2. Лабораторно-практические работы.

   1. Методика определения адреналина.

а) помещают каплю раствора адреналина в пробирку, добавляют каплю 2% соляной кислоты, каплю нитритно-молибдатного реактива и перемешивают стеклянной палочкой. Наблюдают появление желто-оранжевой окраски;

б) добавляют 1 каплю 4% раствора щелочи, окраска становится малиново-красной;

в) прибавляют 2-3 капли 2% раствора соляной кислоты, окраска переходит в лимонно-желтую.

2. Методика определения инсулина (реакция Геллера).

К 10 каплям концентрированной азотной кислоты осторожно по стенке пробирки приливают равный объем (10 капель) раствора инсулина. Пробирку наклоняют под углом 45˚ так, чтобы жидкости на смешивались. На границе двух жидкостей образуется белый аморфный осадок в виде небольшого кольца.

Практическое занятие № 13. Задание к занятию № 13.

Тема: Гормоны.

Учебные и воспитательные цели:

- Общая цель: привить знания о влиянии на обмен веществ гормонов гипофиза, щитовидной железы, коры надпочечников, половых гормонов, о клинических проявлениях заболеваний, связанных с гипо-, гиперфункций данных гормонов, а также применении гормонов в качестве лечебных препаратов.

- Частные цели: уметь определять наличие кортикостерона и гидрокортизона в сыворотке крови.

1. Входной контроль знаний:

   1. Тесты.

   2. Устный опрос.

2. Основные вопросы темы.

   1. Гормоны гипофиза, химическое строение, влияние на обмен веществ.

   2. Гормоны коры надпочечников (глюкокортикоиды, минералокортикоиды), строение и влияние на обменные процессы. Гипо- и гиперфункция, клинические проявления.

   3. Гормоны щитовидной железы, строение. Влияние на обмен веществ. Клинические проявления при гипотиреозе, гипертиреозе.Эндемический зоб. Причины возникновения патологии и способы предупреждения.

   4. Гормон паращитовидной железы, химическое строение, влияние на обмен веществ.

   5. Половые гормоны, химическое строение, влияние на обмен веществ.

   6. Применение гормонов в качестве лечебных препаратов.

3. Лабораторно-практические работы.

   1. Методика обнаружения кортикостерона и гидрокортизона в сыворотке крови.

4. Выходной контроль.

   1. Тесты.

   2. Ситуационные задачи.

5. Литература:

1. Материалы лекций.

2. Николаев А.Я. Биологическая химия.-М.: Высшая школа, 1989., С 358-398.

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1990.С.174-202.

4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 2004. С. 255-288.

3. Лабораторно-практические работы.

1. Методика обнаружения кортикостерона и гидрокортизона в сыворотке крови.

Гормоны коры надпочечников можно обнаружить, используя их способность флуоресцировать в серной кислоте.

ХОД РАБОТЫ:

1. В микрохимическую пробирку вносят 10-15 капель сыворотки крови, добавляют равный объем петролейного эфира. Пробирку закрывают пробкой и встряхивают в течение 2 мин (удаление веществ, мешающих определению стероидов). Пробирку ставят в штатив и дают разделиться слоям сыворотки и эфира. Верхний слой (эфир) отсасывают и отбрасывают.

2. После удаления эфирного слоя в пробирку добавляют хлороформа до 1 мл и в течение 30 сек. встряхивают, при этом гормоны экстрагируются хлороформом. Полученный экстрат содержит как гормоны надпочечников, так и женские половые гормоны, которые необходимо удалить. Для удаления половых гормонов, к хлороформному экстрату добавляют 5-6 капель 0,4% едкого натра. Пробирку закрыть пробкой и перемешивают содержимое в течение 15 сек., после этого верхний слой (щелочь) быстро отсасывают. Удаление щелочи следует проводить быстро, т.к. кортикостероиды разрушаются в щелочной среде. К хлороформному экстрату добавляют 10-15 капель концентрированной серной кислоты, пробирку закрывают пробкой и встряхивают. Оставляют стоять 15-30 мин., затем голубую флюоресценцию выявляют при облучении пробы ультрафиолетовым светом.