- •Часть I
- •Введение
- •1. Внеаудиторная подготовка
- •1.1. Аминокислоты
- •1.1.1. Строение, классификация, номенклатура
- •1.1.2. Биологические функции аминокислот
- •1.1.3. Физико-химические свойства аминокислот
- •Физические свойства l-аминокислот
- •Кислотно-основные свойства протеиногенных аминокислот
- •1.1.4. Химические свойства аминокислот
- •1.1.4.1. Реакции с участием карбоксильной группы
- •1.1.4.2. Реакции с участием аминогруппы
- •1.1.4.3. Реакции с одновременным участием карбоксильной и аминогрупп
- •1.1.4.4. Специфические реакции аминокислот
- •Специфические реакции, используемые для идентификации и количественного анализа α-аминокислот и белков
- •1.2. Полипептиды
- •1.2.1. Природа пептидной связи
- •1.2.2. Классификация полипептидов, отдельные представили и их биологическая роль
- •1.2.2.1. Малые линейные пептиды
- •Пептидные гормоны
- •1.2.2.2. Циклопептиды
- •1.2.2.3. Белки
- •1.2.2.3.1. Уровни структурной организации белков
- •1.2.2.3.2. Классификация белков
- •1.2.2.3.3. Физико-химические свойства белков
- •1.2.2.3.4. Выделение белков
- •Контрольные вопросы, задачи и упражнения
- •2. Лабораторный практикум
- •2.1. Идентификация аминокислот и белков
- •2.1.1. Общие качественные реакции аминокислот
- •2.1.2. Специфические качественные реакции аминокислот
- •2.1.3. Хроматографические методы разделения и идентификации аминокислот и белков
- •Rf для аминокислот при разделении методом хроматографии на бумаге
- •Практическая контрольная работа по идентификации аминокислот и белков химическими и хроматографическими методами
- •2.2. Количественный анализ аминокислот и белков
- •2.2.1. Титриметрические методы анализа аминокислот
- •2.2.2. Спектральные методы количественного определения белка
- •Множители ƒ для вычисления концентрации белка
- •Практическая контрольная работа по количественному анализу аминокислот и белков
- •Библиографический список
- •Оглавление
- •Часть I 0
- •Аминокислоты и полипептиды
- •443100. Г. Самара, ул. Молодогвардейская, 244. Главный корпус
- •443100. Г. Самара, ул. Молодогвардейская, 244. Корпус №8
Кислотно-основные свойства протеиногенных аминокислот
L-Аминокислота |
pKa |
pI |
||
α-СООН |
α-NH2 |
Другие группы |
||
Глицин |
2,34 |
9,60 |
- |
5,97 |
Аланин |
2,34 |
9,60 |
- |
6,00 |
Серин |
2,21 |
9,15 |
- |
5,68 |
Цистеин |
1,71 |
8,33 |
|
5,07 |
Аспарагиновая кислота |
1,88 |
9,60 |
3,65 (β-COOH) |
2,77 |
Аспарагин |
2,02 |
8,80 |
- |
5,41 |
Фенилаланин |
2,58 |
9,24 |
- |
5,91 |
Тирозин |
2,20 |
9,11 |
|
5,63 |
Триптофан |
2,38 |
9,39 |
- |
5,89 |
Гистидин |
1,77 |
9,20 |
6,00 (имидазол) |
7,60 |
Валин |
2,32 |
9,69 |
- |
5,96 |
Треонин |
2,71 |
9,62 |
- |
6,16 |
Метионин |
2,28 |
9,21 |
- |
5,74 |
Глутаминовая кислота |
2,19 |
9,67 |
4,25 (γ-COOH) |
3,08 |
Глутамин |
2,17 |
9,13 |
- |
5,65 |
Лейцин |
2,36 |
9,60 |
- |
6,04 |
Изолейцин |
2,32 |
9,76 |
- |
6,02 |
Аргинин |
2,18 |
9,08 |
13,2 (гуанидин) |
10,76 |
Лизин |
2,18 |
8,95 |
10,5 (ε-NH2) |
9,74 |
Пролин |
1,99 |
10,60 |
- |
6,30 |
Таким образом, для идентификации и количественного анализа аминокислот определение температуры плавления и удельного вращения позволяет получить лишь ориентировочные данные.
Существенный прогресс в идентификации и количественном анализе сложных смесей аминокислот, образующихся при гидролизе белков, достигнут благодаря работам Мура и Стайна. Разработанный ими аминокислотный анализатор, в основе которого лежит метод ионообменной хроматографии, позволяет легко проводить качественный и количественный анализ и инструментальное детектирование этих соединений. Химической основой работы аминокислотного анализатора является реакция аминокислот с нингидрином, которая будет описана в п. 1.4.. Для идентификации аминокислот очень удобны также распределительная хроматография фенилизотиоцианатных производных аминокислот, тонкослойная хроматография и хроматография на бумаге.
ИК-, ПМР-спектроскопия и масс-спектрометрия также могут быть использованы для идентификации индивидуальных аминокислот. Масс-спектральный анализ аминокислот ограничен их низкой летучестью, и их обычно переводят в более летучие производные (эфиры, ацетамиды и др.).