биоразнообразия. Для этого можно проводить учет выживаемости видов водоема, оценку содержания кислорода, оценку трофических свойств водоема с помощью макрофитов, а также определять сапробность водоема по методу Пантле и Бука.
Также для анализа источника загрязнения можно проводить химичекий анализ.
Поскольку радиация как следствие пребывания радионуклидов в водоеме может вызывать мутагенные эффекты у организмов, следует использовать методы генетического подхода. (например, тест Эймса)
Следующий шаг – принять меры по минимализации данного воздействия. Это может вызвать самовосстановление водной экосистемы.
Следует провести все указанные ранее методы биоиндикации водоема, выяснить, какие организмы обитают в данном водоеме, а также учесть климат данной местности. Необходимо сопоставить состояние водоема и его биоты с водоемом той же местности. Сравнить состояние водоема в разных пунктах позволяет метод Пантле и Бука.
Если самовосстановления не происходит, необходимо небольшое вмешательство в водную экосистему, например, стоит запустить определенный вид организмов. При этом нужно учитывать, какой фрагмент трофической цепи и на каокм этапе был нарушен.
2) Загрязнение водоема тяжелыми металлами может служить результатом работы промышленных предприятий. В этом случае можно проводить импактный мониторинг локального водоема. Можно проводить исследование поверхностных вод, грунта, почвы близ берега на содержание в ней поллютантов.
1. Для оценки загрязнения поверхностных вод необходимо провести отбор репрезентативных проб воды из исследуемого водоема.
Степень, до которой одиночную малую пробу можно считать характерной для большой водной массы, зависит от следующих факторов:
- однородности отбираемой водной массы
- количества точек пробоотбора
- размера отдльных проб
- способа отбора проб
Пробы могут быть простыми и смешанными, отбор можно проводить разово или регулярно.
Пробы обычно отбирают с глубины 20 -30 см от поверхности , Объем проб модет варьировать от 1-2 до 15-20 л и более.
К биологическому анализу приступают немедленно, хранить пробы воды допускается не более суток в холодильнике.
2. Для оценки лизоцимной активности микробиоценоза водоема можно использовать лизоцимный микробиологический метод.
Лизоцим – мурамидаза, фермент класса гидролаз.
- Катализирует гидролиз гликозидных связей в полисахаридных цепях муреинов, что ведет к разрушению оболочки бактериальной клетки.
- Обнаружен у фагов, бактерий, растений, животных (в слюне, слезах, на слизистой оболочке носа и т.д.)
- В организме лизоцим выполняет функцию неспецифического антибактериального барьера.
- В водной среде регистрируется широкий спектр организмов, обладающих лизоцимной активностью и играющих значительную роль в самоочищении водоема.
- При поступлении промышленно-бытовых стоков в воду происходит селективный отбор штаммов, обладающих антилизоцимным признаком, обеспечивающим им преимущество в заполнении экологических ниш в водоеме.
Принцип метода:
Микроорганизмы, формирующие водные биоценозы, образуют функциональную систему «лизоцим − антилизоцим». В основу метода взято определение микробиологического индекса «Л», основанное на изучении количественных и качественных характеристик между микроорганизмами, обладающими лизоцимным (ЛА) и антилизоцимным (АЛА) признаками.
3. Для анализа сапробности можно применять метод Пантле и Бука.
- В полевых условиях для оценки сапробности проводят предварительное обследование водоема. Следует указать, что водоем реагирует на загрязнение целым комплексом взаимосвязей биотической и абиотической среды.
- Прежде чем приступить к об следованию, необходимо иметь сведения о гидрологическом ре жиме водоема: расходах воды, характере водосборной площади, расположении, количестве и качестве выпусков сточных вод, наличии загрязненных территорий вдоль берега водоема.
- В момент осмотра водоема в полевом журнале отмечают температуру воды, ее прозрачность (по белому диску Секке), наличие или отсутствие пленок на поверхности, запах и особенности цвета воды, нали чие водной растительности, загрязнение берегов, заиленность дна и характер ила, пленки нефтепродуктов на дне и поверхности водоема.
- При окончательном обследовании водоема производят отбор и обработку проб. Пробы отбирают ниже источника загрязнения, по возможности, на всем протяжении загрязненности водоема, а также для сравнения — в чистом пункте выше сброса. Для полной биологической диагностики водоема должны быть учтены все сообщества: перифитон, бентос, планктон, плейстон, нектон, макрофиты.
- Перифитон собирают скребком, переносят в лабораторию в термосе, чтобы сохранить пробу для микроскопирования в живом виде. Впоследствии фиксируют формальдегидом, доведя его кон центрацию в пробе до 2—4%, и затем окончательно определяют виды. Учитывают сапробность и частоту встречаемости организ мов.
- Зоны сапробности выделяют по различной степени разложения органического вещества. От чистого водоема к загрязненному увеличивается индекс сапробности водоема: ксеносапробные — 0—0,05 —> олигосапробные — 0,51 —1,50 —> бета-мезосапробные — 1,51 — 2,50 —> альфа-мезосапробные — 2,51 — 3,50 —> полисапроб ные — 3,51 — 4,0.