5.6. Лабораторная работа

Определение уровня митотической активности клеток

Для оценки пролиферативной активности (ин­тенсивность деления клеток) ткани необходимо определить митотический индекс. Митотический индекс чаще всего определяется соотношением числа клеток, находящихся в митозе, к общему числу учтенных клеток исследуемой ткани. Кроме того, производится подсчет клеток, находящихся на разных стадиях фаз митоза, что позволяет опре­делить относительную длительность различных фаз митоза к проценту от общего количества кле­ток, вступивших в митоз. Подсчет клеток на раз­ных фазах митотического цикла проводят в не­скольких полях зрения, при этом препарат необхо­димо передвигать последовательно через одно поле в сторону и затем снизу вверх и т.д., чтобы избе­жать просмотра одного и того же поля дважды. Данные по подсчету клеток по полям зрения зано­сятся в таблицу (табл. 5.1.) по каждой стадии мито­за, а затем суммируются.

В связи с тем, что взя­тие биологического материала (биопсии) различ­ных тканей человека практически не реально, пред­лагаем провести данную лабораторную работу по исследованию пролиферативной активности на примере корневой меристемы проростков однолет­них растений (лук, пшеница, подсолнечник и т.д.) Семена растений предварительно замачива­ют в воде на 12 ч, затем проращивают на смочен­ной фильтровальной бумаге в чашках Петри в течение 24 ч. Кончики проросших корешков фик­сируют в ацетаталкогольном растворе (3 части спирта: 1 часть уксусной кислоты) от 2 до 24 ч и окрашивают ацетоорсеином. Затем готовят вре­менные давленные препараты.

Митотический (%) = (П + М + А + Т) х 100 х100

общее число клеток

Определение относительной длительности фаз ми­тоза:

П х 100 М х 100

Таблица 5.1 Определение митотического индекса в меристеме корешка

	Поле зрения			Количество клеток в стадии
		Интер­фаза		Про­фаза	Мета-фаза	Ана­фаза	Тело-фаза	Всего
	1
	2
	3
	4
	5

Глава 6 развитие зародыша человека

6.1. Гаметогенез

Материальной основой преемственности поко­лений является процесс оплодотворения, состоя­щий в слиянии гамет (яйцеклетки и сперматозои­да), приводящий к образованию зиготы, из кото­рой развивается новый организм.

Процесс формирования гамет у двуполых ор­ганизмов называется гаметогенезом. В зависимос­ти от того, какие формируются гаметы, он будет называться оогенезом (развитие женских гамет) или сперматогенезом (развитие мужских гамет). Кратко проследим эти процессы.