Изучение качественного состава веществ первичного обмена травы ортилии однобокой

Бочаров А.И. (5 курс, фарм. ф-т), Трубников А.А.

Кафедра фармакогнозии ЯГМА

Научный руководитель – д.ф.н., проф. Фурса Н.С.

Ортилия однобокая (Orthilia secunda Garke.), многолетнее растение семейства вересковые (Ericaceae). Она достаточно широко распространена в лесной зоне России. Ортилия давно и успешно применяется в народной медицине для лечения и профилактики воспалительных гинекологических заболеваний. Однако анализ доступной нам литературы, в том числе зарубежных источников, показал, что в химическом отношении это растение изучено недостаточно.

В связи с этим, целью нашей работы явилось полное фитохимическое изучение ортилии однобокой. Данное сообщение посвящено исследованию качественного состава веществ первичного обмена (аминокислот, свободных моносахаров, макро- и микроэлементов).

Для хроматографического разделения аминокислот нами использована восходящая хроматография на бумаге Filtrak FN-4 и Ленинградская С, в двух системах растворителей (н-бутанол-уксусная кислота-вода 4:1:2 и н-бутанол-уксусная кислота-вода 18:2:5). Пятна аминокислот проявляли обработкой 0,1% р-ром нингидрина и нагреванием до 100ºС. Для сравнения использовали достоверные вещества свидетели.

В траве ортилии нами обнаружены аргинин, аспарагин, валин, глицин, глутамин, глутаминовая кислота, пролин, серин и тирозин.

Свободные моносахара также анализировали методом хроматографии на бумаге в системах растворителей н-бутанол-уксусная кислота-вода 4:1:2 и этилацетат-пиридин-вода 2:1:2. Пятна сахаров обнаруживали обработкой р-ром анилинфталата и нагреванием до 100ºС.

Исходя из полученных данных, мы обнаружили, что в траве ортилии в свободном виде содержится только галактоза.

Анализ качественного состава макро- и микроэлементов проводили рентгенофлуоресцентным и атомно-адсорбционными методами. При рентгенофлуоресцентном анализе в траве ортилии выявлено 5 макро- и 26 микроэлементов. Среди макроэлементов в траве ортилии больше всего накапливается калия и кальция, среди микроэлементов – железа, марганца, бария, цинка и стронция. При оценке экологической чистоты и безопасности сырья нами отмечено, что содержание всех токсичных металлов и мышьяка не превышало ПДК, установленных для БАД к пище. Исключение составил образец травы ортилии, заготовленный в Республике Саха, в нем превышено содержание ПДК для мышьяка в 1,34 раза.

При атомно-адсорбционном анализе обнаружено 8 микроэлементов, причем данные этого анализа хорошо согласуются с данными рентгенофлуоресцентного анализа.

Таким образом, проведенные исследования позволяют получить более полное представление о химическом составе травы ортилии однобокой, перспектива применения которой в научной медицине, несомненна.

Разработка методики анализа растительного сырья методом хромато-масс-спектрометрии

Джурко Ю.А. (аспирант)

Химико-токсикологическая лаборатория Ярославской

областной клинической наркологической больницы

Научный руководитель – зав. лабораторией Ершов М.Б.

У ряда лекарственных растений фармакологическая активность обусловлена не одним компонентом, а совокупностью действующих веществ. Поэтому для объяснения механизма наблюдаемого фармакологического эффекта важно провести широкий химический скрининг изучаемого растительного материала.

Для этой цели целесообразно использовать методы, сочетающие разделение исследуемых компонентов с одновременной их идентификацией. Наиболее полно соответствует указанным критериям метод хромато-масс-спектрометрии. Его преимущество также заключается в наличии возможности проведения исследования без использования стандартов, за счёт достоверной идентификации определяемых соединений по характерным масс-спектрам.

Учитывая изложенные факты, нами была разработана методика анализа химического состава растительного сырья с использованием экстракции с последующим хромато-масс-спектральным скринингом. В качестве экстрагента нами был выбран метанол, как наиболее универсальный органический растворитель.

Высушенное сырьё гомогенизировали и растворяли в метаноле в соотношении 1:10. Настаивание проводили в течение суток, т.к. более короткий срок не давал достаточного выхода экстракции, а более длительный приводил к избыточному загрязнению вытяжки. Из полученного экстракта отбирали аликвоту объёмом 100 мкл, упаривали и реконструировали равным объёмом силилирующего агента – BSTFA (N,N-бистриметилсилилтрифторацетамид) – при температуре 100 ºС в течение 20 минут с последующим охлаждением до комнатной температуры. Дериватизацию проводили с целью улучшения хроматографических свойств полярных соединений. В испаритель хроматографа вводили 1 мкл образца. Условия анализа заключались в следующем: температура испарителя – 280°С, капиллярная колонка – HP-5MS с неподвижной фазой: диметилполисилоксан с 5% фенильных групп, газ носитель – гелий (1 мл/мин), температура термостата колонки в режиме программирования – с 50°С (1 мин) до 300°С (10 мин), 25°С/мин. Детектирование производилось в режиме сканирования ионов 40-800 m/z, при напряжении на филаменте -70 В, токе эмиссии -34,6 µА, напряжении на ионном ускорителе +28,3 В, напряжении на электроном умножителе -1576 В.

Разработанная методика анализа была апробирована на примере таких объектов, как жёлуди, галлюциногенные грибы, семена и коробочки мака, листья конопли и т.п. Проведённые исследования показали, что методика обладает высокой эффективностью, чувствительностью (на уровне пикограммов), экспрессностью и универсальностью.