2009.-Byelorussian Pharmacopoeia_Volume 3

Изосорбида динитрат разведенный

291

Подвижная фаза: метанол Р — метиленхлорид Р (5:95, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл. Фронт подвижной фазы: не менее 15 см

от линии старта.

Высушивание: в потоке воздуха.

Проявление: пластинку опрыскивают све-

жеприготовленным раствором калия йодида с крахмалом Р, выдерживают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм в течение 15 мин и просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме испы-

туемого раствора обнаруживается пятно, со-

ответствующее по расположению, окраске и размеру основному пятну на хроматограмме

раствора сравнения.

С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. Навеску испытуемого образца, соответствующую 0,10 г лактозы или маннита, встряхивают с 10 мл воды Р

и при необходимости фильтруют.

Раствор сравнения (а). 0,10 г лактозы

Ррастворяют в воде Р и доводят до объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 0,10 г маннита

Ррастворяют в воде Р и доводят до объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (c). Смешивают равные объемы растворов сравнения (а) и (b).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G P.

Подвижная фаза: вода Р — метанол Р — кислота уксусная безводная Р — этиленхлорид Р (10:15:25:50, об/об/об/об). Объемы ком-

понентов подвижной фазы отмеривают точно, так как небольшой избыток воды приводит к

помутнению.

Наносимый объем пробы: 1 мкл (место

нанесения пробы тщательно высушивают).

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см

от линии старта. После высушивания повторяют хроматографирование с новой порцией

подвижной фазы.

Высушивание: в потоке теплого воздуха.

Проявление: пластинку опрыскивают

раствором кислоты 4-аминобензойной Р и

сушат в потоке холодного воздуха до исчезно-

вения запаха ацетона. Пластинку выдерживают при температуре 100°С в течение 15 мин,

охлаждают, опрыскивают раствором 2 г/л

натрия перйодата Р, сушат в потоке холодного воздуха и выдерживают при температуре

100°С в течение 15 мин.

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (с):

– на хроматограмме обнаруживаются два

полностью разделенных пятна.

Результаты: на хроматограмме испыту-

емого раствора обнаруживается пятно, соответствующее по расположению, цвету и раз-

меру основному пятну на хроматограмме

раствора сравнения (а), если разбавителем является лактоза, или пятну на хроматограмме раствора сравнения (b), если разбавите-

лем является маннит.

D. Навеску испытуемого образца, соответствующую 25 мг изосорбида динитрата, встряхивают с 10 мл ацетона Р в течение 5

Пропускание

95

90

85

80

75

70

65

60

55

50

45

40

35

30

25

20

15

10

3000	2000	1500	1000
	Волновое	число (см-1)

Рисунок 1. Инфракрасный спектр пропускания ФСО изосорбида динитрата.

292	Государственная фармакопея Республики Беларусь

мин, фильтруют и упаривают досуха при тем-

пературе не выше 40°С. Полученный остаток

сушат над фосфора (V) оксидом Р при дав-

лении, не превышающем 0,7 кПа, в течение 16 ч. Температура плавления (2.2.14) остатка: от 69°С до 72°С.

ИСПЫТАНИЯ

Неорганические нитраты. Не более 0,5% в пересчете на калия нитрат. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. Навеску испытуемо-

го образца, соответствующую 0,10 г изосорбида

динитрата, встряхивают с 5 мл 96% спирта Р и фильтруют.

Раствор сравнения. 10 мг калия нитрата Р

растворяют в 1 мл воды Р и доводят 96% спиртом Р до объема 100 мл.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Н P.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — ацетон Р — толуол Р (15:30:60, об/об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от линии старта.

Высушивание: в потоке воздуха до полного

исчезновения запаха кислоты уксусной. Проявление: пластинку обильно опрыски-

вают свежеприготовленным раствором калия йодида с крахмалом Р, выдерживают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм в течение 15 мин и просматривают при дневном

свете.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора пятно, соответствующее нитратиону, должно быть не интенсивнее пятна на хро-

матограмме раствора сравнения.

Изосорбид-5-инитрат и изосорбид- 2-нитрат. Жидкостная хроматография (2.2.29), как указано в разделе «Количественное определение», но при длине волны детектора 210-

215нм.

Объем вводимой пробы: по 10 мкл испытуе-

мого раствора (а), раствора сравнения (e), (с) и (d).

Времена удерживания: изосорбида динитрат — около 5 мин, изосорбид-2-нитрат — около 8 мин и изосорбид-5-нитрат — около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (е):

–разрешение: не менее 6,0 между пиками изосорбида динитрата и изосорбид-2-нитрата.

Предельное содержание примесей:

–изосорбид-2-нитрат (не более 0,5 %):

на хроматограмме испытуемого раствора (а)

площадь пика, соответствующего изосорбид- 2-нитрату, не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (с);

–изосорбид-5-нитрат (не более 0,5 %):

на хроматограмме испытуемого раствора (а)

площадь пика, соответствующего изосорбид-

5-нитрату, не должна превышать площадь

основного пика на хроматограмме раствора

сравнения (d).

#Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец должен выдерживать требования статьи (5.4).

#Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Изосорбида динитрат разведен-

ный в условиях испытания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (2.2.29).

Испытуемый раствор (а). К навеске испытуемого образца, соответствующей 25,0 мг изо-

сорбида динитрата, прибавляют 20 мл подвиж-

ной фазы, обрабатывают ультразвуком в те-

чение 15 мин и доводят подвижной фазой до объема 25,0 мл. Полученный раствор фильтруют через подходящий мембранный фильтр.

Испытуемый раствор (b). 1,0 мл испыту-

емого раствора (а) доводят подвижной фазой

до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (а). К навеске ФСО изосорбида динитрата, соответствующей 25,0 мг изосорбида динитрата, прибавляют

20 мл подвижной фазы, обрабатывают ультра-

звуком в течение 15 мин и доводят подвижной фазой до объема 25,0 мл. Полученный раствор фильтруют через подходящий мембранный фильтр.

Раствор сравнения (b). 1,0 мл раствора сравнения (а) доводят подвижной фазой до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (с). 10,0 мг ФСО изосорбид-2-нитрата растворяют в подвижной фазе и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем. 0,1 мл полученного раствора доводят подвижной фазой до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (d). 10,0 мг ФСО изосорбида мононитрата растворяют в подвижной фазе и доводят до объема 10,0 мл этим же растворителем. 0,1 мл полученного раствора доводят подвижной фазой до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (е). 5 мг ФСО изосорбид-2-нитрата растворяют в подвижной фазе и доводят до объема 10 мл этим же растворителем. К 1 мл полученного раствора прибавляют 0,5 мл раствора сравнения (а) и доводят подвижной фазой до объема 10 мл.

Условия хроматографирования:

–колонка длиной 0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем аминопропилметилсилильным для хроматографии Р с размером частиц 10 мкм;

–подвижная фаза: этанол Р — триметилпентан Р (15:85, об/об);

–скорость подвижной фазы: 1 мл/мин;

–спектрофотометрический детектор, длина волны 230 нм;

Изосорбида мононитрат разведенный

293

–объем вводимой пробы: по 20 мкл раст-

вора сравнения (b) и испытуемого раствора (b).

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (b):

–относительное стандартное отклонение: не более 2,0% для площадей пиков при шести повторных вводах пробы.Содержание изосорби-

да динитрата рассчитывают в процентах от заяв-

ленного содержания.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

МАРКИРОВКА

Указывают содержание изосорбида дини-

трата в процентах.

ПРИМЕСИ

А. Неорганические нитраты.

H H O

NO2

O

O

HO H H

В. Изосорбид-2-нитрат.

С. Изосорбида мононитрат (изосорбид-5- нитрат).

ИЗОСОРБИДА МОНОНИТРАТ РАЗВЕДЕННЫЙ

Isosorbidi mononitras dilutus

ISOSORBIDE MONONITRATE, DILUTED

H H OH

O

O2N O		O
	H
	H
C6H9NO6		М.м. 191,1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Изосорбида мононитрат разведенный представляет собой сухую смесь изосорбида мононитрата и Лактозы моногидрата или Маннита. Содержит не менее 95,0 % (м/м) и не более 105,0 % (м/м) 1,4:3,6-диангидро-D-глюцитол-5- нитрата от заявленного содержания.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Неразведенный изосорбида мононитрат —

кристаллический порошок белого цвета. Легкорастворим в воде, в ацетоне, в 96%

спирте и в метиленхлориде.

Растворимость изосорбида мононитрата разведенного зависит от разбавителя и его концентрации.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, С, D. Вторая идентификация: В, С, D.

А. Абсорбционная спектрофотометрия в инфракрасной области (2.2.24).

Приготовление: используют остаток, по-

лученный в идентификации D.

Сравнение: ФСО изосорбида мононитрата # или спектр, представленный на рисунке 1.

В. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. Навеску испытуе-

мого образца, соответствующую 10 мг изосорбида мононитрата, встряхивают с 10 мл 96 % спирта Р в течение 5 мин и фильтруют.

Раствор сравнения. Навеску ФСО изосорбида мононитрата, соответствующую

10 мг изосорбида мононитрата, встряхивают

с10 мл 96 % спирта Р в течение 15 мин и

фильтруют.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G P.

Подвижная фаза: метанол Р — метиленхлорид Р (5:95, об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл. Фронт подвижной фазы: не менее 15 см

от линии старта.

Высушивание: в потоке воздуха. Проявление: пластинку опрыскивают све-

жеприготовленным раствором калия йодида

скрахмалом Р, выдерживают в ультрафио-

летовом свете при длине волны 254 нм в течение 15 мин и просматривают при дневном

свете.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается пятно, соот-

ветствующее по расположению, цвету и раз-

меру основному пятну на хроматограмме раствора сравнения.

С.Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. Навеску испытуемого образца, соответствующую 0,10 г лакто-

зы или маннита, встряхивают с 10 мл воды Р и при необходимости фильтруют.

Раствор сравнения (а). 0,10 г лактозы

Ррастворяют в воде Р и доводят до объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 0,10 г маннита

Ррастворяют в воде Р и доводят до объема

10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (c). Смешивают равные объемы растворов сравнения (а) и (b).

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля G P.

Подвижная фаза: вода Р — метанол Р — кислота уксусная безводная Р — этиленхлорид Р (10:15:25:50, об/об/об/об). Объемы компонентов подвижной фазы отмеривают точно, так как небольшой избыток воды приводит к помутнению.

Наносимый объем пробы: 1 мкл (место нанесения пробы тщательно высушивают).

294	Государственная фармакопея Республики Беларусь

Пропускание

100

95

90

85

80

75

70

65

60

55

50

45

40

35

30

3000

2000

1500

1000

500

Волновое число (см-1)

Рисунок 1. Инфракрасный спектр пропускания ФСО изосорбида мононитрата в дисках с калия бромидом Р.

Фронт подвижной фазы: не менее 15 см

от линии старта. После высушивания повторяют хроматографирование с новой порцией

подвижной фазы.

Высушивание: в потоке теплого воздуха. Проявление: пластинку опрыскивают рас-

твором кислоты 4-аминобензойной Р и сушат

в потоке холодного воздуха до исчезновения

запаха ацетона. Пластинку выдерживают при температуре 100°С в течение 15 мин, охлаждают, опрыскивают раствором 2 г/л натрия перйодата Р, сушат в потоке холодного воздуха и выдерживают при температуре 100°С в течение 15 мин.

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (с):

– на хроматограмме обнаруживаются два полностью разделенных пятна.

Результаты: на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживается пятно, соответствующее по расположению, окраске и размеру основному пятну на хроматограмме раствора сравнения (а), если разбавителем является лактоза, или пятну на хроматограмме раствора сравнения (b), если разбавителем является маннит.

D. Навеску испытуемого образца, соответствующую 25 мг изосорбида мононитрата, встряхивают с 10 мл ацетона Р в течение 5 мин, фильтруют и упаривают досуха при температуре не выше 40°С. Полученный остаток сушат над фосфора (V) оксидом Р при дав-

лении, не превышающем 0,7 кПа, в течение 16 ч. Температура плавления (2.2.14) остатка: от 89°С до 91°С.

ИСПЫТАНИЯ

Неорганические нитраты. Не более 0,5 % в пересчете на калия нитрат. Тонкослойная хроматография (2.2.27).

Испытуемый раствор. Навеску испытуемого образца, соответствующую 0,10 г изосорбида мононитрата, встряхивают с 5 мл 96 % спирта Р и фильтруют.

Раствор сравнения. 10 мг калия нитрата Р растворяют в 1 мл воды Р и доводят 96 % спиртом Р до объема 100 мл.

Пластинка: ТСХ пластинка со слоем силикагеля Н P.

Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — ацетон Р — толуол Р (15:30:60, об/об/об).

Наносимый объем пробы: 10 мкл. Фронт подвижной фазы: не менее 15 см

от линии старта.

Высушивание: в потоке воздуха до полно-

го исчезновения запаха кислоты уксусной.

Проявление: пластинку обильно опрыскивают свежеприготовленным раствором калия йодида с крахмалом Р, выдерживают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм в течение 15 мин и просматривают при дневном свете.

Результаты: на хроматограмме испы-

туемого раствора пятно, соответствующее

Изосорбида мононитрат разведенный

295

нитрат-иону, должно быть не интенсивнее

пятна на хроматограмме раствора сравнения.

Изосорбида динитрат и изосорбид-2- нитрат. Жидкостная хроматография (2.2.29), как указано в разделе «Количественное опре-

деление», но при длине волны детектора

210—215 нм.

Объем вводимой пробы: по 10 мкл испы-

туемого раствора (а), раствора сравнения (d),

(b) и (с).

Времена удерживания: изосорбида дини-

трат — около 5 мин, изосорбид-2-нитрат — около 8 мин и изосорбид-5-нитрат — около

11 мин.

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (d):

–разрешение: не менее 4,0 между пиками

изосорбид-2-нитрата и изосорбид-5-нитрата.

Предельное содержание примесей:

–изосорбид-2-нитрат (не более 0,5 %):

на хроматограмме испытуемого раствора (а)

площадь пика, соответствующего изосорбид- 2-нитрату, не должна превышать площадь

основного пика на хроматограмме раствора

сравнения (b);

–изосорбида динитрат (не более 0,5 %): на хроматограмме испытуемого раствора (а) площадь пика, соответствующего изосорби-

да динитрату, не должна превышать площадь

основного пика на хроматограмме раствора сравнения (с).

# Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец

должен выдерживать требования статьи (5.4).

# Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Изосорбида мононитрат разведенный в условиях испытания не обладает

антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (2.2.29).

Испытуемый раствор (а). К навеске ис-

пытуемого образца, соответствующей 25,0 мг

изосорбида мононитрата прибавляют 20 мл подвижной фазы, обрабатывают ультразву-

ком в течение 15 мин и доводят подвижной

фазой до объема 25,0 мл. Полученный раст-

вор фильтруют через подходящий мембран-

ный фильтр.

Испытуемый раствор (b). 1,0 мл испыту-

емого раствора (а) доводят подвижной фазой

до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (а). К навеске ФСО изосорбида мононитрата, соответствующей

25,0 мг изосорбида мононитрата прибавляют

20 мл подвижной фазы, обрабатывают уль-

тразвуком в течение 15 мин и доводят подвижной фазой до объема 25,0 мл. Полученный раствор фильтруют через подходящий мембранный фильтр.

Раствор сравнения (b). 10,0 мг ФСО изосорбид-2-нитрата растворяют в подвиж-

ной фазе и доводят до объема 10,0 мл этим же

растворителем. 0,1 мл полученного раствора доводят подвижной фазой до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (c). К навеске ФСО изосорбида динитрата, соответствующей 10,0 мг изосорбида мононитрата, прибавляют 15 мл подвижной фазы, обрабатывают ультра-

звуком в течение 15 мин и доводят подвижной

фазой до объема 20,0 мл. Полученный раствор фильтруют через подходящий мембранный фильтр. 0,1 мл полученного раствора до-

водят подвижной фазой до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (d). 5 мг ФСО изосорбида мононитрата и 5 мг ФСО изосорбид- 2-нитрата растворяют в подвижной фазе и

доводят до объема 10 мл этим же раствори-

телем. 1 мл полученного раствора доводят

подвижной фазой до объема 10 мл. Условия хроматографирования:

–колонка длиной 0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем аминопропилметилсилильным для хроматографии Р с размером частиц 10 мкм;

–подвижная фаза: этанол Р — триметилпентан Р (15:85, об/об);

–скорость подвижной фазы: 1 мл/мин;

–спектрофотометрический детектор,

длина волны 230 нм;

–объем вводимой пробы: по 20 мкл раствора сравнения (а) и испытуемого раствора (b).

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (а):

–относительное стандартное отклонение:

не более 2,0% для площадей пиков при шести повторных вводах пробы.

Содержание изосорбида мононитрата

рассчитывают в процентах от заявленного со-

держания.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

МАРКИРОВКА

Указывают содержание изосорбида мононитрата в процентах.

ПРИМЕСИ

А. Неорганические нитраты.

H H O

NO2

O

O

O2N O H H

В. Изосорбида динитрат.

H H O

NO2

O

O

HO H H

С. Изосорбид-2-нитрат.

296	Государственная фармакопея Республики Беларусь
ИНДАПАМИД	Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от
Indapamidum	линии старта.
	Высушивание: на воздухе.
INDAPAMIDE	Проявление: пластинку просматривают

							CH3		в ультрафиолетовом свете при длине волны
									254 нм.
O	O			O			H		Пригодность хроматографической систе-
									мы: раствор сравнения (b):
								и энантиомер
S							N
									– на хроматограмме обнаруживаются два
H2N							N		полностью разделенных пятна.
							H
Cl									Результаты: на хроматограмме испытуе-
									мого раствора обнаруживается пятно, соответ-
C16H16ClN3O3S								М.м. 365,8	ствующее по расположению и размеру основ-
ОПРЕДЕЛЕНИЕ									ному пятну на хроматограмме раствора сравне-
									ния (а).
Индапамид содержит не менее 98,0% и									ИСПЫТАНИЯ
не более			102,0%				4-хлор-N-[(2RS)-2-метил-
2,3-дигидро-1Н-индол-1-ил]-3-сульфамоил-									Угол оптического	вращения	(2.2.7). От
бензамида в пересчете на безводное вещество.									-0,02° до +0,02°. 0,250 г испытуемого образца
ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)									растворяют в этаноле Р и доводят до объема
									25,0 мл этим же растворителем.
Белый или почти белый порошок.									Сопутствующие	примеси.	Жидкостная
Практически нерастворим в воде, раство-									хроматография (2.2.29) как указано в разделе
рим в 96% спирте.									«Количественное определение».
									Чувствительность	системы	регулируют
ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)									таким образом, чтобы высота основного пика на
Первая идентификация: В.									хроматограмме раствора сравнения (b) состав-
									ляла не менее 15% шкалы регистрирующего
Вторая идентификация: A, С.
									устройства.
А.
	Абсорбционная спектрофотометрия в								Объем вводимой пробы: по 10 мкл каждого
ультрафиолетовой и видимой областях (2.2.25).									раствора.
Испытуемый раствор. 50,0 мг испытуемо-									Время хроматографирования: 2,5-кратное
го образца растворяют в 96% спирте Р и дово-									время удерживания основного пика.
дят до объема 100,0 мл этим же растворителем.									Пригодность хроматографической сис-
2,0 мл полученного раствора доводят 96% спир-									темы:
том Р до объема 100,0 мл.									– разрешение: не менее 4,0 между пиками
Диапазон длин волн: от 220 нм до 350 нм.									индапамида и метилнитрозоиндолина на хрома-
Максимум поглощения: при 242 нм.									тограмме раствора сравнения (d);
Плечи: при 279 нм и при 287 нм.									– отношение сигнал/шум: не менее 6 для
Удельный показатель поглощения в макси-									основного пика на хроматограмме раствора
муме: от 590 до 630.									сравнения (b).
В. Абсорбционная спектрофотометрия в ин-									Предельное содержание примесей:
фракрасной области (2.2.24).									– примесь В (не более 0,3%): на хромато-
Приготовление: в дисках.									грамме испытуемого раствора площадь пика
Сравнение: ФСО индапамида # или спектр,									примеси В не должна превышать площадь
представленный на рисунке 1.									основного пика на хроматограмме раствора
С. Тонкослойная хроматография (2.2.27).									сравнения (а);
Испытуемый раствор. 20 мг испытуе-									– любая другая примесь (не более 0,1 %):
мого образца растворяют в 96 % спирте Р									на хроматограмме испытуемого раствора пло-
и доводят до объема 10 мл этим же раство-									щадь любого пика, кроме основного и пика
рителем.									примеси В, не должна превышать площадь
Раствор сравнения (а). 20 мг ФСО индапа-									основного пика на хроматограмме раствора
мида растворяют в 96% спирте Р и доводят до									сравнения (b);
объема 10 мл этим же растворителем.									– сумма примесей (не более 0,5 %): на хро-
Раствор сравнения (b). 10 мг ФСО индоме-									матограмме испытуемого раствора сумма пло-
тацина растворяют в 5 мл раствора сравнения									щадей всех пиков, кроме основного, не должна
(а) и доводят 96% спиртом Р до объема 10 мл.									превышать 5-кратную площадь основного пика
Пластинка: ТСХ пластинка со слоем сили-									на хроматограмме раствора сравнения (b).
кагеля GF254 Р.									На хроматограмме испытуемого раствора
Подвижная фаза: кислота уксусная ледяная									не учитывают пики с площадью менее 0,5 пло-
Р — ацетон Р — толуол Р (1:20:79, об/об/об).									щади основного пика на хроматограмме раст-
Наносимый объем пробы: 10 мкл.									вора сравнения (b) (0,05 %).

Индапамид

297

Пропускание

100

95

90

85

80

75

70

65

60

55

50

45

40

35

3000	2000	1500	1000
	Волновое	число (см-1)

Рисунок 1. Инфракрасный спектр пропускания ФСО индапамида в дисках с калия бромидом Р.

Метилнитрозоиндолин. Не более 0,0005% (5 ppm). Жидкостная хроматография (2.2.29).

Испытание проводят с защитой от света. Испытуемый раствор. 25,0 мг испытуемо-

го образца растворяют в 1 мл ацетонитрила

Ри доводят водой Р до объема 10,0 мл. Перемешивают в течение 15 мин, выдерживают при температуре 4°С в течение 1 ч и фильтруют.

Раствор сравнения. 25,0 мг испытуемого

образца растворяют в 1,0 мл раствора 0,125 мг/л

ФСО метилнитрозоиндолина в ацетонитриле

Ри доводят водой Р до объема 10,0 мл. Перемешивают в течение 15 мин, выдерживают при температуре 4°С в течение 1 ч и фильтруют.

Условия хроматографирования:

–колонка длиной 0,15 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии Р с раз-

мером частиц 5 мкм;

–температура: 30°С;

–подвижная фаза: смесь из 7 объемов

ацетонитрила Р, 20 объемов тетрагидрофурана Р и 72 объемов раствора 1,5 г/л триэтиламина Р, доведенного кислотой фосфорной

Рдо рН 2,8;

–скорость подвижной фазы: 1,4 мл/мин;

–спектрофотометрический детектор, длина волны 305 нм;

–объем вводимой пробы: 0,1 мл. Пригодность хроматографической систе-

мы: раствор сравнения:

– коэффициент разделения пиков: не менее #6,67 (Hp — высота пика метилнитрозоиндолина относительно базовой линии; Hv — рас-

стояние между базовой линией и нижней точкой кривой, разделяющей пик метилнитрозоиндолина и основной пик);

– отношение сигнал/шум: не менее 3 для пика метилнитрозоиндолина, выходящего перед

основным пиком.

На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика метилнитрозоиндолина

не должна превышать разницу между площа-

дями пиков метилнитрозоиндолина на хроматограммах раствора сравнения и испытуемого раствора.

Тяжелые металлы (2.4.8, метод С). Не более 0,001% (10 ppm). 2,0 г испытуемого об-

разца выдерживают испытание на тяжелые металлы. Эталон готовят с использованием 2 мл

эталонного раствора свинца (10 ppm Pb) Р.

Вода (2.5.12). Не более 3,0%. Определение проводят из 0,10 г испытуемого образца.

Сульфатная зола (2.4.14, метод А). Не

более 0,1%. Определение проводят из 1,0 г ис-

пытуемого образца.

#Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец должен выдерживать требования статьи (5.4).

#Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Индапамид в условиях испытания

не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (2.2.29). Испытание проводят с защитой от попадания света. Растворы хранят при 4°С или используют свежеприготовленные растворы.

298	Государственная фармакопея Республики Беларусь

Испытуемый раствор. 20,0 мг испытуемо-

го образца растворяют в 7 мл смеси из равных

объемов ацетонитрила Р и метанола Р и до-

водят раствором 0,2 г/л натрия эдетата Р до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (a). 3,0 мг ФСО индапамида примеси В растворяют в 3,5 мл смеси из

равных объемов ацетонитрила Р и метанола Р

и доводят раствором 0,2 г/л натрия эдетата Р до объема 10,0 мл. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 35 мл смеси из равных объемов ацетонитрила Р и метанола Р и доводят раствором

0,2 г/л натрия эдетата Р до объема 100,0 мл.

Раствор сравнения (b). 1,0 мл испытуемого раствора доводят смесью ацетонитрил Р — метанол Р — раствор 0,2 г/л натрия эдетата Р (17,5:17,5:65, об/об/об) до объема 50,0 мл.

1,0 мл полученного раствора доводят смесью

ацетонитрил Р — метанол Р — раствор 0,2 г/л натрия эдетата Р (17,5:17,5:65, об/об/об) до

объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (с). 20,0 мг ФСО индапамида растворяют в 7 мл смеси из равных объемов ацетонитрила Р и метанола Р и доводят раствором 0,2 г/л натрия эдетата Р до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (d). 25,0 мг ФСО индапамида и 45,0 мг ФСО метилнитрозоиндолина растворяют 17,5 мл смеси из равных объемов ацетонитрила Р и метанола Р и доводят раствором 0,2 г/л натрия эдетата Р до объема

50,0 мл.

Условия хроматографирования:

–колонка длиной 0,20 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии Р с раз-

мером частиц 5 мкм;

–температура: 40°С;

–подвижная фаза: кислота уксусная ледяная Р — ацетонитрил Р — метанол Р — раствор 0,2 г/л натрия эдетата Р (0,1:17,5:17,5:65,

об/об/об/об);

–скорость подвижной фазы: 2 мл/мин;

–спектрофотометрический детектор, длина волны 254 нм;

–объем вводимой пробы: 10 мкл раствора

сравнения (с) и испытуемого раствора.

Время удерживания: основной пик на хроматограмме раствора сравнения (с) — около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы: раствор сравнения (с):

–относительное стандартное отклонение: не более 1,0% для площади пика индапамида. При необходимости изменяют параметры интегрирования.

Содержание C16H16ClN3O3S рассчитывают в процентах (м/м) в пересчете на безводное вещество.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

CH3

H

и энантиомер

N

ON

A. (2RS)-2-Метил-1-нитрозо-2,3-дигидро-1H-

индол.

H3C

O O O

SN

H2N	N
	H
	Cl

B. 4-Хлор-N-(2-метил-1H-индол-1-ил]-3-сульфа-

моилбензамид.

ИНДОМЕТАЦИН

Indometacinum

INDOMETACIN

H3C

O CO2H

N

	OCH3
Cl
С19Н16ClNO4	М.м. 357,8

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Индометацин содержит не менее 98,5% и

не более 100,5% [1-(4-хлорбензоил)-5-метокси- 2-метилиндол-3-ил]уксусной кислоты в пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Кристаллический порошок от белого до желтого цвета.

Практически нерастворим в воде, умеренно

растворим в 96% спирте.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, С. Вторая идентификация: А, В, D, E.

А. Температура плавления (2.2.14): от 158°С до 162°С.

В. Абсорбционная спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях

(2.2.25). 25 мг испытуемого образца растворяют в смеси 1 М раствор кислоты хлористоводородной — метанол Р (1:9, об/об) и доводят до объема 100,0 мл этим же растворителем. 10,0 мл полученного раствора доводят смесью 1 М раствор кислоты хлори-

Индометацин

299

Пропускание

94

92

90

88

86

84

82

80

78

76

74

72

70

68

66

	3000	2000	1500	1000
		Волновое	число (см-1)
	Рисунок 1. Инфракрасный спектр пропускания ФСО индометацина.
стоводородной — метанол Р (1:9, об/об) до			ИСПЫТАНИЯ
объема 100,0 мл. Спектр поглощения получен-			Сопутствующие	примеси.	Тонкослойная
ного раствора в области длин волн от 300 нм			хроматография (2.2.27).
до 350 нм имеет максимум при 318 нм. Удель-			Испытуемый раствор. 0,2 г испытуемого
ный показатель поглощения в максимуме: от			образца растворяют в метаноле Р и доводят
170 до 190.			до объема 10 мл этим же растворителем. Раст-
С. Инфракрасный спектр		пропускания	вор готовят непосредственно перед использо-
(2.2.24) испытуемого образца соответствует			ванием.
спектру ФСО индометацина # или спектру, пред-			Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раст-
ставленному на рисунке 1. Исследуют вещества			вора доводят метанолом Р до объема 200 мл.
в твердом состоянии без перекристаллизации.			Пластинка: ТСХ пластинка со слоем си-
D. 0,1	г испытуемого образца раство-		ликагеля HF254 Р. Готовят смесь с раствором
ряют в 10 мл 96 % спирта Р, при необходи-			46,8 г/л натрия дигидрофосфата Р.
мости слегка подогревают. К 0,1 мл получен-			Подвижная фаза: петролейный эфир Р —
ного раствора прибавляют 2 мл свежеприго-			эфир Р (30:70, об/об).
товленной смеси из 1 объема раствора 250 г/л			Наносимый объем пробы: 10 мкл.
гидроксиламина гидрохлорида Р и 3 объемов			Фронт подвижной фазы: не менее 15 см от
раствора	натрия гидроксида	разведенного	линии старта.
Р. Прибавляют 2 мл кислоты хлористоводо-			Высушивание: на воздухе.
родной разведенной Р, 1 мл раствора железа			Проявление: пластинку		просматривают
хлорида Р2 и перемешивают. Появляется			в ультрафиолетовом свете при длине волны
фиолетово-розовое окрашивание.			254 нм.
Е. К 0,5 мл спиртового раствора, приго-			Результаты: на хроматограмме испытуе-
товленного в идентификации D, прибавляют			мого раствора любое пятно, кроме основного,
0,5 мл раствора диметиламинобензальдеги-			не должно быть интенсивнее пятна на хромато-
да Р2. Образуется осадок, который растворя-			грамме раствора сравнения (0,5%).
ется при встряхивании. Нагревают на водяной			Тяжелые металлы (2.4.8, метод С). Не
бане. Появляется голубовато-зеленое окраши-			более 0,002% (20 ppm). 2,0 г испытуемого образ-
вание. Продолжают нагревать в течение 5 мин			ца должны выдерживать испытание на тяжелые
и охлаждают в ледяной воде в течение 2 мин.			металлы. Эталон готовят с использованием 4 мл
Образуется осадок и окраска изменяется на			эталонного раствора свинца (10 ppm Pb) Р.
светло-серо-зеленую. Прибавляют 3 мл 96 %			Потеря в массе при высушивании (2.2.32).
спирта Р. Раствор становится прозрачным и			Не более 0,5%. 1,000 г испытуемого образца
появляется фиолетово-красное окрашивание.			сушат при температуре от 100°С до 105°С.

300	Государственная фармакопея Республики Беларусь

Сульфатная зола (2.4.14, метод А). Не

более 0,1%. Определение проводят из 1,0 г ис-

пытуемого образца.

#Остаточные количества органических растворителей (2.4.24). Испытуемый образец должен выдерживать требования статьи (5.4).

#Микробиологическая чистота (2.6.12, 2.6.13, 5.1.4). Индометацин в условиях испытания обладает антимикробным действием. Посев

на питательные среды № 1 и № 8 проводят ме-

тодом мембранной фильтрации, на питательные

среды № 2 и № 11 — из разведения 1:10.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,300 г испытуемого образца растворяют в

75 мл ацетона Р, через который предварительно

пропускают азот Р, свободный от углерода диоксида, в течение 15 мин. Поддерживают постоян-

ный поток азота через полученный раствор. При-

бавляют 0,1 мл раствора фенолфталеина Р и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида.

Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида со-

ответствует 35,78 мг С19Н16ClNO4.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

CO2H

Cl

А. 4-Хлорбензойная кислота.

ИНСУЛИН СВИНОЙ

Insulinum porcinum

INSULIN, PORCINE

H-Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Thr-Ser-Ile-Cys-Ser-

10

Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-Asn-OH

20

H-Phe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-

10

Glu-Ala-Leu-Tyr-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly-Phe-

20

Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-Ala-OH

	30
C256H381N65O76S6	М.м. 5778

ОПРЕДЕЛЕНИЕ.

Инсулин свиной — натуральный антиди-

абетический продукт, полученный из свиной поджелудочной железы и подвергнутый очистке. Суммарное содержание инсулина свиного

(C256H381N65O76S6) и А21-дезамидоинсулина свиного составляет не менее 95,0% и не более

105,0% в пересчете на сухое вещество.

В целях маркировки лекарственных средств,

содержащих инсулин, принято, что 0,0345 мг ин-

сулина свиного эквивалентны 1 МЕ инсулина.

ПРОИЗВОДСТВО

Животные, используемые для получения

инсулина свиного, должны выдерживать требо-

вания, предъявляемые к здоровью животных,

используемых человеком в пищу.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый порошок.

Практически нерастворим в воде и в этаноле. Растворяется в разведенных минеральных кислотах и, с разрушением структуры, в разве-

денных растворах гидроксидов щелочных ме-

таллов.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. Просматривают хроматограммы, полученные в разделе «Количественное определе-

ние». Основной пик на хроматограмме испыту-

емого раствора по времени удерживания соот-

ветствует основному пику на хроматограмме раствора сравнения (b).

В. Пептидное картирование (2.2.55).

СЕЛЕКТИВНОЕ РАСЩЕПЛЕНИЕ ПЕПТИДНЫХ СВЯЗЕЙ

Испытуемый раствор. Готовят раствор 2,0 мг/мл испытуемого образца в 0,01 М растворе кислоты хлористоводородной. 500 мкл полученного раствора помещают в чистую про-

бирку, прибавляют 2,0 мл буферного (HEPES) раствора рН 7,5 Р и 400 мкл раствора 1 мг/мл

протеазы Stafi lococus aureus штамм V8 Р. Закрывают пробирку и инкубируют при температуре 25°С в течение 6 ч. Останавливают реакцию прибавлением 2,9 мл сульфатного буферного раствора рН 2,0 Р.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом и в то же самое время, как и испытуемый раствор, используя ФСО инсулина свиного вместо испытуемого образца.

ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ. Жидкостная хроматография (2.2.29).

Условия хроматографирования:

–колонка длиной 0,10 м и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии Р

сразмером частиц 3 мкм;

–температура: 40°С;

–подвижная фаза:

–подвижная фаза А: смешивают 100 мл

ацетонитрила для хроматографии Р, 700 мл воды Р и 200 мл сульфатного буферного раствора рН 2,0 Р, фильтруют и дегазируют;

–подвижная фаза В: смешивают 400 мл

ацетонитрила для хроматографии Р, 400 мл воды Р и 200 мл сульфатного бу-