Определение а л к а л о и д о в

Метод Крафта.

1. Каплю свежевыжатого из растения сока наносят на фильтровальную бумагу, пропитанную реактивом Драгендорфа, при наличии алкалоидов в соке на бумаге появляется оранжевое пятно (кольцо). О наличии алкалоидов можно судить по оранжевым пятнам, возникающим на местах соприкосновения свежего растения и бумаги при их сжатии. Для проведения анализа методом Крафта необходимо иметь щипцы для сдавливания и индикаторную бумагу, качество которой имеет решающее значение.

2. Небольшой срез того или иного органа растения (лист, стебель, цветки) накладывают на полученную бумагу и с помощью плоскогубцев сдавливают. При наличии алкалоидов, выступивший при сжатии сок окрашивает бумагу в оранжево-красный цвет.

При наличии хлорофилла (стебель, лист) оранжевое окрашивание наблюдается в виде каймы вокруг зеленого пятна или в виде оранжево-красных пятен между зелеными пятнами.

Способ приготовления бумаги: Полоски бумаги для хроматографии размером 10х70 см погружают в реактив, состоящий из смеси раствора А, 20 мл раствора Б и 40% уксусной кислоты, после чего бумагу высушивают в вертикальном положении при комнатной температуре до воздушно сухого состояния и разрезают на полоски размером 2,5х6 см. Бумага должна быть желтого цвета.

Раствор А: 0,42 г основного нитрата висмута растворяют в 25 мл 20% уксусной кислоты. Раствор Б: 8,0 г йодистого калия растворяют в 20 мл дистиллированной воды.

Данный метод не может быть применён к растениям, содержащим пигмент, маскирующий на бумаге алкалоидную реакцию, а так же к органам, выжать сок из которых не всегда можно (семена, кора и др.). Недостатком метода является нечувствительность реактивной бумаги к эфедрину и псевдоэфедрину, вследствие чего алкалоидность различных видов эфедры определению этим методом не подлежат.

Метод Крафта может быть рекомендован в качестве полевого экспресс – метода для рекогносцировочной оценки растений на наличие алкалоидов.

Определение алкалоидов методом извлечения.

Растения грубо измельчают, помещают в пробирку, заливают 1% раствором уксусной кислоты, чтобы кислота покрывала весь материал и нагревают до начала кипения ( 1:10). До охлаждения жидкость фильтруют через фильтр и испытывают на присутствие алкалоидов, для чего 1-2 капли фильтрата при помощи стеклянной палочки наносят на часовое стекло, рядом с ним наносят каплю реактива Драгендорфа и осторожно смешивают капли. При слиянии капель, в случае наличия алкалоидов жидкость темнеет, а затем выпадает кристаллический осадок оранжевого цвета.

Определение с а п о н и н о в

1. Реакция пенообразования: Растение грубо измельчают и в пробирке готовят извлечение 1:10 на дистиллированной воде, фильтруют. В одну пробирку помещают 5 мл фильтрата, а в другую 5 мл дистиллированной воды (контроль). Обе пробирки энергично встряхивают. Настой, содержащий сапонины при этом даёт обильную пену, не исчезающую в течение длительного времени.

2. При прибавлении к 2 мл настоя нескольких капель ацетата свинца образуется осадок. Причем тритерпеновые сапонины осаждаются средним ацетатом свинца, а стероидные – основным.

3. Реакция Лефона: к 2 мл водного настоя прибавляют 1 мл конц. Серной кислоты, 1 мл этилового спирта и 10 капель 10% раствора сернокислого железа. При нагревании появляется сине – зеленое окрашивание.

4. К 2 мл настоя прибавляют 1 мл 10% раствора нитрита натрия и 1 каплю конц. серной кислоты. Появляется кроваво-красное окрашивание.