- •2. Биофизические свойства вирусов
- •3. Использование модельных систем
- •4. Использование физико-химических методов для вивчення вірусів на молекулярному і субмолекулярному рівнях.
- •5.Методи дезинтеграции зараженных вирусом клеток.
- •6.Низкоскоростное центрифугирование как первуй этап очистки вірусів. Екстракція фітовірусів органічними розчинниками.
- •7.Осаждение вирусов в изоэлектрической точке.
- •10. Зональное ( скоростоное) ценрифугування в градієнті щільності.
- •11. Изопикическое центрифугування. Визначення плавучой щільності віріонів.
- •12. Оптические системы регістрації межі сидементації
12. Оптические системы регістрації межі сидементації
В настоящее время применяются в основном три оптические системы регистрации границ седиментации: ультрафиолетовая абсорбционная система, шлирен-система Филпота-Свенссона и интерференционная система.
Ультрафиолетовая абсорбционная система содержит монохроматор, позволяющий выбрать длину волны, оптимальную для анализа соответствующих объектов. Система позволяет исследовать вещества приочень низких концентрациях (белки – 2 мкг/мл, ДНК или РНК – 10 мкг/мл). Для измерения оптической плотности при ультрацентрифугировании обычно используют двухлучевую систему фотоэлектического сканирования, работающую по принципу раздвоенного луча и позволяющую сравнивать раствор исследуемого вещества и чистый растворитель, находящийся в разных секторах двухсекторной ячейки. Сканирование производится по всей длине ячейки через определенные промежутки времени. Результаты сканирования представляются в виде сидиментограммы, получаемой с применением самописца.
Шлирен-система позволяет регистрировать градиент коэффициента преломления n (dn/dx) по высоте ячейки с исследуемым раствором., при использовании специальной оптической системы. Величина dn/dx достигает максимума в точке наибольшего изменения концентрации раствора в ячейке. Эта точка принимается за границу седиментации. Расстояние от границы седиментации до оси вращения находят по уравнению (1), где ∆х – расстояние от вершины пика до полосы второго индексного отверстия на седиментограмме.
Интерференционная система позволяет провести измерения коэффициента преломления n на разных уровнях ячейки, т. е. получить изображение зависимости n от расстояния от оси вращения.