Заняття 13.

ТЕМА. Структурна організація білків. Фізико-хімічні властивості білків. Реакції осадження білків. Денатурація.

ОБҐРУНТУВАННЯ ТЕМИ. Білки відіграють важливу роль у процесах життєдіяльності. Вони виконують функції, які складають основу життя (ферменти, скоротливі білки, захисні білки).

У клінічній практиці широко використовують визначення білків у кровіта інших біологічних рідинах з діагностичною метою (білкова недостатність, захворювання печінки, нирок, запалення серозних оболонок).

МЕТА.

1. Пояснювати механізм утворення пептидного зв’язку.

2. Пояснювати структурну організацію білків (первинної, вторинної, третинної та четвертинної структур), що необхідно для розуміння їх функцій та патологічних змін при захворюваннях.

3. Пояснювати залежність фізико-хімічних властивостей білків від їх амінокислотного складу.

4. Уміти аналізувати якісні реакції на α-амінокислоти для визначення амінокислотного складу білків та використовувати біуретову реакцію для кількісного визначення білків.

ОРІЄНТОВНА КАРТКА ДЛЯ ПІДГОТОВКИ ДО ЗАНЯТТЯ

(самостійна позааудиторна робота студентів).

Зміст і послідовність дій	Вказівки до навчальних дій
1. Пептиди. Реакції утворення пептидів.	1.1. Механізм утворення пептидного зв’язку.
2. Білки як біополімери.	2.1. Функції білків. 2.2. Способи сполучення -амінокислот у молекулах білків. 2.3. Зв’язки, що формують первинну, вторинну, третинну та четвертинну структури.
3. Рівні структурної організації білкових молекул.	3.1. Первинна, вторинна, третинна, четвертинна структури, типи зв’язків, що стабілізують ці структури. 3.2. Методи визначення структури білка (по Ф.Сенгеру та Едману).
4. Хімічний синтез пептидів та білків.	4.1. Прості та складні білки. 4.2. Класифікація білків у залежності від природи простетичної групи та просторової форми: глобулярні та фібрилярні. 4.3. Фактори стійкості існування білків у колоїдних розчинах.
5. Механізм осадження білків, види осадженняю	5.1. Зворотне осадження білків та його використання в медичній практиці. 5.2. Незворотне осадження білків, фактори, що його викликають.
6. Денатурація білка, її ознаки.	6.1. Денатуруючі фактори (прилади). 6.2. Ренатурація білка.

Алгоритм лабораторної роботи.

1. Оцінити дію на білки сульфату амонію, три хлороцтової кислоти та сульфосаліцилової кислоти. Дати аргументацію.

Хід виконання.

а) До 5 крапель 1%-го розчину яєчного білка додати 20 крапель розчину сульфату амонію (NH₄)₂SO₄. Утворюється осад, розчинний у воді.

б) До 5 крапель 1%-го розчину яєчного білка додати 1 мл три хлороцтової кислоти. Утворюється осад, нерозчинний воді.

в) До 0,5 мл розчину білка додати 0,5 мл 20%-го розчину сульфосаліцилової кислоти. Утворюється осад, нерозчинний воді.

2. Біуретова реакція.

Принцип реакції. Іони міді Сu²⁺ у лужному середовищі утворюють з пептидними групами (кислотно-амідний або пептидний зв'язок) комплексну сполуку синьо-фіолетового кольору.

Хід виконання.

До 5 крапель 1%-го розчину яєчного білка додати 5 крапель 10%-го розчину NaOH та 2 краплі 1%-го розчину CuSO₄. Перемішати і спостерігати синьо-фіолетове забарвлення.