- •Методичні вказівки з медичної мікробіології, вірусології та імунології
- •Тема: Клінічна мікробіологія
- •Методичні рекомендації по вибору, взяттю і транспортуванню матеріалу для мікробіологічного дослідження неепідемічних поразок
- •Критерії етіологічної ролі виділеної умовно-патогенної культури бактерій
- •Загальні правила забору, зберігання і пересилання матеріалу
- •Перелік уніфікованих мікробіологічних методів дослідження
- •Техніка взяття досліджуваного матеріалу для лабораторного дослідження в баклабораторії
- •1. Взяття крові.
- •2. Взяття ліквору.
- •3. Взяття жовчі.
- •4. Взяття сечі.
- •5. Взяття виділень дихальних шляхів (виділень зіву і носу, харкотиння, вміст бронхів, ексудати, резецировані тканини).
- •11. Дослідження кала.
- •13. До діагностики госпітальних інфекцій.
- •Критерії визнання етіологічної ролі виділеної умовно-патогенної культури бактерій
11. Дослідження кала.
Показаннями до бактеріологічного дослідження кала є:
1. Дисфункція кишковику - виявлення патогенних, умовно-патогенних мікробів і діагностика дисбактеріозу;
2. Гнійно-запальні процеси різноманітної локалізації і септичні стани, коли кишковик може бути первісним осередком локалізації збудника. В цих випадках також проводять діагностику кишкового дисбактеріозу, встановлюючи провідний вид мікрофлори;
3. Перед плановими складними операціями, особливо на органах травлення, або відразу же після негайних операцій.
Кишковий мікробіоценоз оцінюють по якісній і кількісній характеристиці біфідобактерій, виявленню і кількісній характеристиці умовно-патогенної мікрофлори (стафілококи, кандиди, протей, клебсієли, цитобактер, синьогнійна паличка). Визначаються також лактозонегативні нерухливі кишков. палички.
При відборі проб кала необхідно дотримання всіх загальних правив забору, зберігання і пересилання матеріалу для мікробіологічного дослідження. Техніка взяття кала має свої особливості: судна, горшки і інші місткості для збору фекалій повинні бути ретельно вимиті і позбавлені слідів дезінфікуючих засобів.
Фекалії збирають відразу після дефекації з означених місткостей або з пелюшки у стерильний посуд за допомогою стерильної скляною палички або дротовою петлею. За наявності гною, слизи в калі їх слід включити в пробу ,що відбирається. Фекалії можна отримати безпосередньо з прямої кишки з допомогою ректальних тампонів, ватних або ватно-марлевих, укріплених на металевій або дерев'яної паличці.
Фекалії, не поміщені в консервант, суспендують в фізіологічному розчині хлориду натрію в співвідношенні 1: 5 або 1: 10 і засівають не пізніше двох годин після взяття. При використанні консервантів (транспортних середовищ) матеріал придатний для дослідження ще протягом 12-24 годин при зберіганні при 4-6 С. В якості консерванту рекомендується використати в обсязі 1: 3 забуферений гліцериновий фосфатно-буферний розчин (рН=8).Для кількісного дослідження на кишковий дисбактеріоз зручно відбирати по 0.5-1.0 г кала в заздалегідь зважені на вагах стерильні флакончики. Після повторного зважування визначають істинну вагу проби і додають таку кількість 2% пептонної води, щоб отримати розведення 1: 10, що використовується як вхідне в подальшій роботі.
12. Дослідження гнійно-запальних уражень, викликаних неспоровими анаеробними бактеріями.В лікувальних установах, де застосовують сучасні засоби діагностики анаеробних інфекцій при гнійно-запальних процесах, аспорогенні анаеробні бактерії виділяються в 60-70% випадків з матеріалів, підданих дослідженню, часто в асоціації з анаеробними або факультативно-анаеробними мікроорганізмами. Найчастіше (43% - це представники бактероїдів, 24% - пептококи (анаеробні стафіло - і стрептококи), рідше - актиноміцети. Пропіонобактерії, еубактерії, грамнегативні коки (вейлонели). Спорооутворюючі анаероби з роду клостридій при гнійно-запальних процесах виділяються приблизно в 10% випадках.
Дослідженню на наявність анаеробів підлягають: кров, ліквор, плевральна, суглобна рідини; ексудати і гній. Дослідження виділень з свищів, глибоких ран може проводиться за умови ретельної обробки вихідного отвору. Досліджуються також і тканини, видалені при оперативних втручаннях, біопсії або аутопсії.Більш прийнятною методикою забору матеріалу є пункція ураженого органу абобезпосереднє вилучення ураженої тканини. Вміст дихальних шляхів і сеча мають діагностичне значення тільки в випадку, якщо вони зібрані пункцією.
Для посіву треба брати 0.5-1.0 мл рідкого матеріалу або 1-2 г (1-2 шматочки) щільної тканини.
Рідкий матеріал зручно забирати і транспортувати за допомогою шприцу, з якого після взяття матеріалу видаляється повітря, а голка для герметизації вколюється в стерильну гумову пробку. При такій методиці матеріал найменш піддається впливу кисню повітря.
Кусочки видаленої тканини поміщають в пробірки або флакони, або заздалегідь заповнені безкисневим газом (азот), або заповнені на 3/4 обсягу транспортним середовищем, залитою зверху вазеліновим маслом.
Найчастіше в якості таких середовищ використовуються тіогликолеве середовище та середовище Тароцци.
Якщо для забору матеріалу використовується тампон (найменш вдала форма, але вона дасть результат при виділенні нестрогих анаеробів), то він негайно занурюються в транспортне середовище під маслом.
Паралельно зі збором матеріалу для посіву з нього необхідно приготувати препарати для забарвлення за Грамом.
Матеріал слід доставляти в лабораторію в максимально короткий термін (1-2 години).