(???) Контрольные вопросы по теме

1. Нормальная микрофлора воздуха внешней среды: резидентная, транзиторная.

2. Характеристика микрофлоры воздуха закрытых помещений, источники ее формирования

3. Воздух — путь передачи возбудителей воздушно-капельных инфекций.

4. Источники транзиторной микрофлоры воздуха помещений, в том числе воздуха производственных помещений аптек.

5. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха закрытых помещений — нормативы и их обоснование.

6. Определение степени микробной обсемененности воздуха закрытых помещений, производственных помещений аптек — общее микробное число (ОМЧ).

7. Нормативы ОМЧ для воздуха особо чистых помещений (асептические блоки, помещения фармацевтической промышленности для приготовления стерильных препаратов и др.).

8. Методы определения ОМЧ воздуха — седиментационный, аспирационный. Техника проведения, аппаратура. Достоинства и недостатки каждого метода.

9. Принципы санации воздушной среды асептического блока и других помещений аптек: химические, физические, механические.

10. Ультрафиолетовое облучение воздуха: аппаратура, механизм действия, режим облучения.

11. Мероприятия, проводимые для предупреждения попадания микроорганизмов от человека в воздух производственных помещений аптек: ассистентская, асептический блок и др.

12. Последствия возможной контаминации лекарственных форм микроорганизмами: сапрофитами, условно-патогенными, патогенными.

13. Методы выявления в воздухе производственных помещений аптек представителей энтеробактерий, синегнойной палочки, стафилококков и грибов — плесневых, дрожжеподобных.

(!!!) Задания для практической работы

1. Проведение посевов воздуха помещений кафедры микробиологии методом Коха (седиментационный метод) и с использованием аппарата Кротова (аспирационный метод).

2. Определение ОМЧ воздуха и наличие патогенной микрофлоры в помещениях аптек по ситуационным картам-заданиям:

а) торговый зал;

б) ассистентская;

в) асептическая комната;

г) дистилляционная;

д) стерилизационная;

е) моечная.

Определение ОМЧ, наличие и количество патогенной микрофлоры, сравнение с нормативами, анализ полученных результатов. Составление заключения и рекомендаций.

3. Работа с Приказом № 309 по санитарному режиму аптек. Разбор всех положений, касающихся воздуха аптечных помещений.

4. Оформление и защита протоколов по теме занятия.

Воздух не является подходящей средой для длительного пребывания микроорганизмов, особенно патогенных. Отсутствие влаги, питательных веществ, действие ультрафиолетовых лучей и т. д. ведут к гибели большинства микробов.

Нормальная микрофлора воздуха складывается из резидентной и транзиторной. Резидентная микрофлора — сапрофитные бактерии с липохромным пигментом (сарцины, микрококки, сапрофитный стафилококк и др.); бациллы (сенная палочка, микоидные бациллы и др.); плесневые и дрожжевые, дрожжеподобные грибы. Все эти микроорганизмы имеют структуры или механизмы, защищающие их от губительного действия ультрафиолетовых лучей,^: отсутствия влаги, питательных веществ.

Транзиторная микрофлора — патогенные и условно-патогенные бактерии, вирусы. Они являются возбудителями воздушно-капельной инфекции, раневой инфекции, гнойно-воспалительных заболеваний и др. К ним относятся золотистый и эпидермальный стафилококк, дифтерийная, туберкулезная, синегнойная палочки, энтеробактерий (клебсиелла, протей, серрация и др.); вирусы кори, гриппа и др..

В неочищенном воздухе во взвешенном состоянии находятся инородные включения различных размеров:

0,03-0,30 мкм — вирусы, бактерии;

10,0-100,0 мкм — частицы пыли;

30,0-200 мкм — волокна, волосы.

Бактерии находятся в воздухе в виде аэрозоля, который по размерам частиц делится на фазы:

• крупнокапельная, быстро оседающая фаза — капли диаметром более 100 мкм;

• мелкоядерная фаза — капли и частицы диаметром менее 10 мкм. Они длительно находятся во взвешенном состоянии и часть из них испаряется раньше, чем оседает («бактериальная пыль»)

Человек постоянно выделяет аэрозольные частицы, число которых колеблется от 1 тысячи до 30 миллионов в минуту, в зависимости от характера производимых им движений, состояния верхних дыхательных путей, интенсивности разговора. Капельки слюны, слизи при чихании, разговоре, кашле вместе с микробами попадают в воздух и с током воздуха могут разноситься далеко от источника. Бактерии могут оседать на пылевые частицы и «путешествовать» вместе с ними. Мелкодисперсные аэрозольные частицы практически не оседают и постоянно находятся во взвешенном состоянии. До 90% микробов, попадающих в воздух, погибают в течение 1 часа.

Воздух производственных помещений аптек — один из важных источников микробного обсеменения лекарственных препаратов. Одновременно воздух является каналом передачи микрофлоры из одного помещения в другое.

Поэтому для промышленного производства лекарственных препаратов разработаны регламентирующие документы по требованиям к микробной чистоте воздуха в помещениях для производства лекарственных форм в асептических условиях. Для помещений установлено 4 класса чистоы в зависимости от допустимого уровня загрязненности воздушной среды механическими частицами и микроорганизмами. Для помещений 1-2-го класса чистоты максимально допустимое число микробов колеблется от 0 до 50 в 1 м³ воздуха.

Степень микробной обсемененности воздуха помещений зависит от кубатуры, приходящейся на 1 человека.

Т а б л и ц а 1

Количество микробов в 1 м³ воздуха в зависимости от числа людей в помещении

Площадь на одного человека, м2	Число микробов в 1 м^3
2,5-3,6	8680
4,0-4,5	6262
5,5-6,6	3906
8,0-9,6	3658
10-18,0	1860

Поэтому поддержание микробной чистоты воздуха является действенной мерой профилактики заноса микробов в лекарственные формы. Для контроля степени микробной обсемененности воздуха в аптеках и на предприятиях фармацевтической промышленности регулярно проводится определение следующих микробных показателей:

• общее микробное число воздуха (ОМЧ) — количество микроорганизмов в 1 м³ воздуха;

• наличие в воздухе золотистого стафилококка, грибов (плесневых, дрожжевых, дрожжеподобных), синегнойной палочки, энтеробактерий.

Методы изучения микрофлоры воздуха

Используются седиментационный и аспирационный методы.

Седиментационный метод Коха прост, не требует специальной аппаратуры. Суть метода: чашка с питательной средой ставится на рабочем столе, открывается на 10 мин, закрывается и ставится в термостат, где выдерживается двое суток при температуре 37 °С, а затем двое суток при комнатной температуре.. После этого проводится подсчет выросших колоний по формуле Омелянского.

Для выявления грибов в воздухе посев проводится на среду Сабуро и чашка выдерживается при t 22-25 °С до 5 суток. Для выявления патогенных бактерий посевы проводят на дифференциально-диагностические среды: для золотистого стафилококка — на желточно-солевой агар, для энтеробактерий — на среду Эндо с добавлением генцианвиолетта (для торможения роста сапрофитов), для псевдомонад — на среду № 9 (ГФ XI, т. 2). Чашки выдерживают в открытом виде 1 час, после чего ставят в термостат для культивирования при t 37 °С на двое суток с последующим выдерживанием при комнатной температуре в течение 2 суток.

Расчет по модифицированной формуле Омелянского ведется на 1 м² поверхности.

X = n^.10⁴ / ^.r^2.t (дробь)

где X — ОМЧ воздуха обследуемого помещения (КОЕ); п — количество колоний на чашке (КОЕ); t — время экспозиции чашки (мин); ^.r² — площадь чашки Петри (см²); 10⁴ — пересчет м² в см².

Формула Омелянского, даже модифицированная, имеет ряд существенных недостатков: а) нельзя определить точный объем воздуха, из которого микробы оседают на чашку; б) мелкодисперсная фаза аэрозоля (а с ним и микробы) практически не оседает и токами воздуха постоянно поддерживается во взвешенном состоянии.

Результаты, получаемые с помощью этого метода, позволяют сравнить, сопоставить степень микробной обсемененности разных помещений и ориентироваться при разработке мероприятий по очищению воздушной среды.

Существует другой метод расчета ОМЧ воздуха при использовании посева во методу Коха, без формулы Омелянского:

Диаметр чашки, см	Множитель
8 9 10 11 12	100 80 60 50 45

Нормативы оценки санитарного состояния воздуха аптечных помещений

Помещения аптеки	Количество микробов, оседающих на 1 м^2 поверхности в минуту
	хорошо	удовлетворительно	плохо
Зал обслуживания	до 150	150-175	более 175
Ассистентская, фасовочная, дефекторная, материальная	до 100	100-125	более 125
Асептическая, кубовая-сте-рилизационная	до 50	50-75	более 75
Моечная	до 125	125-150	более 150

Аспирационный метод изучения микрофлоры воздуха. В этом методе используется принцип ударной струи воздуха, получаемый с помощью аппарата Кротова. Достоинства этого метода:

• точно учитывается объем воздуха, пропускаемого через чашку с питательной средой, установленную в аппарате;

• принцип ударной струи способствует фиксации в питатель ной среде всех взвешенных частиц аэрозоля.

Таким образом, удается фиксировать на поверхности плотной питательной среды максимальное количество микроорганизмов, обитающих в воздухе. Используя различные виды элективных и дифференциально-диагностических питательных сред, можно выявлять в воздухе все основные группы патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.

Нормативы оценки санитарного состояния воздуха аптечных помещений при использовании аспирационного метода

Помещения	Время	Количество микроорганизмов в единице объема
		ОМЧ (в 1 м^3)	St. aureus	Грибы
				в 250 л — 0 в 250 л — 0 в 250 л — 0 в 250 л — 0
Асептический блок, стерилизационная (чистая половина)	до работы	до 500	в 250 л — 0	в 250 л — 0
	после работы	до 1000	в 250 л — 0	в 250 л — 0
Ассистентская фасовочная, материальная	до работы	до 750	в 250 л — 0	в 250 л — 0
	после работы	до 1000	в 250 л — 0	в 250 л — 0
Моечная	во время работы	до 1000	в 250 л — 0	до 12 в м^3
Зал обслуживания	во время работы	до 1500	до 100 в 1 м^3	до 20 в 1 м^3

Мероприятия, направленные на уменьшение микробной обсемененности воздуха производственных помещений аптеки

1. Оконные фрамуги или форточки, используемые для проветривания помещений, защищаются съемными металлическими или пластмассовыми сетками с размерами ячейки не более 2x2 мм.

2. Поверхности стен и потолков производственных помещений должны быть гладкими, без нарушения целостности покрытия, допускающими влажную уборку с применением дезсредств (1% раствор хлорамина Б, 0,75% раствор хлорамина Б + 0,5% моющего средства, 1% раствор гипохлорита натрия, 3% раствор перекиси водорода + 0,5% моющего средства).

3. В производственных помещениях не допускается вешать занавески, расстилать ковры, разводить цветы. Информационные стенды и таблицы, необходимые для работы в производственных помещениях, должны изготовляться из материалов, допускающих влажную уборку и дезинфекцию.

4. Помещения асептического блока должны размещаться в изолированном отсеке и исключать перекрещивания «чистых» и «грязных» потоков посуды и вспомогательного материала. Асептический блок должен иметь отдельный вход или отделяться от других помещений производства шлюзами.

5. Перед входом в асептический блок должны лежать коврики из резины или пористого материала, смоченные дезинфицирующими средствами (0,75% раствор хлорамина Б + 0,5% моющего средства, 3% раствор перекиси водорода + 0,5% моющего средства).

6. Для исключения поступления воздуха из коридоров и производственных помещений в асептический блок в последнем необходимо предусмотреть приточно-вытяжную вентиляцию, при которой движение воздушных потоков должно быть направлено из асептического блока в прилегающие к нему помещения, с преобладанием притока воздуха над вытяжкой.

7. Рекомендуется с помощью специального оборудования создание горизонтальных или вертикальных ламинарных потоков чистого воздуха во всем помещении или в отдельных локальных зонах для защиты наиболее ответственных участков или операций (чистые камеры). Чистые камеры или столы с ламинарным по током должны иметь рабочие поверхности и колпак из гладкого и прочного материала. Контроль стерильности воздуха проводится не реже 1 раза в месяц.

8. Для дезинфекции воздуха и различных поверхностей в асептических помещениях устанавливают экранированные и неэкранированные бактерицидные лампы (стационарные и передвижные облучатели) мощностью не менее 2,0-2,5 Вт на 1 м³ объема помещения.

9. Перед началом работы необходимо проводить влажную уборку помещений (полов и оборудования) с применением дезсредств. Сухая уборка помещений запрещается, т. к. с пылью поднимаются в воздух микроорганизмы. Например, в помещении до уборки ОМЧ = 1500 микробов в 1 м³; в этом же помещении во время сухой уборки ОМЧ = 4500 микробов в 1 м³.

10. Генеральная уборка производственных помещений и торговых залов должна проводиться не реже 1 раза в неделю. Моют стены, двери, оборудование, полы. Потолки очищают от пыли влажными тряпками не реже 1 раза в месяц. Оконные стекла, рамы и пространство между ними моют горячей водой с мылом или другими моющими средствами не реже 1 раза в месяц.

11. Оборудование производственных помещений и торговых залов подвергается ежедневной уборке, шкафы для хранения лекарственных средств в материальных комнатах убирают по мере необходимости, но не реже 1 раза в неделю.

12. Уборку помещений асептического блока (полов и оборудования) проводят не реже 1 раза в смену в конце работы с использованием дезинфицирующих средств (1% раствор хлорамина Б, 0,75% раствор хлорамина Б + 0,5% моющего средства, 1% ра створ гипохлорита натрия, 3% раствор перекиси водорода + 0,5% моющего средства). Генеральную уборку проводят не реже 1 раза в месяц.

13. При заводском производстве лекарственных препаратов «чистые» помещения должны иметь многоступенчатую систему приточно-вытяжной вентиляции, которая создает кратность воздухообмена до 20 в час; причем непосредственно в помещения воздух должен поступать через фильтры тонкой очистки. Между помещениями различных классов чистоты должна поддерживаться постоянная разность давления в 3-5 мм водяного столба. При этом в помещениях более высоких классов чистоты давление должно быть выше.

Наиболее ответственные технологические операции должны быть защищены установками ламинарного потока стерильного воздуха.

Вход в помещения высокой степени чистоты должен осуществляться через воздушные шлюзы; через эти же шлюзы должна осуществляться и передача материалов.

Между помещениями различной степени чистоты должны быть электромеханические переговорные устройства.